不同月龄山羊小肠黏膜免疫相关细胞的数量变化

为揭示不同发育阶段山羊小肠黏膜免疫特点的内在规律，本试验采用组织学和组织化学方法，对0．5、2和12月龄山羊小肠不同肠段的上皮内淋巴细胞、杯状细胞和肥大细胞的分布和数量变化进行了比较研究。结果显示：随着年龄增长，小肠各段上皮内淋巴细胞和肥大细胞的数量逐步增多（P〈0．05），而杯状细胞却逐渐减少（P〈0．05）。上皮内淋巴细胞数从十二指肠至回肠逐渐减少，0．5月龄的回肠上皮内淋巴细胞数仅是十二指肠和空肠的84．45％和98．14％（P〈0．05），肥大细胞的分布规律与上皮内淋巴细胞相似；相反，杯状细胞数从十二指肠至回肠逐渐增多。以上结果提示，在山羊小肠的早期发育中，杯状细胞起着重要的黏膜屏障功能，随着肠道黏膜免疫系统的发育，上皮内淋巴细胞和肥大细胞的黏膜防御作用进一步增强。     

绵羊自然感染贝氏莫尼茨绦虫对小肠黏膜免疫相关细胞的数量变化

运用组织学和组织化学染色法,分别对自然感染贝氏莫尼茨绦虫的成年绵羊（感染组）与正常成年绵羊（对照组）的小肠各肠段的上皮内淋巴细胞、浆细胞、杯状细胞和嗜酸粒细胞的分布和数量变化进行了比较研究。结果显示：感染组小肠各段上皮内淋巴细胞、浆细胞、杯状细胞和嗜酸粒细胞数量均显著高于对照组,其中感染组十二指肠、空肠和回肠的上皮内淋巴细胞数量分别比对照组增加了169.11%、230.38%和233.42%（P〈0.01）;嗜酸粒细胞数量分别比对照组增加了116.78%、123.87%和164.51%（P〈0.01）;浆细胞数量分别比对照组增加了127.34%、72.97%和328.26%（P〈0.01）;杯状细胞数量分别比对照组增加了33.40%、41.42%和133.17%。对照组和感染组上皮内淋巴细胞和杯状细胞从十二指肠到回肠均逐渐减少,相反,对照组和感染组嗜酸粒细胞数量从十二指肠到回肠均逐渐增多,对照组小肠固有层浆细胞数量从十二指肠到空肠增加,空肠到回肠减少,感染组小肠固有层浆细胞数量从十二指肠到回肠均逐渐增多;对照组十二指肠、空肠、回肠的上皮内淋巴细胞、上皮内杯状细胞、浆细胞和嗜酸粒细胞均差异极显著（P〈0.01）;感染组十二指肠、空肠、回肠的上皮内杯状细胞、浆细胞和嗜酸粒细胞均差异极显著（P〈0.01）,感染组上皮内淋巴细胞空肠与回肠差异极显著（P〈0.01）,但十二指肠与空肠差异不显著（P〉0.05）。研究结果表明,贝氏莫尼茨绦虫感染成年绵羊后,成年绵羊通过特异性黏膜免疫细胞上皮内淋巴细胞增生加强细胞免疫水平,浆细胞增生加强体液免疫水平,同时还通过非特异性黏膜免疫细胞,嗜酸粒细胞和杯状细胞的增生进一步加强黏膜免疫水平以抵抗贝氏莫尼茨绦虫对绵羊的感染。可见绵羊可以通过黏膜免疫相关细胞增生加强局部免疫力以监视虫体免疫逃逸来抵抗寄生虫的感染。     

