鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗安全性试验和效力检验初报

利用PageA、B、C型副鸡禽杆菌,研制鸡传染性鼻炎(IC)三价灭活疫苗。用6批IC疫苗进行了大剂量单次接种和单剂量多次接种的安全性试验,结果表明,IC三价灭活疫苗安全无副作用;用3批疫苗进行SPF鸡和普通鸡的免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%;商品鸡42日龄首免,110日龄二免,二免后约9个月对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%;用4℃～8℃保存一年的3批疫苗进行了SPF鸡的近期免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%。     

鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究

利用Page A型、B型、C型副鸡禽杆菌和新城疫病毒La Sota株,研制鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联油乳剂灭活疫苗。用3个批次疫苗进行单剂量(0.5mL/次)3次接种和大剂量(2.0mL)单次接种的安全性试验、SPF鸡的免疫效力试验、商品鸡的免疫持续期试验和疫苗的保存期试验。结果表明,3批疫苗对试验鸡安全无副作用;免疫接种SPF鸡只30d后对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%,用20μL/只疫苗免疫接种SPF鸡21d后新城疫的平均HI抗体24;商品鸡42日龄首免,110日龄二免,二免后9个月对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,对新城疫病毒强毒100%保护;用4℃~8℃保存12个月和15个月的3批疫苗进行了SPF鸡的近期免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,用20μL/只疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21d新城疫病毒的平均HI抗体24,对新城疫病毒强毒的攻毒保护率70%。说明研制的疫苗安全有效。     

鸡黄病毒灭活疫苗的研制及免疫效果研究

鸡黄病毒FQ—C1株经SPF鸡胚连续传40代后,检测其尿囊液毒的ELD50达到1×10^-4.33／0．1mL。将该病毒第40代SPF鸡胚液毒灭活后制备成油乳剂灭活疫苗。SPF雏鸡和蛋鸡安全性试验表明,该疫苗的安全性好,无不良影响。以该疫苗一次单剂量（1mI／只）免疫开产蛋鸡,28d后攻以鸡黄病毒强毒测定疫苗的保护效果,结果显示疫苗免疫组较未免疫组蛋鸡的产蛋率高出75．8％,产蛋保护率达93．2％以上。试验表明,本研究制备的鸡黄病毒灭活疫苗安全性好,且具有良好的免疫原性,免疫后可有效抵抗鸡黄病毒所致的产蛋骤降。     

副鸡嗜血杆菌B型分离株免疫原性的比较和疫苗株的筛选

利用分离自我国不同地区的3株B型副鸡嗜血杆菌菌株及0222标准株分别制作油乳剂灭活疫苗免疫无鸡传染性鼻炎病史的鸡群，通过攻毒保护试验和HI抗体测定，分析比较了其免疫原性，以筛选适用于制备疫苗的菌株。结果表明：不同地区的分离株在致病性和免疫原性上存在-定的差异，TJ-1株疫苗免疫鸡对TJ-1和DL-1株的保护作用可达90％和91．7％，对BJ-1株的保护率为63．6％，具有相对较好的保护作用，目前可以作为疫苗株使用。在各免疫组试验鸡中，0222株和BJ-1株免疫鸡群的血清抗体水平较高，但这可能与血凝抑制试验所采用的抗原是由0222株制备的及BJ-1株在抗原性上可能更接近于0222株有关。DL-1和TJ-1株疫苗免疫鸡的抗体水平都很低，但其免疫保护却要强于0222和BJ-1株疫苗免疫鸡。由此说明B型株因菌株之间免疫原性的差异使得HI抗原的选择难度增加。     

传染性支气管炎病毒在不同日龄SPF鸡胚上的增殖效果

目前预防传染性支气管炎(IB)最佳方法是传染性支气管炎疫苗免疫,因此,高质量的疫苗是控制该病关键所在。本试验采用10日龄、11日龄、12日龄3组不同日龄SPF鸡胚增殖传染性支气管炎病毒(IBV),以确定鸡IBV增殖最适宜的鸡胚日龄,为生产高质量疫苗、降低成本、提高效益提供参考。1材     

