白术多糖的提取、纯化和活性研究

[目的]提取和纯化白术多糖,并探讨多糖中蛋白对小鼠脾淋巴细胞转化的影响。[方法]采用醇沉分级、脱蛋白和Sephadex G-75制备柱从中药白术中提取分离得到cPAM、zPAM和PAM 3种多糖,并对这3种多糖进行体外淋巴细胞转化试验。[结果]3种白术多糖对ConA诱导的T淋巴细胞增殖均有促进作用;浓度为5μg/ml的zPAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用;浓度为5和10μg/ml的PAM对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的促进作用。[结论]白术多糖的纯化程度与脾淋巴细胞增殖有一定关系;纯化程度高的多糖对小鼠脾淋巴细胞的增殖有促进作用;白术粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

马蹄香含药血清对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨嗜细胞的影响

[目的]研究马蹄香（Valeriana jatamansiJones）含药血清对小鼠脾淋巴细胞及腹腔巨嗜细胞的影响。[方法]通过MTT法检测含药血清对正常小鼠脾淋巴细胞转化的影响,结合中性红吞噬实验检测含药血清对小鼠腹腔巨噬细胞能量代谢水平及吞噬能力的影响。[结果]在一定剂量范围内,马蹄香含药血清组的脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞无论单独作用或协同非特异性丝裂原（Con A或LPS）作用与对照组均有显著性差异。[结论]马蹄香含药血清能够增强小鼠脾淋巴细胞转化能力,提高腹腔巨噬细胞能量代谢水平和吞噬能力,具有一定的免疫增强作用。     

金钗石斛多糖对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α·NO的影响

[目的]研究金钗石斛多糖对脂多糖（LPS）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、一氧化氯（NO）的影响。[方法]用不同浓度金钗石斛多糖作用于小鼠腹腔巨噬细胞,LPS作为诱导剂,采用放射免疫法检测细胞培养液中TNF—α的含量,硝酸酶还原法测定细胞培养液中NO的含量,荧光法测定细胞内诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的活性,实时PCR（real—time PCR）法测定TNF-α mRNA、iNOS mRNA的表达。[结果]与LPS组比较,金钗石斛多糖在50～400mg／L范围内可干预LPS对小鼠巨噬细胞的作用,使小鼠腹腔巨噬细胞TNF—α、NO合成减少,iNOS活性降低。TNF-α mRNA、iNOS mRNA的表达降低。[结论]金钗石斛多糖可改善LPS对小鼠腹腔巨噬细胞的作用,使TNF—α mRNA、iNOS mRNA的表达降低,TNF—α、NO合成减少,从而起到抗炎的作用、     

牛磺酸对有丝分裂原刺激的小鼠免疫细胞功能的影响

为探讨牛磺酸对有丝分裂原刺激的小鼠免疫细胞功能的影响,本实验体外设计了终浓度为0.5、5、50、和500μg/mL四个浓度梯度。开展了Tau对有丝分裂原刺激的小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞功能影响的研究。结果Tau对LPS刺激的腹腔巨噬细胞分泌IL-1β具有免疫增强作用;对LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞的增殖反应无显著作用。Tau对LPS刺激的脾淋巴细胞增殖反应在一定浓度范围内无显著作用,但当浓度较高时,有显著的抑制作用;Tau对ConA刺激的脾淋巴细胞分泌IL-2具有极显著的增强和调节作用;Tau在较高浓度时对LPS刺激的脾淋巴细胞分泌IgG也具有极显著的促进作用。牛磺酸对有丝分裂原刺激的小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞的免疫功能具有增强和调节作用。     

