勋章菊叶片再生技术的探讨

[目的]研究勋章菊叶片再生技术,筛选适合勋章菊叶片再生的最佳培养配方。[方法]以日本引进的勋章菊叶片为材料,置床于添加不同种类和浓度激素的MS培养基中进行愈伤组织和不定芽诱导的正交试验,筛选勋章菊叶片再生的最佳培养基配方。[结果]在MS＋TDZ（0.8-1.0 mg/L）＋NAA（0.05-1.0 mg/L）培养基上可形成紧密型绿色的愈伤组织;叶片接种于MS＋TDZ（0.5-1.0 mg/L）＋NAA（0.05-1.0 mg/L）培养基上可形成许多不定芽,诱导效率达100%;健壮的不定芽长至2.0-3.0 cm长时移至1/2 MS＋NAA（0.1mg/L）培养基中,其发根状况良好,生根率达100%。[结论]为勋章菊的高频快繁提供了新途径,并为勋章菊的遗传转化及培育新品种奠定基础。     

中国石竹叶片愈伤组织形成·分化及植株再生

[目的]为了研究中国石竹叶片愈伤组织的诱导及植株的再生。[方法]通过叶片愈伤组织诱导再分化和叶片直接诱导不定芽2种途径获得了石竹的再生植株。[结果]以植株中部带叶基的叶片愈伤组织诱导再分化效果最好。叶片愈伤组织在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L培养基中不定芽分化率最高(50%～60%)。幼叶在MS+NAA 0.3mg/L+6-BA1.0mg/L培养基上培养47d可直接诱导出不定芽。与愈伤组织分化成芽相比,幼叶直接诱导不定芽芽数少,但生长快,苗较高。最佳增殖培养基是MS+6-BA 0.2mg/L+IAA 0.2mg/L,最佳生根培养基是1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+0.2%活性碳。[结论]叶片作为外植体具有来源丰富、取材方便、操作简单的优点,探讨植物叶片的再生分化特性具有实际的意义。     

亳菊叶片组织培养技术优化的研究

[目的]研究不同植物生长物质对诱导亳菊叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。[方法]以亳菊组培苗的叶片作为外植体,使用正接和背接2种方式接种于正交设计的培养基中,诱导叶片形成愈伤组织;再将愈伤组织接种于新配制的培养基中,对愈伤组织诱导率和芽分化率进行方差和极差分析。[结果]诱导亳菊叶片形成愈伤组织最佳的培养基组合为MS＋2.0 mg/L 2,4-D＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;诱导愈伤组织分化成不定芽的最佳培养基是MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/LNAA。[结论]为亳菊的遗传转化体系构建和诱变育种提供了高效的操作系统。     

绿萝组织培养和遗传转化条件优化

为优化绿萝离体再生条件，建立更高效的遗传转化体系，分别以绿萝叶片和叶柄为外植体，比较不同植物生长物质对绿萝不定芽诱导和植株离体再生的影响。并通过PCR技术克隆拟南芥AtFALDH基因，利用农杆菌介导法对绿萝愈伤组织进行遗传转化，比较不同转化条件下绿萝愈伤组织抗性不定芽诱导率。结果表明，绿萝叶柄愈伤组织和不定芽诱导效果均优于叶片。绿萝叶片愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D，该培养基下诱导率大约为61.5%；叶柄愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA，该培养基下诱导率达到97.8%。绿萝叶片不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，该培养基下诱导率接近100%；叶柄不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA，该培养基下诱导率约为100%，但叶柄来源的愈伤组织诱导产生的不定芽数量较多，而且生长更旺盛。生根最适培养基为1/2 MS+0.05 mg/L NAA，该培养基下生根...     