鸽新城疫rGX-mF株灭活疫苗的制备及免疫原性分析

为有效控制临床中鸽新城疫的发生，选取基因Ⅵ型鸽新城疫病毒弱毒株rGX-mF作为疫苗候选株，评价其生物学特性，并将rGX-mF灭活后制备成油佐剂灭活疫苗，接种雏鸽和SPF鸡进行rGX-mF株的免疫原性分析，为研制安全高效的鸽新城疫灭活疫苗奠定基础。结果表明，rGX-mF株能够在鸡胚中稳定传代，效价高，毒力弱；rGX-mF株灭活疫苗接种雏鸽后疫苗吸收良好，无局部和全身不良反应，安全性好，免疫持续期长达12个月；rGX-mF株灭活疫苗与LaSota株灭活疫苗相比，rGX-mF株灭活疫苗在鸽体内能产生更高水平的抗体；rGX-mF株灭活疫苗同时免疫SPF鸡和雏鸽，SPF鸡产生的抗体显著高于鸽产生的抗体，这可能与鸽和鸡的免疫系统存在差异有关。综上，利用基因Ⅵ型鸽新城疫病毒弱毒rGX-mF株制备的灭活疫苗可在鸽体内产生有效的抗体，免疫效果好，免疫持续期长。     

鸡胚接种鸡白介素18重组质粒对IBDVDNA疫苗免疫增强作用的研究

用鸡白细胞介素18(ChIL-18)重组质粒(pCI-ChIL-18)接种18胚龄SPF鸡胚,利用适时荧光定量PCR方法对试验鸡不同时间点的动态变化进行检测.检测结果表明,胚胎接种pCI-ChIL-18使ChIL-18在鸡血液中早期持续高浓度存在,能促进鸡脾脏和法氏囊中ChIL-18基因的大量表达.用pCI-ChIL-18与传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白DNA疫苗分别免疫18胚龄SPF鸡胚,设1日龄雏鸡肌肉免疫对照组和空白对照组,2周龄时二免,6周龄时用IBDV标准强毒株BC6/85攻击.结果表明,胚胎免疫pCI-ChIL-18能显著促进试验鸡T、B淋巴细胞的早期增殖反应,增强IBDV多聚蛋白DNA疫苗诱导的早期抗体水平及其对强毒攻击的保护力.并进一步证明胚胎免疫pCI-ChIL-18对IBDV多聚蛋白DNA疫苗的早期免疫效果具有显著的增强作用(P相似文献   

4型禽腺病毒HLJ1701株灭活疫苗的研制

利用4型禽腺病毒HLJ1701株进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的免疫效果进行评价,为家禽4型禽腺病毒的防控提供数据及参考。将HLJ1701株用灭菌生理盐水作10~4倍稀释后,接种9日龄SPF鸡胚,37℃孵育72 h后收获感染鸡胚尿囊液,经甲醛灭活后,加白油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗,对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验。结果显示,制备的3批4型禽腺病毒灭活疫苗(HLJ1701株)均为油包水型,黏度均在50 cP以内,对3批疫苗取样,样品经3000 r/min离心15 min,管底无水相析出。安全性试验结果显示,将疫苗按1 mL/只超剂量接种3周龄SPF鸡,试验鸡在观察期内全部健活,未出现局部或全身不良反应,表明疫苗对SPF鸡具有良好的安全性;免疫效力及攻毒保护试验结果显示,用疫苗按0.2 mL/只的剂量免疫接种3周龄SPF鸡1次,免疫接种后21d试验鸡血清中HLJ1701株的抗体平均效价可达2~8以上,使用4型禽腺病毒(HLJ1701株)接种0.2 mL/只(100 LD_(50))对免疫鸡进行攻毒,疫苗对免疫鸡的保护率均为100%。研究表明,实验室条件下研制的4型禽腺病毒(HLJ1701株)灭活疫苗的各项指标均符合标准。     

鸡血清非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞的研究

为了验证鸡血清是否可以非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞,用鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗免疫鸡血清、SPF鸡血清和健康猪血清,参照中华人民共和国农业行业标准NY/T 538—2002《鸡传染性鼻炎诊断技术》,进行了1%戊二醛固定的鸡红细胞和1%新鲜鸡红细胞的凝集试验。结果表明:鸡血清可以非特异性凝集1%戊二醛固定的鸡红细胞而不凝集1%新鲜鸡红细胞,说明鸡传染性鼻炎疫苗免疫鸡只的HI抗体只能作为免疫效果的参考值。     

猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25—4株感染及免疫攻毒试验

为了评价猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型25-4株致病性和其灭活疫苗的免疫原性,本研究采用猪胸膜肺炎放线杆菌7型25-4株感染健康猪,每组感染剂量分别为106CFU、107CFU、108CFU,结果发现106CFU感染剂量就可以复制出典型的猪传染性胸膜肺炎病理变化;以该菌株制备的灭活疫苗免疫健康猪21 d后.用106CFU、107CFU 2个不同感染剂量进行强毒攻击,其对照组均发病,免疫组获得100%保护.     

