吉林株犬新孢子虫的分离与鉴定

将疑似感染犬新孢子虫而流产的牛胎儿脑组织接种于Vero细胞进行体外培养,同时感染长爪沙鼠进行动物试验.提取牛流产胎儿脑组织DNA、沙鼠脑组织DNA、细胞培养虫体DNA,用犬新孢子虫特异性引物进行PCR扩增.结果显示,PCR扩增出了1条约为681 bp的目的条带;测序结果表明,扩增出的特异性目的基因序列与GenBank中发表的犬新孢子虫NcSAG1基因(AF113004)核苷酸序列的同源性为99.4%.结果表明,在吉林省牛流产胎儿脑组织中分离出犬新孢子虫.     

牛新孢子虫二温式PCR检测方法的建立与应用

根据已发表的犬新孢子虫种属特异性基因片段Nc-5基因序列设计合成一对特异性引物,采用均匀设计方法对引物浓度、Mg2+浓度、dNTP、Taq酶和退火温度进行了优化,建立了检测牛新孢子虫的二温式PCR方法.该方法对牛新孢子虫DNA的检测灵敏度为23.5 fg/反应.应用该方法对50份全血和8份流产胎儿样本进行了检测,有3份...     

新孢子虫荧光PCR检测方法的研究

根据已知的犬新孢子虫种属特异性基因片段Nc-5基因序列,设计荧光定量PCR引物和荧光探针,经反应条件的优化,建立了检测新孢子虫的荧光定量PCR方法。该方法的检测灵敏度为10拷贝/反应。通过对系列稀释的重组质粒进行重复性检测,Ct值的变异系数为0.50%~1.18%。应用该方法对50份牛全血和8份流产胎儿样本进行检测,有5份全血和1份流产胎儿样本为阳性,阳性检出率均为10.3%,比普通PCR方法阳性检出率（7%）高。且具有较好的特异性和可重复性,可用来对新孢子虫病快速准确检测。     

蒙古国科布多省牛新孢子虫病PCR诊断初报

为了查明科布多省牛只是否感染犬新孢子虫(Neospora caninum)并造成流产隐患,本文应用PCR方法,以新孢子虫NC-5为诊断靶基因,对随机采集科布多省3个检测点的120份牛血样进行DNA提取、扩增诊断,并基因测序。结果显示,成功获得了231 bp目的片段;测序结果经BLAST比对,与犬新孢子虫新西兰株(GenBank登录号:AY459289.1)同源性达99%,构建的系统发育树中,本株与犬新孢子虫聚为一支,置信度达99%。说明科布多省牛只已感染了新孢子虫;在3个检测点中,艾尔登特苏木乡感染率最高,为12.7%(7/55),总感染率为7.5%(9/120)。本文初次报道蒙古国科布多省牛群不同程度的感染新孢子虫,应该引起重视。     

新疆尼勒克县牛新孢子虫病PCR调查与分析

犬新孢子虫是牛流产的重要原因之一。为查清尼勒克县规模化养殖的牛群出现流产的原因,本文应用PCR检测方法,以新孢子虫NC5为诊断靶基因,对采自流产多发地—某乡8个养殖户的共计260份牛全血DNA进行诊断,并测序。结果显示,成功获得了231bp目的片段,新孢子虫病总感染率为5.0%;构建的系统发育树中,本株与Genbank上传的瑞士株(登录号:X84238)、英国株(登录号:DQ07766)亲缘关系较近,置信度达97%,说明新孢子虫病是导致牛群发生流产的主要原因之一。本次调查结果不仅为该地区的养牛业新孢子虫病的防控提供了基础数据,而且有利于当地兽医工作者建立一套符合当地实际情况的综合防制体系。     

新孢子虫样原虫感染为加利福尼亚乳牛流产的重要原因

作者在考察468例牛流产中,确定95例胎儿的脑组织病变是原虫感染。用犬新孢子虫抗血清的免疫组织化学法进一步检查这些胎儿的组织,约94％(95例中的89例)的胎儿组织有用犬新孢子虫抗血清作免疫组织化学法着染的原虫。所有感染胎儿均源出舍饲乳牛,多数(623％)是妊娠5-6个月。感染牛群有屡发流产的报道。总的说来,在4-5年期问,从19％的流产牛检测出这种孢     