光皮桦叶片再生体系的建立

【目的】建立光皮桦叶片高效再生体系,为光皮桦的良种培育及遗传转化研究提供依据。【方法】以光皮桦无菌叶片为外殖体,分别用含0.6 mg/L TDZ 的MS、WPM和1/2MS培养基进行不定芽诱导分化,筛选最佳基本培养基;向筛选出的最佳基本培养基中添加0.05 mg/L NAA及不同质量浓度（0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2 mg/L）TDZ的激素组合组成不定芽分化培养基,用于诱导不定芽分化,筛选最佳不定芽诱导分化培养基;以1/2MS培养基为基本培养基,分别附加0,0.05,0.1,0.5,1.0,2.0 mg/L的IBA或0.5,1.0,2.0,3.0 mg/L的NAA组成生根培养基,用于再生苗生根,筛选最佳生根培养基,建立光皮桦叶片再生体系。【结果】光皮桦无菌叶片诱导不定芽的最适基本培养基为MS培养基,其诱导的不定芽最多,且芽生长状况良好,颜色深绿;最适不定芽诱导分化培养基为：MS+TDZ 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.5 g/L,在该培养基上叶片丛生芽诱导率可达到80.00%,平均不定芽数高达12.00个,且芽生长健壮,呈深绿色;最适再生苗生根培养基为：1/2MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂5.5 g/L,在该培养基上再生苗的生根率达100%,平均根数为14.5个,平均根长为11 cm,根较粗壮,基部无愈伤组织,且产生了很多毛细根。【结论】建立了光皮桦无菌苗叶片的高效再生体系。     

龙椒2号大甜椒子叶离体培养中诱导不定芽的研究

[目的]采用子叶离体培养方法快速繁殖龙椒2号大甜椒,尤其在诱导不定芽阶段能更快、更多地诱导出不定芽。[方法]在诱导不定芽阶段中以MS为基本培养基,添加不同的激素配比进行对比,以优选出最佳的激素配比方案。[结果]生长素NAA对形成愈伤组织有主导作用,添加量以0.6 mg/L较为合适,6-BA和KT对促进芽分化都能起主导作用,6-BA以0.4 mg/L为宜,KT以1.0 mg/L为宜。[结论]选用子叶切片转入MS＋NAA0.6 mg/L培养基上,诱导出愈伤组织,然后将愈伤组织切块转入MS＋6-BA0.4 mg/L＋NAA0.5mg/L或MS＋KT1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L培养基上,分化出多数量的不定芽,然后利用这些不定芽进一步扩繁、生根,进而形成再生植株。     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

亳菊茎尖愈伤组织诱导与再生植株的研究

[目的]研究亳菊茎尖组织培养技术,为亳菊产业化生产提供科学依据。[方法]在不同的MS培养基中,考察不同浓度的6-BA、NAA对亳菊茎尖愈伤组织、丛生芽、再生植株诱导的影响。[结果]茎尖诱导愈伤组织的最佳培养基为MS＋1.00 mg/L6-BA＋0.30mg/L NAA,以MS＋0.50 mg/L6-BA＋0.10 mg/L NAA为芽的诱导培养基,芽诱导率达100%;最佳的生根培养基为1/2MS＋0.30 mg/L IBA。[结论]通过亳菊茎尖愈伤组织培养技术,可以达到快速繁殖的目的。     

丰香草莓叶片的植株再生研究

[目的]为采用叶片组织培养技术进行大规模生产草莓种苗提供依据。[方法]以丰香草莓叶片为外植体,用4种不同的培养基诱导其愈伤组织,并对愈伤组织进行扩繁,筛选最佳的诱导培养基。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基最快产生愈伤组织,愈伤组织诱导率、生根率、不定芽诱导率均最高,分别为69.4%、10%、11.67%,且愈伤组织体积较大,生根总数最多,不定芽生长茂盛,叶片多而大,最终获得具根系可移植室外的完整植株543株,增殖扩繁倍数达50,增殖效果极好。MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L培养基的愈伤组织诱导率为63.8%,且愈伤组织体积最大。[结论]草莓叶片诱导愈伤组织、不定芽并最终获得大量再生植株的最佳培养基是:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L。     