复方霍山石斛浸膏增强免疫力作用的研究

[目的]研究复方霍山石斛浸膏对小鼠免疫力的影响。[方法]将200只健康雌性小鼠分为5个试验组,每组分高、中、低和空白对照4个剂量组[3.0、1.0、0.5、0 g/(kg.bw)],连续灌胃给药30 d后分别对不同剂量组小鼠进行细胞免疫的功能检测(ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验、DNFB诱导小鼠DTH试验)、体液免疫功能检测(抗体生成细胞检测试验、血清溶血素测定试验)、单核-巨噬细胞功能检测(小鼠炭粒廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验)和NK细胞活性测定。[结果]各项检测结果与空白对照组相比,均能刺激小鼠脾淋巴细胞增殖、转化作用,促进小鼠迟发型变态反应作用,提高小鼠抗体生成细胞数和血清溶血素水平,增强小鼠的单核-腹腔巨噬细胞吞噬、碳廓清能力及NK细胞的活性。[结论]复方霍山石斛浸膏具有增强免疫力功能。     

五味子药渣多糖的提取及其免疫活性

提取并纯化得到五味子药渣多糖,对其体外免疫活性进行初步评价。经水提醇沉、乙醇分级、活性碳脱色、Sevage法和链蛋白酶联合脱蛋白,从五味子药渣中获得c SDP、f SDP和SDP 3种多糖。通过体外淋巴细胞转化试验验证3种多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,结果表明:3种五味子药渣多糖在一定质量浓度下对未经活化的小鼠淋巴细胞有增殖作用,对Con A诱导的小鼠T淋巴细胞增殖有显著促进作用;多糖的纯化程度越高对小鼠脾淋巴细胞的增殖促进作用越强;五味子药渣粗多糖中的蛋白对小鼠脾淋巴细胞的增殖没有影响。     

金钗石斛复方对小鼠免疫功能的影响

为了研究金钗石斛复方对小鼠免疫功能的影响,将实验小鼠随机分为对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组;采用Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验及迟发性变态反应试验测试试验组小鼠的细胞免疫功能;采用抗体生成细胞检测及溶血试验测试其体液免疫功能;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验测试其特异性免疫功能.结果表明,与对照组比较,金钗石斛复方能够明显提高脾淋巴细胞增殖能力、溶血空斑数、小鼠抗体积数、巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力;金钗石斛复方对提高小鼠NK细胞活性能力无显著影响.金钗石斛复方对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫及巨噬细胞功能均有明显的增强作用.     

Caffeoyl Glycoside对小鼠免疫细胞功能的影响

本实验室从胡黄连根茎分离到1,6-di-O-caffeoyl-β-D-glucopyranoside单体Caffeoyl Glycoside（CG）,体外试验测定其对小鼠免疫细胞功能的影响。通过MTT法检测CG对Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖,NK细胞对K562细胞杀伤活性的影响,以及小鼠腹腔巨噬细胞（PMΦ）能量代谢水平;CG对PMΦ吞噬中性红能力的影响。CG在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原（Con A或LPS）作用均能够显著增强小鼠脾淋巴细胞、PMΦ的增殖能力（P〈0.05或P〈0.01）,CG单独作用就能显著提高NK对K562细胞的杀伤活性（P〈0.05或P〈0.01）。CG在体外对小鼠主要免疫细胞的增值和功能方面具有显著的促进作用（P〈0.05或P〈0.01）。研究结果显示CG具有特异性与非特异性的免疫增强作用。     

红松多酚对免疫细胞活性影响的研究

[目的]了解红松多酚对免疫细胞功能的影响.[方法]采用MTT法研究了红松多酚对大鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响,以中性红吞噬试验考察了红松多酚对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响.[结果]研究表明,随着给药剂量的增加,红松多酚对机体免疫细胞具有活性促进作用.剂量浓度达到0.3 mg/ml时,脾淋巴细胞增殖呈现极显著增加（P＜0.01）,腹腔巨噬细胞的吞噬中性红能力亦呈现极显著增强（P＜0.01）.并且在一定浓度范围内,作用效果均呈现剂量-效果关系.[结论]红松多酚对于机体的免疫细胞活性具有促进作用.     