肉犊牛小肠黏膜免疫相关细胞的数量变化研究

分别选择1、4、6月龄各4头利杂犊牛的十二指肠、空肠、回肠,利用组织化学法和图像分析法研究犊牛小肠的上皮内淋巴细胞、杯状细胞和肥大细胞的数量变化.结果显示在同一月龄犊牛的小肠的上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少,而杯状细胞的数量逐渐增加,肥大细胞的密度逐渐降低.在1、6月龄犊牛十二指肠、空肠、回肠的上皮内淋巴细胞数量之间差异极显著(P＜0.01);4月龄十二指肠的上皮内淋巴细胞数量最多(P＜0.01).在1月龄犊牛十二指肠、空肠、回肠杯状细胞的数量差异极显著(P＜0.01);4和6月龄犊牛十二指肠和空肠之间的杯状细胞的数量差异不显著(P＞0.05),但二者与犊牛回肠杯状细胞的数量差异极显著(P＜0.01).各年龄犊牛十二指肠、空肠、回肠的肥大细胞密度差异极显著(P＜0.01),4月龄时犊牛小肠的肥大细胞密度最低.结果提示犊牛的黏膜免疫水平可能与其机体的发育相一致.     

成年牦牛小肠结构及黏膜免疫相关细胞数量变化研究

为了揭示成年牦牛小肠结构和黏膜免疫相关细胞的分布与数量变化的规律,本研究采用组织化学法、图像分析法及透射电镜技术,对成年牦牛小肠形态结构及上皮内淋巴细胞、杯状细胞、浆细胞和肥大细胞数量的变化进行了研究.结果表明:牦牛小肠壁由黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜构成.小肠中十二指肠绒毛高度/隐窝深度的比值最高、肌层最厚;空肠绒毛最高、隐窝最深;3段小肠绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度的比值和肌层厚度之间差异极显著(P＜0.01).牦牛小肠上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少,且差异极显著(P＜0.01),杯状细胞和肥大细胞数量也逐渐减少,而浆细胞数量则由十二指肠到回肠逐渐递增,且差异极显著(P＜0.01).电镜观察表明,牦牛小肠绒毛上皮细胞连接为紧密连接、缝隙连接和半桥连接,细胞游离面微绒毛丰富;上皮内淋巴细胞核大、胞质较少;杯状细胞呈典型高脚杯状,细胞顶端含有大量的分泌颗粒而膨大;浆细胞呈圆形或椭圆形,染色质沿核膜排列,胞质中有丰富的内质网;肥大细胞呈椭圆形,胞质内充满电子密度极强的大小不等的膜包颗粒.成年牦牛小肠结构特点能大大地提高了对高寒草地牧草的消化和吸收效率;而小肠各段有规律的分布了丰富的黏膜免疫相关细胞,显示牦牛小肠黏膜具有很强的黏膜免疫屏障功能.     

不同浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响

试验利用组织化学法和图像分析法研究不同浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量的影响.选用8周龄Balb/c小鼠(均为雄鼠)50只,随机分成5组,每组10只,分别饲喂5种不同浓度的大蒜溶液,80 mL/d,试验期为10 d.试验结果显示:各试验组小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少;杯状细胞的数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐增加. 1%浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量的影响明显高于对照组、2%组、5%组、10%组,且差异极显著(P<0.01).     

天蚕素和合生素对AA肉鸡小肠黏膜形态和小肠免疫细胞的影响

为研究日粮中添加天蚕素、合生素对AA肉鸡小肠黏膜形态及免疫细胞的影响,试验选用480只1日龄健康AA肉鸡,随机分为4组,每组4个重复,每个重复30只鸡。对照组（Ⅰ组）饲喂基础日粮,试验组（Ⅱ~Ⅳ组）分别在基础日粮中添加0.5%天蚕素、0.3%合生素、0.5%天蚕素+0.3%合生素。试验期42 d。结果显示,与Ⅰ组相比,Ⅳ组十二指肠、回肠绒毛高度极显著升高（P<0.01）;Ⅱ组空肠和回肠、Ⅲ组小肠各段隐窝深度显著或极显著降低（P<0.05;P<0.01）;Ⅱ、Ⅲ组小肠各段和Ⅳ组十二指肠、回肠绒毛高度/隐窝深度显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;Ⅱ组空肠绒毛宽度显著降低（P<0.05）,Ⅲ组十二指肠和空肠、Ⅳ组空肠和回肠绒毛宽度均极显著降低（P<0.01）;Ⅱ、Ⅲ组空肠黏膜厚度显著升高（P<0.05）,Ⅳ组小肠各段黏膜厚度均极显著升高（P<0.01）。Ⅱ组回肠上皮内淋巴细胞数量显著升高（P<0.05）,Ⅲ组十二指肠、Ⅳ组小肠各段上皮内淋巴细胞数量极显著升高（P<0.01）;Ⅲ组十二指肠、Ⅳ组十二指肠和回肠杯状细胞数量极显著升高（P<0.01）;Ⅳ组空肠肥大细胞数量显著升高（P<0.05）。综上所述,天蚕素、合生素单独或联合添加均能改善AA肉鸡小肠黏膜结构,促进小肠黏膜免疫细胞增殖,联合添加效果最佳。     