新疆和静县黑头羊犬新孢子虫的检测及分子鉴定

犬新孢子虫是一种细胞内原生动物寄生虫,可导致包括绵羊和山羊在内的多种哺乳动物流产和新生胎儿死亡。本研究为了预估巴音郭楞蒙古自治州和静县黑头羊中犬新孢子虫的流行情况,采集了8 个乡镇的165 份血样,运用聚合酶链式反应（PCR）扩增犬新孢子虫Nc5基因片段,并对部分阳性产物进行基因测序。结果显示,在165 只黑头羊中有13 只（7.9%）检测到犬新孢子虫阳性;年龄、流产史、饲养犬只与感染率有统计学差异（P< 0.05）;2 岁以上的母羊感染率最高,有流产史的母羊,新孢子虫感染率较高。饲养场地周边犬的存在对感染率也有所影响,有饲养犬的羊群感染率11.4%,高于未饲养犬的羊群。将Nc5 基因的部分序列与GenBank 上传的基因序列进行比对,结果显示同源性为92%~100%。本研究是首次对和静县黑头羊犬新孢子虫进行系统进化分析,为犬新孢子虫病防控方案的制订提供参考,对减少畜牧业的经济损失具有实际意义。     

牛病毒性腹泻病毒合并犬新孢子虫感染引起奶牛流产的诊断

针对某牛场奶牛流产率过高的状况,对该牛场流产情况及相关疾病进行诊断调查。该场2007—2009年奶牛年流产率分别为13.89%,16.52%和19.24%,流产率逐年上升。2009年1月至2010年4月的流产病例多发生于头胎牛,流产时妊娠时间以4～6月龄为主。收集流产奶牛病料24份。牛病毒性腹泻病毒血清抗体阳性率75%,犬新孢子虫血清抗体阳性率83.33%,其中9个病例为牛病毒性腹泻病毒与犬新孢子虫混合感染。布氏杆菌、李氏杆菌与牛传染性鼻气管炎病毒检测均为阴性。场内对照牛20头,牛病毒性腹泻血清抗体阳性率5.00%,犬新孢子虫抗体阳性率15.00%,与流产病例检测结果存在显著性差异。由此,可初步确定牛病毒性腹泻病毒合并犬新孢子虫感染是导致该牛场流产的主要原因。     

云南省荷斯坦牛及奶水牛犬新孢子虫血清学调查研究

为了解云南省荷斯坦牛和奶水牛犬新孢子虫感染情况,本研究应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对血清样品进行犬新孢子虫抗体检测.结果显示,68份荷斯坦牛血清样品中,抗体阳性7份,阳性率10.3％,2份可疑;106份奶水牛血清样品中,未检出抗体阳性血清,2份可疑.检测结果表明,云南省荷斯坦牛存在犬新孢子虫感染,奶水牛可能存在犬新孢子虫感染.     

感染犬新孢子虫泌乳奶牛流产后的早期恢复

本文旨在评价感染犬新孢子虫奶牛流产后的繁殖性能。在92头流产奶牛中,有68头牛为犬新孢子虫血清阳性,有24头为阴性。只给每天产奶量在25kg以上的流产后发情牛输精,在流产的30d中,当发情第一次输精时检查子宫复旧正常。在92头流产奶牛中,有73头(79.3%)妊娠,这其中有57头(83.8%)是犬新孢子虫血清阳性,有16头(66.7%)为阴性。经t-检验和秩和检验分析,妊娠天数及泌乳次数在犬新孢子虫血清阳性和阴性牛间没有差异,而犬新孢子虫血清阳性牛从流产到第一次人工授精的间隔时间、妊娠所需的授精次数,以及从流产到下一次妊娠的间隔时间都显著低于血清阴性牛(P0.0001)。经Log线性回归分析发现,牛群、泌乳次数、流产时的妊娠天数,以及从流产到人工授精所需时间对牛群没有显著影响。据优势比分析,犬新孢子虫血清阳性牛在流产后第一次人工授精妊娠的几率是血清阴性牛的6.22倍。在流产30d内对53头犬新孢子虫血清阳性牛(78%)授精,有26头(49%)妊娠,而仅1个血清阴性牛(4.2%)在30d内待授精,并且第一次授精后仍未孕。这些结果表明,感染犬新孢子虫的奶牛流产后一个月内可以授精,并有很高的生育率。建议早期检查犬新孢子虫血清阳性流产奶牛子宫复旧状况。     

