RP-HPLO法测定秦艽和元胡中龙胆苦苷和延胡索乙素的研究

建立同时测定秦艽和元胡中的龙胆苦苷和延胡索乙素含量的RP—HPLC分析方法。以RP-C18色谱柱为固定相，流动相为甲醇＋冰醋酸缓冲液（30＋70），等度10min，3min梯度变成68＋32，冰醋酸缓冲液的pH值为5．11，流速为1．0mL／min；紫外检测波长为230nm、270nm。龙胆苦苷和延胡索乙素的标准曲线范围分别是4．495～449．5μg／L、4．935～493．5μg／L（r=0．9998，0．9998，n=7）；检测限分别是0．2245μg／L、0．0987μg／L；加样回收率分别为98．92％～105．92％、97．09％～103．66％，RSD〈3.1％。该方法测定龙胆苦苷和延胡索乙素的含量稳定可靠、重现性好。     

种子处理及GA3浓度对诱导三七实生苗影响研究

以健康饱满成熟的三七种子为外植体,接种到不同处理的培养基上,诱导实生苗。结果表明,剥除三七种皮,用70％的乙醇浸泡1min,再用0．1％升汞消毒灭菌10min,无菌水冲洗4～5次,接种到MS＋2,4-D（1．0mg／L）＋KT（0．5mg／L）＋GA3（40mg／L）＋蔗糖（30g／L）＋琼脂粉（7g／L）的培养基（pH5．8）中,根、茎、叶生长表现良好,从而初步建立了三七实生苗组培体系。     

高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺的含量

为建立乳制品中三聚氰胺含量的高效液相色谱测定方法,通过超声提取,离子交换萃取小柱净化,结合高效液相色谱进行样品测定．色谱条件：EclipseXDB—C18柱（5μm,4．6m／n×150mm,ASilent）;流动相：A为离子对缓冲液（1．05g柠檬酸和1．01g辛烷磺酸钠定容至500mL,pH值为2．6）,B为乙腈,配制比例为90％A＋10％B,流速1．0mL／min,柱温30℃,进样量20止,检测波长240nm．结果表明：三聚氰胺标准曲线为Y=0．009z＋0．3627,相关系数R=0．9998,在0．17—110．0mg／L范围内线性关系良好,方法检出限为0．12mg／L,两个样品三个水平的加标回收率分别为96．34％（RSD=4．76）、84．86％（RSD=7．21）、104．29％（RSD=7．63）和95．31％（RSD=4．39）、89．25％（RSD=3．88）、92．59％（RSD=5．27）．     

HPLC法同时测定地桃花的槲皮素和山奈酚

为更好地控制地桃花的质量,建立高效液相色谱法同时测定地桃花中槲皮素和山奈酚含量的方法,对地桃花中槲皮素和山奈酚的含量进行测定。结果表明：用 C18色谱柱（100 mm×4．6 mm,5μm）,以甲醇－0．4％磷酸水溶液（45∶55）为流动相,流速0．8 mL／min,检测波长360 nm,测定出槲皮素和山奈酚的线性范围均为2．500～25．00μg／mL,相关系数 r 分别为0．9997和0．9999,精密度 RSD （n ＝5）分别为0．98％和0．79％,稳定性试验 RSD （n ＝5）分别为1．36％和1．13％,加样回收率 RSD （n ＝5）分别为2．37％和2．10％。该方法适于同时测定地桃花中的槲皮素及山奈酚含量,方法简便可行,重现性好,精密度高,结果可靠。地桃花中槲皮素和山萘酚的最高含量分别为（1．067±0．02）mg／g 和（1．232±0．03）mg／g。     

晚香玉组培技术研究

以单瓣、重瓣两个晚香玉品种叶片为材料,选用4种升汞消毒时间、6种愈伤组织诱导培养基、6种分化培养基和9种生根培养基,研究不同基因型和激素组合对再生体系建立的影响。结果表明：（1）叶片的消毒时间为0．1％HgCl2浸泡2min;（2）诱导单瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA1．0mg／L：诱导重瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．5mg／L．（2）2单瓣叶片分化最佳配方为：MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L;重瓣叶片分化的较适培养基为：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L,（3）诱导生根的最佳培养基为：1／2MS＋KT0．2mg／L＋NAA0．5mg／L＋6-BA0．2mg／L。     