6月龄苏尼特羊小肠黏膜结构及上皮内淋巴细胞和杯状细胞的分布

应用组织学和组织化学方法研究了6月龄苏尼特羊小肠黏膜结构、肌层厚度及黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞分布数量的变化规律。结果显示,肠绒毛长度以十二指肠最长,为(353.25±60.48)μm,其次为空肠(317.27±72.02)μm和回肠(275.36±47.62)μm,且空肠和回肠之间差异显著(P<0.05);黏膜厚度以十二指肠最厚,为(669.15±139.04)μm,空肠和回肠分别为(586.72±134.50)和(551.85±91.32)μm,十二指肠与后两者间差异极显著(P<0.01);肌层厚度以回肠最厚,为(280.45±58.33)μm,与空肠(167.16±42.63)μm和十二指肠(148.78±38.36)μm相比,差异极显著(P<0.01);隐窝深度以十二指肠最深,为(309.36±74.21)μm,其次为空肠(286.23±57.23)μm,回肠最浅,为(237.83±48.86)μm,相互之间差异极显著(P<0.01);十二指肠和空肠的V/C比值分别为(1.80±0.45)和(2.00±0.48),空肠和回肠(1.39±0.34)相比,差异显著(P<0.05);小肠各段黏膜上皮内淋巴...     

不同剂量乳猪壮对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量变化的试验

利用组织化学法和图像分析法研究庆大霉素和不同剂量的“乳猪壮”在防治仔猪大肠杆菌病时对仔猪小肠的上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量变化.试验选用60头刚出生的0日龄的杜×大×长三元杂交健康仔猪,随机分6个处理组,每个处理组设10只(雌雄均有),分别饲喂生理盐水、庆大霉素和4种不同剂量的“乳猪壮”,试验期为7d.结果显示,各试验组仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、同肠逐渐减少;杯状细胞的数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐增加.4mL乳猪壮组对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量明显高于其他组且差异极显著(P＜0.01).结果显示,4 mL乳猪壮组对改善仔猪小肠黏膜的防御功能,提高肠道的防御能力有一定作用,可以防治仔猪大肠杆菌病.     

大蒜 小鼠 黏膜免疫 淋巴细胞 杯状细胞

试验利用组织化学法和图像分析法研究不同浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量的影响。选用8周龄Balb／c小鼠（均为雄鼠）50只,随机分成5组,每组10只,分别饲喂5种不同浓度的大蒜溶液,80mL／d,试验期为10d。试验结果显示：各试验组小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少;杯状细胞的数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐增加。1％浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量的影响明显高于对照组、2％组、5％组、10％组,且差异极显著（P〈0．01）。     