地龙注射液免疫活性的体外研究

[目的]探讨地龙注射液的免疫调节活性及其作用机理。[方法]通过地龙注射液体外培养刺激小鼠脾淋巴细胞,采用MTT法和双抗夹心ELISA法测定地龙注射液对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子IL-2的影响。[结果]地龙注射液能显著地直接或协同ConA或LPS刺激脾淋巴细胞增殖,也能极显著地增加IL-2的分泌量。[结论]该研究表明地龙注射液具有较明显的免疫调节活性。     

白蔹多糖的分离纯化及其对小鼠脾细胞增殖的影响

[目的]分离纯化白蔹多糖,研究白蔹均一多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[方法]采用水提醇沉法提取白蔹多糖,通过三氯乙酸法脱除蛋白,用中空纤维超滤膜和DEAE Cellulose DE-52对白蔹多糖进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱法鉴定纯度并测定分子量,PMP柱前衍生化测定单糖组成,采用MTT法测定均一多糖对Con A和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[结果]PAJM-A均一多糖分子量为1.29×105u,由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(Glc A)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xly)组成,其物质的量比为1.36∶1.87∶2.02∶1.58∶1.04,均一多糖对Con A诱导的T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞有较显著的增殖作用。[结论]PAJM-A是一种新的白蔹均一多糖,并与Con A、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用。     

蒲黄醇提取物对C57BL／6荷瘤小鼠免疫功能的影响

[目的]研究蒲黄醇提物对C57BIM6荷瘤小鼠免疫功能影响。[方法]通过建立Lewis肺癌小鼠移植瘤动物模型,以抑瘤率为指标考察蒲黄醇提物的体内抗肿瘤活性,分别测定其抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数;四氮唑盐（MTY）法对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活性进行测定;ELISA法测定荷瘤小鼠血清中白细胞介素一2（IL-2）、肿瘤坏死因子-a（TNF-a水平。[结果]蒲黄醇提取物100mg／kg·d组对肿瘤生长有明显的抑制作用（P〈0．01）,其抑瘤率为48．3％,蒲黄醇提物三个剂量组均能提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾脏指数。同时100和200mg／kg·d组能显著提高荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和荷瘤小鼠血清中IL-2、TNF—ol的水平。[结论]蒲黄醇提物具有提高荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫的作用。     

金顶侧耳多糖体内免疫活性的初步研究

[目的]探究金顶侧耳多糖提取方法及对动物机体免疫功能的影响。[方法]通过液体培养金顶侧耳,以乙醇沉淀法从发酵液中提取金顶侧耳多糖,并采用蒽酮比色法和3,5-二硝基水杨酸法相结合测定多糖的得率。通过称量胸腺、脾脏的重量,计算胸腺指数和脾脏指数来探讨不同剂量的金顶侧耳多糖对小鼠免疫功能的影响。[结果]该法提取的金顶侧耳多糖得率为14.35%,随金顶侧耳多糖的剂量的增加,小鼠脾脏重量增加,注射多糖的小鼠免疫力明显高于环磷酰胺（CY）对照组,低于生理盐水对照组。[结论]金顶侧耳多糖能对CY有减毒作用,能够增强小鼠免疫功能。     

酵母多糖对小鼠免疫功能影响的体外实验研究

[目的]研究酵母多糖对小鼠免疫功能的影响,为酵母多糖相关产品的开发利用提供可靠的实验依据。[方法]分离提取小鼠的脾细胞,分为添加酵母多糖组和不加酵母多糖的对照组,检测小鼠脾细胞的增殖活性;留取细胞上清液,测定白细胞介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）含量;用流式细胞术检测T淋巴细胞和B淋巴细胞的数量,观察酵母多糖对T、B细胞增殖的影响。[结果]酵母多糖组增殖活性明显高于对照组（P〈0．01）;在一定剂量范围内,该组IL-2、IFN-γ的含量与酵母多糖呈剂量依赖关系,另外酵母多糖对T、B细胞均有明显的增殖效果。[结论]酵母多糖可显著提高小鼠免疫系统的功能。     