花叶夹竹桃离体培养技术研究

通过正交试验等方法对花叶夹竹桃茎段组织培养技术进行了研究．结果表明：在江苏句容,花叶夹竹桃最佳取材时间为4月下旬．在优良母株上选取外植体,经过0．1％HgCl2消毒15min,灭菌成活率为78．8％;添加3．5％的白砂糖和增加培养容器的透气性,能很好地预防玻璃苗的发生;改良MS附加ZT,BA,NAA等植物生长调节剂可以有效地促进试管芽苗的增殖和生长,其中ZT1．5mg／L＋BA2．0mg／L十IBA0．1mg／L组合最适宜增殖与生长培养,增殖达5．6倍,生长高度为3．2cm;适宜的生根培养基为1／2MS＋IBA0．5mg／L＋NAA0．3mg／L＋Charcoal3000mg／L＋白砂糖2％,生根率可达92％;经生根的试管苗移栽于V（蛭石）：V（珍珠岩）：V（泥炭）为6：3：1的混合基质中,控制温度在23～30℃,相对湿度90％,保湿12～18d,其间适当遮荫,30d后成活率达88％以上。     

RP-HPLC法测定熊胆贝母止咳胶囊中黄芩苷的含量

采用HPLC法测定熊胆贝母止咳胶囊中黄芩苷的含量。方法：以ODS柱为色谱柱，用甲醇＋水＋磷酸（50＋50＋0．2）为流动相，流速为1mL／min，检测波长为280nm，柱温为30℃，对熊胆贝母止咳胶囊中黄苓苷含量进行测定。结果：熊胆贝母止咳胶囊中黄芩苷的线性范围为14．40-115．2μg／mL（r=0．9991）。平均回收率为99．1％。日内和日间精密度分别为：3．54％和2．38％。结论：该法简便、快速、灵敏、且专属性强，可作为熊胆贝母止咳胶囊中黄芩苷的含量测定方法。     

鸡蛋中三聚氰胺残留的检测

为建立鸡蛋中三聚氰胺残留的简便高效液相色谱法,本试验采用NH2柱作为色谱分析柱,90％乙腈水溶液为流动相,鸡蛋样品经混合均匀后,用三氯乙酸-乙腈溶液提取,经阳离子交换固相萃取柱净化、富集后,在紫外检测器230nm处用高效液相色谱仪测定,保留时间在6～7min。标准曲线在0．1～5．0μg／ml浓度内呈线性相关,相关系数（r）为0．9999。在空白鸡蛋样品中添加0．2mg／kg、0．5mg／kg、2．0mg/kg和5．0mg／kg的三聚氰胺,回收率为78．96％～92．19％,相对标准偏差（RSD）为1．96％～6．60％。样品检测定量限为0．2mng／kg。     

印楝(Azadirachta indica A.)高频植株再生系统的建立

[目的]建立印楝高频植株再生系统。[方法]以印楝带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,分别附加6-BA 0．1、0．3、0．5、0．8、1．0mg／L和N从0、0．1、0．3、0．5mg／L组配14个培养基配方处理进行芽分化的诱导培养试验,生根培养采用MS＋IBA0．2mg／L、1／2MS和Ms的3种培养基,研究外植体最适宜的消毒时间和取材部位,筛选诱导印楝芽分化和生根的最佳培养基配方。[结果]初代培养中,印楝外植体最适宜的消毒时间为10～12min,最适宜的取材部位为茎尖及植株的上部。14个培养基处理中,诱导芽分化的最佳培养基为：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L＋0．65％琼脂＋3％蔗糖（pH5．8）。诱导生根的最佳培养基为：1／2MS＋0．65％琼脂＋3％蔗糖（pH5．8）,生根率85．13％,小苗移栽成活率80％。[结论]该研究为印楝规模化快繁和遗传转化体系的建立奠定了基础。     