鸡败血支原体鸡传染性鼻炎二联灭活疫苗菌种复壮鉴定试验

从国外引进的鸡败血支原体R株和副鸡嗜血杆菌221株和668株的冻干品,经我所扩增复壮和系统的鉴定试验证明:鸡败血支原体R株属典型的强毒株,副鸡嗜血杆菌221和668株分别属典型的A型和C型强毒株.经过免疫原性试验、毒力鉴定试验及效力试验证明,这三种菌株是制备鸡败血支原体、鸡传染性鼻炎二联疫苗最好的菌株.     

不同来源鸡传染性支气管炎病毒M41株病毒特性的分析比较

为了比较2株不同来源的鸡传染性支气管炎病毒(M41)毒株的生物学特性、免疫原性及S1基因同源性.将TONG-IBV和MOU-IBV分别接种10日龄SPF鸡胚,观察鸡胚病变特点、计算病毒含量(EID50)、制备灭活疫苗进行免疫抗体效价检测,进行S1基因测序分析.试验结果表明:接种TONG-IBV株后鸡胚出血较严重,蜷缩程...     

鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗生产用菌株的筛选

为了筛选免疫原性良好的鸡传染性鼻炎灭活疫苗生产用菌株，本试验对分离的5株A型、3株B型和3株C型副鸡禽杆菌的致病性和免疫原性进行分析。首先通过毒力试验筛选毒力较强的菌株，对筛选出的菌株进行最小发病剂量测定，再将最小发病剂量定为攻毒剂量，进行免疫原性分析和最小抗原含量测定。毒力试验结果显示，11株分离株均具有较强的毒力，从中筛选出毒力较强的A型菌2株(HN3株和HB2株)、B型菌2株(HN5株和SD4株)和C型菌2株(HN1株和SD3株)。最小发病剂量测定结果显示，A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株毒力最强，最小发病剂量分别约为2.0×10⁴、1.8×10³和2.3×10³CFU。免疫原性分析和最小抗原含量测定结果显示，A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株具有良好的免疫原性，不仅可以抵抗同源菌株的攻击，还能对同血清型异源菌株提供良好的保护，免疫后血清HI抗体效价和阳性比例均较高，且与攻毒保护相关性较好，A型HN3株、B型HN5株和C型SD3株的最小抗原含量分别为5.0×10⁸、1.0×10<...     

鸡传染性法氏囊病疫苗B87对SPF鸡289的免疫效果

30日龄SPF鸡经点鼻途径用鸡传染性法氏囊病病毒（1BDV）的中等毒力疫苗B87株免疫后14d，再以200个ELD50超强毒IBDV株GX8/99点鼻人工攻毒，所有鸡都没有发病死亡。而对照鸡有10/10发病和6/10死亡，并有典型的病理变化。这表明，对SPF鸡用中等毒力的IBDV疫苗免疫可诱发有效的免疫保护作用。并能完全抵抗超强毒IBDV的攻击。     

免疫不同剂量禽流感疫苗的效果对比试验

正1试验目的为了了解不同免疫剂量禽流感疫苗的效果,设计了在不同免疫剂量禽流感疫苗在SPF鸡、普通商品蛋鸡群的免疫实验。2材料方法2.1试验动物21日龄SPF鸡,山东省农业科学院家禽研究所提供;18日龄农大3号,邹平梅子山蛋鸡场。2.2试验疫苗重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株),青岛易邦生物     

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒（IBV—D971株）致弱的研究

将IBV-D971株病毒在SPF鸡胚上连续传至120代,培育出了一株毒力明显减弱,并且具有良好免疫原性的腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒弱毒株(IBV-D971株).IBV-D971 F105代毒力明显下降,以109.25EID50接种1日龄SPF鸡5/5无不良反应.IBV-D971 F105代毒连续通过1日龄SPF鸡体5代,未见毒力返强.以103EID50免疫1日龄SPF鸡,攻毒后5/5保护,对照5/5发病.     

悬浮MDCK细胞源与鸡胚源H9亚型禽流感疫苗免疫效力比较研究

为探讨MDCK纯悬浮细胞制备的H9亚型禽流感灭活疫苗的免疫效果,使用10日龄SPF鸡胚和MDCK纯悬浮细胞分别接种H9亚型禽流感 BX13株病毒,收获抗原液,制备2种单价油佐剂灭活疫苗,按照不同免疫剂量对21日龄SPF鸡进行免疫接种,测定免疫后不同时间的血清HI抗体,免疫后21 d翅静脉攻毒,测定疫苗的保护率。结果表明：2种疫苗分别以0.3、0.2、0.1、0.02 mL/只的剂量接种21日龄SPF鸡后,7 d HI抗体均为0log2,免后14 d、21 d时2种疫苗相同免疫剂量组间HI抗体无明显规律性差异。免疫后21 d,2种疫苗0.1mL/只～0.3mL/只的免疫剂量,各组间HI抗体水平无明显差异,可以达到1∶128以上。攻毒试验表明,鸡胚源疫苗0.1 mL/只、MDCK细胞源疫苗0.2mL/只的免疫剂量可以达到10/10保护。本研究为使用MDCK纯悬浮细胞制备的H9亚型禽流感疫苗的深化研究和应用奠定了基础。     