1日龄大通牦牛小肠黏膜结构及黏膜免疫相关细胞的形态学研究

为了研究新生牦牛小肠黏膜结构及黏膜免疫相关细胞的分布特点,试验采用常规H.E.染色、改良甲苯胺蓝(MTB)染色和糖原及多糖高碘酸-Schiff试剂染色技术对1日龄大通新生牦牛小肠黏膜结构进行了观察,并对免疫相关细胞的分布以及数量进行了检测。结果表明:1日龄犊牦牛空肠的小肠肠绒毛长度和隐窝深度最高,回肠和十二指肠依次降低;空肠的V/C值分别比十二指肠和回肠高72.75%和74.66%;空肠的黏膜厚度最厚,回肠和十二指肠依次降低,三者之间厚度差异均显著;十二指肠的肌层厚度最厚,回肠和空肠依次降低,三者之间厚度差异均显著。1日龄犊牦牛十二指肠到回肠上皮内淋巴细胞数量相对稳定(P0.05);十二指肠的杯状细胞数量最多,空肠和回肠差异不显著;从十二指肠到回肠,其肥大细胞的数量呈逐渐增多的趋势,各肠段之间差异均显著。说明1日龄犊牦牛空肠消化吸收能力较强,各肠段免疫能力差异较大。     

湿热应激对藏绵羊和山羊生长性能、抗氧化能力以及免疫功能的影响

本试验旨在研究藏绵羊和山羊在相同营养及湿热应激条件下血清激素、抗氧化和免疫指标的变化规律,考察湿热应激对藏绵羊和山羊生长性能、抗氧化能力以及免疫功能影响的差异。选取年龄和体重[(45.83±3.54)kg]相近的藏绵羊与山羊(波尔山羊×本地黄羊)各6只,试验共进行135 d,其中预试期15 d,正试期120 d。每日测定温湿度指数(THI),每月测定藏绵羊和山羊的血清相关指标。结果表明:1)5—7月份,羊舍THI随月份的增加显著升高(P0.05),6—8月份羊舍THI均大于72,因此将6—8月份定为湿热应激期。2)7、8月份藏绵羊和山羊直肠温度和呼吸频率均显著高于5月份(P0.05),且湿热应激期内藏绵羊直肠温度和呼吸频率均显著高于山羊(P0.05)。3)正试期内,湿热应激使得藏绵羊和山羊的干物质采食量最大降幅分别为10.70%和10.44%,平均日增重(ADG)最大降幅分别为50.00%和47.82%。4)羊舍THI由71.17(5月份)升高到76.82(7月份),藏绵羊和山羊血清皮质醇和胰岛素浓度显著升高(P0.05),血清葡萄糖和三碘甲状腺原氨酸浓度显著降低(P0.05)。湿热应激下,藏绵羊血清中生长激素和甲状腺素浓度的最大降幅均大于山羊。5)除藏绵羊7月份和山羊8月份血清总抗氧化能力,藏绵羊和山羊7、8月份的血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和总抗氧化能力均显著低于5月份(P0.05)外,血清丙二醛浓度均显著高于5月份(P0.05)。湿热应激下,山羊血清超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力和丙二醛浓度变化幅度均大于藏绵羊。6)与5月份相比,藏绵羊和山羊8月份的血清免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G和白细胞介素-2浓度显著降低(P0.05),而血清肿瘤坏死因子-α浓度则显著升高(P0.05)。湿热应激下,藏绵羊血清免疫球蛋白、白细胞介素-2和肿瘤坏死因子-α浓度的变化幅度均大于山羊。综上所述,湿热应激状态下藏绵羊和山羊的呼吸频率和直肠温度升高,抗氧化能力和免疫功能降低,从而导致生长性能降低。藏绵羊生长性能和免疫功能受湿热应激影响较大,而山羊抗氧化能力受湿热应激影响较大。     

欧拉型藏羊杂交培育结果及其对比分析

为推广优良品种在高寒牧区成为优势种,我们选纯种欧拉型藏羊为父本,青海藏羊和小尾寒羊为母本,经A、B、C三组杂交、培育和试验结果表明：杂种羔羊出生重：A组为4.3 kg,B组为3.7 kg,C组为4.4 kg,对照组分别0.8、0.7和1.2 kg,A、B、C三组初生重与对照组间差异极显著（P＜0.01）,C组初生重最大;12月龄杂种羊的胴体重与对照组比,欧x寒藏组提高率达109%,欧x寒组提高率为88%,欧x藏组提高率为60%,与对照组比较均差异极显著（P＜0.01）;欧拉杂一代成年公羊体重比青海藏羊高9.5%、母羊高7.2%;比小尾寒羊公体重高4.2%、母羊高5.8%;肉质中高能量、高蛋白、低脂肪和低胆固醇等特性数值仍在上升,且氨基酸含量更为丰富。     