云南拟单性木兰组织培养初步研究

以不同季节的云南拟单性木兰幼嫩茎段为外植体,探讨外植体不同消毒时间、不同激素配比对腋芽萌发和生长以及芽增殖的影响。结果表明,取于6月份的木兰幼嫩茎段不适宜作为外植体进行培养;2．5％NaClO15min＋0．2％HgCl28min对外植体的消毒效果最好;最适的腋芽诱导培养基为MS＋6-BA0．5mg／L＋2,4-D0．1mg／L＋KT0．5mg／L＋蔗糖5％＋琼脂0．6％,增殖培养基为1／2MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L＋GA30．1mg／L＋蔗糖5％＋琼脂0．6％。     

高效液相色谱法检测饼干中的三聚氰胺

建立由高效液相色谱法检测饼干中三聚氰胺的方法。样品用1%三氯乙酸和2.2%乙酸铅超声提取,色谱柱为Hypersil ODS 100 mm×4.6 mm,5μm,流动相为乙腈∶辛烷磺酸钠离子对试剂(pH 3)=15∶85(V/V),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为210 nm,柱温为40℃。三聚氰胺在0.2~10μg.mL-1范围内,有良好的线性关系。在空白样品中添加1、2和4μg.mL-1的标准工作液,平均回收率在80.5%~93.5%之间,相对标准偏差为7.7%(n=9)。     

5-吲哚甲基海因及其工程菌转化产物的高效液相色谱分析

通过RP-HPLC同时检测酶水解反应前后底物5-吲哚甲基海因及产物D-氨甲酰-N-色氨酸的含量变化,不仅可以检测海因酶的活性,还能分析酶反应过程的转化效率。采用Merck公司的PurospherSTARRP-C18e色谱柱(4.6mm×250.0mm,5μm),以乙腈-20mmoL/L磷酸二氢钾缓冲液(体积比25∶75)为流动相,磷酸调pH值为3.0,流速为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为220nm,于10min内很好地实现了各组分的分离。采用外标法进行定量分析,D-色氨酸、5-吲哚甲基海因和D-氨甲酰-N-色氨酸的线性范围分别是0.10～1.00mg/mL(r=0.9991)、0.20～2.00mg/mL(r=0.9989)、0.20～2.00mg/mL(r=0.9989);酶反应体系中5-吲哚甲基海因和D-氨甲酰-N-色氨酸的加标回收率分别为99.3%～100.2%和98.0%～99.3%,精密度分别为0.51%～0.87%和0.43%～0.94%。试验结果表明该法快速简便、准确可靠。     

比色法测定菠菜中草酸含量的条件研究

对水杨酸铁络合比色法测定菠菜中草酸含量的条件进行了研究,结果表明,最佳条件是:显色体系pH值2.1～2.7,比色波长510nm,比色时间20 min～2 h.该法测定菠菜样品中草酸含量范围在0～64.0 μg/ml,检出限为1.52 μg/ml;样品加标回收率93.9%～105.2%.     

藏药独一味RP-HPLC色谱指纹图谱的建立及其质量评价

[目的]建立独一味药材HPLC指纹图谱,研究不同地区独一味药材的质量,为其质量控制提供有效的方法。[方法]采用RP-HPLC方法梯度洗脱,测定10批不同地区的独一味样品。[色谱条件]Kromasil C18柱(250 mm×4.60 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%的磷酸水溶液(55∶45),梯度洗脱程序为0~70 min,甲醇的体积分数由1%线性增加至15%;70~100 min内,甲醇由15%线性增加至17%;100~130 min内,甲醇由17%线性增加至20%;130~150 min,甲醇由20%线性增加至100%;流速为1 ml/min,检测波长为254nm,柱温为30℃。[结果]确定了独一味药材中的7个共有峰。根据聚类分析结果,将独一味药材分为3类。[结论]该研究建立的方法重复性好,可用于不同地区独一味药材的质量评价,结合含量测定可用于独一味药材的质量的全面控制。     