马尾藻多糖的提取及免疫研究

[目的]研究马尾藻多糖的提取工艺和药理免疫能力。[方法]以广西北海涠洲岛特有的马尾藻为材料,探索马尾藻多糖的最佳提取工艺,并对其进行免疫试验。[结果]结果表明,马尾藻多糖提取的最佳条件为：水浴温度80℃,提取时间10 h,胶体磨处理马尾藻2 min,藻粉∶水=1∶20,提取液的浓缩液体积数∶95%酒精=1.0∶3.0。马尾藻多糖对小鼠免疫的试验表明,多糖剂量为200、400、600 mg/kg.d时,小鼠脾的重量显著增加（P〈0.05） 当多糖剂量为400、600 mg/kg.d时,小鼠腋下淋巴结的重量显著增加（P〈0.05）,对单核巨噬细胞的吞噬功能有显著影响,能明显提高小鼠碳粒廓清速率,提高吞噬指数α（P〈0.05）,并对巨噬细胞增生以及淋巴小结形成有明显作用 当多糖剂量为600 mg/kg.d时,小鼠淋巴结不但产生明显的淋巴小结,而且形成大量巨噬细胞。[结论]该研究结果为马尾藻生理活性物质多糖的更进一步研究提供参考。     

苦豆子对小鼠免疫功能的影响研究

[目的]探讨苦豆子对小鼠免疫功能的影响,为中药免疫抑制剂的开发提供一定的参考依据。[方法]将8周龄昆明小鼠按低、中、高浓度分为3组,灌胃给药,每天给药量分别为5、10、15 g/kg,连续7 d,灌服0.5 ml/d饮用水的小鼠为对照组,通过淋巴细胞转化试验和常规HE染色试验,研究苦豆子水煎剂对小鼠淋巴细胞增殖率和脾脏组织结构的影响。[结果]与对照组相比,经3个浓度苦豆子水煎剂处理后小鼠的T、B淋巴细胞增殖率均极显著降低(P<0.01)。经中浓度和低浓度苦豆子水煎剂处理后小鼠脾脏红髓中B淋巴细胞密度明显降低,其中经中浓度苦豆子水煎剂处理后密度最小。[结论]苦豆子水煎剂可降低小鼠淋巴细胞增殖率和脾脏红髓中B淋巴细胞密度,从而对脾脏的免疫清除功能产生影响。苦豆子对小鼠的免疫功能有一定的抑制效应。     

姬松茸液体发酵各组分多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

采用MTT法依次用热水、冷碱、热碱浸提姬松茸菌丝体,研究得到的3种水溶性多糖及胞外多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.结果表明:4种多糖在不同质量浓度下可单独或协同Con A刺激淋巴细胞增殖;以0.5-0.25μg.mL-1冷碱提取的水溶性多糖,可促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖(P>0.05).     

脱毒菜籽多肽对小鼠免疫功能的影响

[目的]研究脱毒菜籽多肽对小鼠免疫功能的影响。[方法]试验组以低、中、高剂量组0.334、0.667和2.000 g/(kg·d)的脱毒菜籽多肽灌胃小鼠,对照组以等体积纯净水灌胃,30 d后进行二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应试验、Con A诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验、抗体生成细胞检测和血清溶血素测定试验、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、NK细胞活性测定试验、试验前后小鼠体重以及脏器/体重比值试验。[结果]脱毒菜籽多肽对小鼠的耳廓肿胀、脾淋巴细胞转化、吞噬指数a和NK细胞活性均有显著影响,但对小鼠体重增长、胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、脾抗体生成细胞量、血清溶血素水平和腹腔巨噬细胞吞噬能力均无影响。[结论]脱毒菜籽多肽具有增强免疫力的功能。