藏羊AMPK、ACC和GS酶活分布及饥饿应激对其酶活的影响

为分析AMPK等酶对机体代谢的影响,采用酶联免疫分析法（ELISA）,分别测定正常饲养和饥饿48 h后藏羊各组织的AMPK、ACC和GS的活性.结果表明：AMPK、ACC和GS分布于藏系绵羊各组织中,且各组织器官中3种酶活性差异显著（P＜0.05）;饥饿应激导致骨骼肌、肝脏、肾脏和小肠组织中AMPK活性升高,骨骼肌、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和小肠组织中ACC活性下降,骨骼肌、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和小肠组织中GS活性下降.因此,AMPK、ACC和GS在藏系绵羊的各组织器官中分布广泛;饥饿应激可能通过激活AMPK表达,下调ACC和GS表达而调节藏羊的应激代谢.     

欧拉型藏绵羊GHRHR基因部分片段的克隆及多态性研究

对欧拉型藏绵羊生长激素释放激素受体(GHRHR)基因部分片段进行PCR扩增和克隆测序(GenBank Accession No:EU289218),利用BioEdit7.0.9.0、DnaSP 4.10.9和MEGA4.0等生物信息学软件对该部分序列与GenBank中普通牛、瘤牛、水牛相应序列进行比对分析,并对58只欧拉型藏绵羊该基因片段进行SmaI-RFLP研究。结果表明:欧拉型藏绵羊与普通牛、瘤牛、水牛3个物种基因序列间同源性大小依次为92.5%、92.0%、91.5%;4个物种间共发现41处序列间碱基差异(9.65/100 bp),其中藏绵羊与普通牛、瘤牛、水牛3个牛亚科物种均存在差异碱基29处。碱基变异类型主要表现为碱基转换和颠换,少数为碱基插入和缺失。推导的部分氨基酸序列间同源性大小依次为88.8%、88.8%、94.4%。58只欧拉型藏绵羊该基因片段SmaI-RFLP分析均为单态,表现为AA基因型。     

藏系绵羊IGF-1基因表达水平的实时荧光定量PCR检测

采用实时荧光定量PCR SYBR GreenI荧光染料法,对藏系绵羊皮肤细胞中IGF-1基因的表达水平进行了相对定量分析,建立了快速检测IGF-1基因表达量的方法。通过该方法检测出了IGF基因在藏系绵羊皮肤细胞中的相对表达量,且表达量有差异。该方法具有灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快等优点。     

甘南玛曲不同年龄欧拉型藏羊放牧采食量季节动态研究

为确立高寒地区天然草地欧拉型藏羊放牧采食量的季节动态变化,本试验采用TiO₂外源指示剂法和瘤胃尼龙袋法分别测定欧拉型藏羊不同季节排粪量和牧草消化率从而计算放牧采食量。结果表明:玛曲高寒草地牧草干物质消化率(DMD)和粗蛋白(CP)含量夏季显著(P < 0.05)高于冬春季与秋季;欧拉型藏羊各年龄段排粪量3季差异显著(P < 0.05)且秋季 > 夏季 > 冬春季;随着年龄增长,欧拉型藏羊三季牧草采食量均有增大的趋势,同年龄段不同季节的藏羊采食量和代谢采食量(除4岁母羊)差异显著(P < 0.05)且秋季 > 夏季 > 冬春季;各年龄段藏羊累计牧草消耗量(AFC)差异显著(P < 0.05)分别为339.37,757.58,1185.93和1655.61 kg。由此可见,牧草干机物质消化率、排粪量和采食量夏秋季较高、冬春季较低,随着年龄增大排粪量和采食量有增高的趋势。因此,在高寒牧区应提倡草地季节性畜牧业,充分考虑牧草营养与动物营养需求之间的耦合性来提高经济和生态效益。     