正相高效液相色谱法测定梨中5种菊酯类农药多残留

建立正相高效液相色谱方法同时测定梨样品中氯菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯和高效氯氟氰菊酯5种菊酯类农药残留。采用混合溶剂正己烷-乙酸乙酯(80/20,V/V)提取,在优化的流动相溶剂正己烷-乙酸乙酯(95/5,V/V)及流速1 mL/min,检测波长242 nm条件下,用配备Zorbax Rx-Sil柱、紫外检测器的高效液相色谱仪进行待测组分的分离和测定,检出限范围在0.108~0.193 ng/μL。添加回收率试验结果表明,梨样品中上述5种菊酯类农药加标回收率为74.0%~108.0%,相对标准偏差(RSD%,n=5)为2.4~7.4,其准确度和精密度均达到了农药残留分析的要求。     

四环素药渣残留量的测定

采用高效液相色谱-紫外检测方法建立了四环素药渣残留量测定的分析方法。四环素药渣以乙醇提取,石油醚脱脂。在最优化色谱条件下（甲醇∶水=50∶50（体积比）作为流动相;检测波长为361nm;流速为0.9mL/min）,四环素在6min内检出。四环素的线性范围为1.5～6.0mg/L,相关系数为0.993 0。将该方法应用于四环素药渣残留测定上,回收率介于98.1%～99.8%之间,效果较好。     

固相萃取富集-高效液相色谱法测定土壤·水质中的莠去津

利用固相萃取富集-高效液相色谱法分析测定环境土壤、水体中三嗪类除草剂--莠去津(ATR)的含量.色谱柱为C18固相萃取柱,流动相为甲醇-水(60∶40,体积比),流速0.8 ml/min,检测波长220 nm,桂温25 ℃.莠去津在0.1～5.0 mg/L(r=0.999 5)范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系,平均回收率为86.1%,RSD为3.7%.该法操作简便、快速,回收率较好.     

离子交换高效液相色谱法测定淀粉类食品中丙烯酰胺含量的研究

建立了淀粉类食品中丙烯酰胺含量的离子交换高效液相色谱测定方法。样品中的丙烯酰胺用80%甲醇溶液提取,浓缩后经OasisHLB固相萃取小柱净化,0.005mol/L硫酸为流动相在HC-75H+阳离子交换柱上分离,二极管阵列检测器(DAD)在200nm波长进行定性、定量分析。检测限为30μg/kg,添加回收率在92%～104%,相对标准偏差小于9%。对油炸薯片、饼干、油条、烧饼等食品检测的结果与文献报道值吻合。     

HPLC-MS测定江油附子中三种生物碱的含量

建立了附子中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的高效液相色谱-质谱联用检测方法,并用该方法测定不同秸杆覆盖处理的附于中3种生物碱成分.以PolarisC18-A(50 mm×2.0 mm,5.0 μm)为色谱柱;甲醇和水(体积比为80∶20)为流动相,流速为0.2 mL/min,检测波长为240 nm,柱温为30℃.结果表明,乌头碱、新乌头碱、次乌头碱分别在0.70～35.00 ng(r=0.999 6)、0.50～25.00 ng (r=0.999 6)、1.06～53.00 ng (r=0.9980)范围内线性良好;平均回收率分别为100.7％、99.2％和98.9％.该方法结果准确可靠,是一种快速灵敏、专属性强的分析方法.     

高效液相色谱法同时测定杜仲叶中芦丁和槲皮素含量的研究

建立反相高效液相色谱法同时测定了杜仲叶中2种黄酮类成分——芦丁和槲皮素的含量。色谱柱为Nova-Pak C18(3.9 mm×300 mm,4μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸溶液(505∶0),流速0.6 ml/min,检测波长为356 nm。芦丁和槲皮素的线性范围分别为0.246～4.92μg(r=0.999 93)和0.0846～1.692μg(r=0.999 89),平均回收率(n=5)分别99.8%和102.1%。方法准确、快速、重现性好,适用于同时测定杜仲叶中黄酮类成分的含量。