花榈木胚轴愈伤组织的诱导及植株再生

［目的］通过愈伤组织诱导途径,建立快速高效的花榈木再生体系。［方法］花榈木成熟种子在MS培养基中萌发获得无菌苗,以幼苗的胚轴为外植体诱导愈伤组织,经继代后进一步诱导不定芽和生根。［结果］诱导花榈木愈伤组织的最适培养基为MS＋ 1.0 mg/L 2,4 D＋0.5 mg/L KT,诱导率达96.7％;诱导愈伤组织分化不定芽的培养基为MS＋0.5 mg/L NAA＋0.1 mg/L TDZ,其不定芽诱导率为85.0％;平均每块愈伤产生不定芽6.2个;生根的最适培养基为1/2WPM＋0.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA,生根率为88.9％。炼苗移栽后,成活率可达85.0％。［结论］花榈木胚轴愈伤组织诱导途径的植株再生是一套快速高效的离体再生体系,可为花榈木种质资源保存、转基因、遗传育种等研究提供重要参考。     

长寿花离体快繁研究

[目的]研究长寿花离体快繁的培养基配方和培养条件。[方法]以长寿花的幼嫩叶片作为外植体,以MS为基本培养基,诱导出不定芽进行快速繁殖,并比较添加4种浓度的BA和NAA对长寿花不定芽的诱导和生根效果的影响。[结果]长寿花幼嫩叶片的诱导和生长与生长素、细胞分裂素2种激素有关系,两者的配比直接影响了叶片的再生频率。长寿花叶片诱导和不定芽增殖的最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,最适生根培养基为1/2 MS+NAA0.5 mg/L,不定芽在此培养基上的生根率最高,移栽成活率为95%。通过直接诱导可获得较高的不定芽诱导率,同时增殖培养的增殖系数达到10,大大缩短了常规育苗时间。[结论]该研究建立了长寿花组织培养的再生体系,为其快速繁殖及大规模的工厂化育苗提供科学依据。     

红掌组培快繁技术优化研究

[目的]对红掌组培快繁技术体系进行优化。[方法]以红掌红粉佳人品种为材料,通过设置不同的基本培养基和激素配比,研究红掌的不定芽诱导、增殖和生根等情况,以筛选出最佳的培养配方和方法。[结果]最佳愈伤组织诱导和不定芽分化培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,其愈伤组织诱导率为73.3%,不定芽分化率为90.9%;在增殖培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L上诱导出的芽数量与大小最适宜;生根培养以1/2MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭1.0 g/L培养基表现最好;移栽基质以珍珠岩+草炭土(1∶1)混合栽培基质成活率最高,达95.6%。[结论]为红掌种苗的工厂化生产提供了参考。     

金边北海道黄杨再生体系的建立及其快繁初探

[目的]探索金边北海道黄杨再生体系建立的方法和条件。[方法]以MS为基本培养基,配置不同种类和不同浓度激素的培养基,对金边北海道黄杨幼嫩叶片和腋芽进行不定芽诱导培养、增殖培养和生根培养。[结果]MS可作为金边北海道黄杨再生体系的基本培养基。6-BA配合NAA有利于叶片、腋芽愈伤组织和不定芽的诱导,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基效果最佳,腋芽诱导率高达66.67%。较高浓度的6-BA配合较低浓度的NAA有利于丛生芽的增殖,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基增殖效果较理想,增殖率高达328.57%。MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖3%或1/4MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖2%可获得最佳生根效果。[结论]该体系的建立为金边北海道黄杨种苗快速繁殖提供参考依据。     

蟆叶秋海棠“光灿”组织培养技术研究

以蟆叶秋海棠"光灿"的叶片、叶柄作为外植体材料进行组织培养,通过控制培养基组分、光照条件、培养时间等对其最佳组培条件进行探讨。结果表明,生长较为成熟的叶片为最佳外植体,最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L。初代培养的光照强度以1200 lx为最佳,继代与生根培养的光照强度以1500 lx为最佳。诱导初期适当的暗培养有助于促进后期芽点的分化。     