Detection Selection Signatures for High-altitude Adaptation in Tibetan Goats

This study was aimed to screen the selection signatures on autosome of Tibetan goats and discover genes with important germplasm characteristics.Based on the Illumina 50K chip genotyping data of Tibetan goats,Xinjiang goats and Taihang goats,high quality SNP markers were obtained after filtering out SNPs with low allele frequency and not located.The genetic structure was analyzed by genetic differentiation coefficients (Fst).Meanwhile,the principal component analysis (PCA) and phylogenetic tree construction were conducted to determine the population structure.The selected genes in Tibetan goats were also identified through genome selective signals testing,which contained Di and XP-EHH with top 5% valued as a significant threshold.To identify the genes that were under selection,bioinformatics databases were examined that contained relevant data on goats.The results showed that 48 358 SNPs were identified in these three populations.Population genetic analysis showed that the three groups had similar genetic distance (Fst<0.05),but the degree of genetic differentiation of Tibetan goats (Fst=0.0376) was significantly higher than that of Xinjiang goats (Fst=0.0256) and Taihang goats (Fst=0.0257),indicating that Tibetan goats breed had already generated a certain degree of genetic differentiation.Based on these SNPs,36 SNPs and 211 genes were identified in Tibetan goats by Fst and XP-EHH.Among them,EGFR,AKT1,PDHB and PFKP genes were related to high altitude adaptation.These genes were found to be mainly enriched in purine metabolism pathway,metabolic pathway and HIF-1 signaling pathway.In conclusion,the genomic SNPs had more advantage in revealing the selection of Tibetan goats in high-altitude adaptability,and provided new theoretical references for the protection and utilization of germplasm resources.     

西藏山羊高海拔适应性的选择信号筛选

试验旨在对西藏山羊常染色体的选择信号进行筛选,发掘重要的种质特性基因。基于西藏山羊、新疆山羊和太行山羊群体的Illumina 50K芯片分型数据,通过过滤等位基因频率较低和未定位的变异位点,得到高质量的SNPs标记;通过计算遗传分化系数（Fst）来分析群体遗传结构,同时对群体进行主成分分析（principal component analysis,PCA）和系统进化树构建以确定其群体结构;借助Di和XP-EHH两种不同的方法,以前5%为阈值,通过SNPs注释得到西藏山羊基因组受选择基因,并利用相关的生物信息学数据分析库对候选基因进行功能富集分析。结果显示,在3个群体中共鉴定出48 358个SNPs标记,3个群体有相近的遗传距离（Fst<0.05）,西藏山羊的遗传分化程度（Fst=0.0376）明显高于新疆山羊（Fst=0.0256）、太行山羊（Fst=0.0257）,表明西藏山羊群体已经产生一定程度的遗传分化。通过选择信号分析,在西藏山羊群体中共筛选到36个受到较强选择的位点和211个候选基因,其中EGFR、AKT1、PDHB和PFKP等基因与高海拔适应性相关。这些基因主要富集在嘌呤代谢通路、代谢途径和HIF-1信号通路等。利用基因组SNP标记可以更全面地揭示西藏山羊高海拔适应性的选择进展,为种质资源的保护和利用提供重要参考。     

哺乳期藏羊羔羊复胃的发育性变化

为了研究羔羊复胃的发育性变化,试验以0-112日龄哺乳期藏羊羔羊为研究对象,采用大体解剖学方法测定了放牧条件下0、3、7、14、21、28、42、56、72、84、98和112日龄羔羊瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、前胃、总胃重量及各胃室容积的变化情况。结果表明：藏羊羔羊在0-112日龄的各胃室发育迅速,各胃室增重明显,容积显著增加,尤其瘤胃的增重明显;在藏羊生产实践中,70日龄断奶较适宜,56日龄是可接受的最早断奶日龄。