口蹄疫疫苗对奶牛保护力的研究

本试验比较了口蹄疫三价灭活疫苗（亚洲-I型、A型、O型）与口蹄疫二价灭活疫苗（亚洲-I型、O型）＋口蹄疫A型灭活疫苗对奶牛的免疫效果。选取8～16月龄的荷斯坦母牛300头,随机分为两组,每组150头,分为三价疫苗组及二价疫苗＋A型疫苗组,皮下免疫,三价疫苗免疫组注射剂量为3mL／头;二价疫苗＋A型疫苗免疫组注射剂量分别为3mL／头和2mL／头;免疫后第21天采集尾根动脉血液,利用液相阻断ELISA测定1：7蹄疫亚洲-I型和A型抗体效价,IHA方法测定口蹄疫。型抗体效价。结果显示,口蹄疫亚洲-I型抗体效价在1：128以上的比例,二价疫苗＋A型疫苗组为55．33％,三价疫苗组为58．00％,差异不显著（P〉0．05）;口蹄疫A型抗体效价在1：128以上的比例,二价疫苗＋A型疫苗组为56．67％,三价疫苗组为60．00％,差异显著（P〈0．05）;1：7蹄疫。型抗体效价在26以上的比例,二价疫苗＋A型疫苗免疫组52．67％,三价疫苗免疫组为79．34％．差异极显著（P〈0．01）。     

鸡新城疫－传染性支气管炎－传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究

为评估鸡新城疫（ND）-传染性支气管炎（IB）-传染性法氏囊病（IBD）三联灭活疫苗对不同日龄和不同水平母源抗体雏鸡的免疫效力和持续期,本试验用该疫苗免疫7、14、21日龄SPF雏鸡和有母源抗体的普通雏鸡,免疫后采血测定ND血凝抑制抗体（HI Ab）、IB血凝抑制抗体（HI Ab）及IBD中和抗体（NA）,并用传染性法氏囊病病毒（IBDV）强毒攻击。结果显示,7日龄SPF雏鸡免疫后21 d ND HI抗体、IB HI抗体及IBD中和抗体效价分别为7.9log2、6.9log2和14.1log2,SPF鸡日龄越大,抗体水平越高;28日龄SPF鸡免疫后3个月,0.3 mL免疫剂量组试验鸡ND HI、IB HI及IBD中和抗体效价分别达6.5log2、6.1log2和13.6log2,IBDV攻毒保护率均为100%（10/10）;不同日龄普通雏鸡免疫效果与SPF鸡试验一致,抗体水平随鸡日龄增大而升高,IBD攻毒保护率也都达到100%（10/10）。试验结果证实,鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗可使7、14及21日龄SPF雏鸡和普通雏鸡产生良好的免疫力,对雏鸡的免疫期至少为3个月。     

鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究

为评估鸡新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-传染性法氏囊病(IBD)三联灭活疫苗对不同日龄和不同水平母源抗体雏鸡的免疫效力和持续期,本试验用该疫苗免疫7、14、21日龄SPF雏鸡和有母源抗体的普通雏鸡,免疫后采血测定ND血凝抑制抗体(HI Ab)、IB血凝抑制抗体(HI Ab)及IBD中和抗体(NA),并用传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒攻击。结果显示,7日龄SPF雏鸡免疫后21 d ND HI抗体、IB HI抗体及IBD中和抗体效价分别为7.9log2、6.9log2和14.1log2,SPF鸡日龄越大,抗体水平越高;28日龄SPF鸡免疫后3个月,0.3 mL免疫剂量组试验鸡ND HI、IB HI及IBD中和抗体效价分别达6.5log2、6.1log2和13.6log2,IBDV攻毒保护率均为100%(10/10);不同日龄普通雏鸡免疫效果与SPF鸡试验一致,抗体水平随鸡日龄增大而升高,IBD攻毒保护率也都达到100%(10/10)。试验结果证实,鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗可使7、14及21日龄SPF雏鸡和普通雏鸡产生良好的免疫力,对雏鸡的免疫期至少为3个月。