杂交构树叶片愈伤诱导及植株再生

以杂交构树试管苗叶片为外植体,探讨了不同植物生长调节剂组合、叶片着生部位、GA3浓度对杂交构树不定芽再生的影响,建立了叶片不定芽再生体系,为今后的遗传转化奠定了基础。结果表明:杂交构树叶片愈伤诱导和不定芽分化的最适培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,愈伤诱导率为100%,不定芽再生率为91.7%;叶片培养最佳取材部位是自试管苗顶端向下伸展叶第l～3片叶;培养基添加0.5mg/LGA3,芽增殖系数高达8.22,芽有一定的伸长生长;附加低浓度的6-BA0.3mg/L,芽明显伸长,长为3.89cm,得到壮苗,可直接用于生根培养;生根培养添加NAA1.0mg/L,诱导生根的时间最短为9d,生根率最高,达86.7%。     

高原野生濒危药材独一味的组培快繁技术研究

[目的]探究独一味组培快繁技术体系,保护并合理利用独一味资源.[方法]选取独一味无菌苗的子叶、嫩芽和幼根为外植体,采用不同类型的培养基和不同种类的植物生长调节剂进行组培快繁研究.[结果]独一味幼叶、嫩芽和幼根均可诱导出愈伤组织,其中幼根的愈伤组织诱导率最高,达93.5％,出愈时间为7d,最适诱导培养基为MS ＋1.0mg/L2,4-D＋ 0.5 mg/L 6-BA＋ 0.5 mg/L NAA;丛生芽诱导的适宜培养基为MS＋ 1.0 mg/L 6-BA＋ 0.5 mg/L NAA,诱导率达88.8％;生根的适宜培养基为1/2 MS＋ 0.5 mg/L NAA,诱导率高达97.9％.[结论]利用组织培养技术能够实现独一味的快速繁殖,为独一味资源的可持续利用提供参考.     

两种胡萝卜外植体无性系培养比较研究

分别以具有潜在有利变异性状的胡萝卜的根及丛生芽为外植体,比较了不同外植体获得无性系的灭菌方法和分化增殖生根的激素配比.结果表明,不同外植体的灭菌方法差别较大:用肉质根做外植体时,促进产生愈伤组织效果最好的培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L,促进芽分化增殖效果最好的培养基为MS+6-B...     

乌药的离体培养和植株再生研究

[目的]为乌药的规模化人工育苗提供理论依据。[方法]以乌药植物当年生健壮枝条为外植体,研究不同激素种类及浓度对其不定芽的诱导及生根的影响,筛选出最佳培养基。[结果]适宜于乌药组织培养的最佳外植体取材时间为6~7月,以当年生带芽茎段的嫩枝为最适宜;2.5 mg/L 6-BA是乌药不定芽增殖时最有效的浓度;诱导乌药外植体不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.5mg/L+NAA 0.2 mg/L;乌药苗在增殖过程中的继代周期以40~50 d为宜;最佳壮苗培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳生根培养基为MS+NAA 0.5 mg/L,生根率98%~100%。[结论]采用合适的外植体以及激素种类与浓度为最佳配比的培养基可使传统的中药材乌药植物成功地诱导不定芽的分化、生根与再生。     

杉木茎段不定芽诱导及植株再生条件筛选

【目的】探索广西杉木快繁技术,为杉木组织培养和种苗供应提供参考依据。【方法】以杉木优良树种基部枝条为试验材料,进行茎段外植体消毒、不定芽诱导及植株再生研究。【结果】以75％酒精处理30s＋0．1％升汞消毒6min的效果较理想,污染率为30％;初代培养基为1／2MS＋NAA0．2mg／L＋6-BA0．6mg／L,第8d即有芽萌动,诱导率可达47％;继代培养基I／2MS＋IBA0．3nlg／L＋6-BA0．4mg,L中加入蔗糖30g／L,25d腋芽增殖倍数可达3．4倍;1／4MS＋IBAO．15mg／L＋NAA0．075mg／L对杉木生根诱导效果较好,生根率为52％。【结论】,杉木外植体用75％酒精和0．1％升汞消毒6min效果较理想,适当减少培养基中矿质元素有利于杉木外殖体芽的诱导和试管苗的增殖生长,NAA可促进试管苗生根。