癸氧喹酯干混悬剂含量测定的改进

采用高效液相色谱法测定癸氧喹酯干混悬剂的含量,在2-250μg/mL范围内,峰面积的常用对数与进样量浓度的常用对数呈良好的线性关系,R^2=1(n=5),平均回收率为99.24%~99.51%,RSD在0.05%~0.28%。此方法分析时间短,样品前处理简便、定量结果准确,重现性好,结果满意,为其质量控制提供了依据。     

商会自治的基石——商会自治规范研究

在现代法律秩序中,商会自治规范是制定法的基础和必要的补充,甚至在某些方面替代了制定法;商会自治规范主要包括商会组织规范、行为规范、惩罚规范以及争端解决规范等;其效力仅及于其内部成员;商会自治规范和制定法之间存在冲突,但也存在整合的基础。     

猪毛色遗传的研究进展

本文概述了猪的毛色类型、猪的毛色遗传模式,着重综述了猪毛色基因分子基础的研究进展,指出存在问题并就未来发展方向做了思考。     

中华人民共和国农业部公告 第267号

为贯彻落实《兽药生产质量管理规范》(简称《兽药GMP》),进一步推动兽药GMP实施进程,我部制定了《兽药生产质量管理规范检查验收办法》,现予公告。本公告自2003年6月1日起施行。附件:兽药生产质量管理规范检查验收办法二○○三年四月十日第一章 总则 第一条 为推动《兽药生产质量管理规范》(以下简称兽药GMP)的实施,规范兽药GMP检查验收工作,制定本办法。 第二条 农业部负责全国兽药GMP管理和检查验收工作;负责制修订兽药GMP检查验收管理规定;负责兽药GMP检查员队伍建设和监督管理工作,负责国际兽药贸易中GMP互认工作。 …     

鸡败血支原体垂直传播模式及其阻断方法

以国际标准强毒Ｒ株人工感染非免疫产蛋鸡,定时扑杀,分别从鼻窦、眶下孔、气管、肺、气囊、卵巢和输卵管分离ＭＧ,并收集感染鸡所产蛋分离ＭＧ。结果表明,人工感染４８小时后上、下呼吸道及肺已被全面感染,９６小时气囊已被感染,１２０小时输卵管已能分离到ＭＧ,卵巢始终分离不到ＭＧ。人工感染鸡自１４４小时便能在其所产蛋中分离出ＭＧ。药物治疗能在７２小时内消除感染,油乳剂苗则需２４天后逐渐降低蛋内ＭＧ分离率,药物卵内注射、种蛋药浴、高温处理均能杀死卵内ＭＧ,但以研制的种蛋浸泡剂药浴效果为最好。     

Comparison of 2 methods of centesis of the bursa of the biceps brachii tendon of horses

REASONS FOR PERFORMING STUDY: Centesis of the bicipital bursa using an 8.9 cm long spinal needle has been reported but the alternative of employing a 3.8 cm long hypodermic needle requires validation. OBJECTIVE: To compare the efficacy of 2 different methods of centesis of the bicipital bursa and to evaluate the usefulness of ultrasonographic imaging to determine the location of solution administered when centesis of the bursa is attempted. METHODS: For Trial 1, 6 clinicians, who had no previous experience of centesis of the bicipital bursa, attempted to inject a solution composed of an aqueous radiopaque contrast medium and physiological saline solution (PSS) into the bicipital bursae of 2/12 horses using the previously described distal approach to inject one bursa and a proximal approach to inject the contralateral bursa. The bicipital tendon and bursa were examined ultrasonographically before and after injection; and both shoulders were examined radiographically to identify the location of the medium. In Trial 2, another 6 clinicians, also with no previous experience of centesis, repeated Trial 1, using 6 horses, but the radiopaque contrast medium was mixed with air instead of PSS. RESULTS: Accuracy of centesis using the proximal approach was 39% and that of the distal approach 28%. Ultrasonographic examination of the shoulder allowed the location of solution and air to be accurately predicted in all 12 shoulders examined. CONCLUSIONS: Clinicians who have had no previous experience performing centesis of the bicipital bursa are unlikely to be successful in centesis using either approach. Radiographic examination after injecting a radiopaque contrast medium may be necessary to assess the success of centesis especially if bursal fluid is not obtained during centesis. Injecting air along with the radiopaque contrast medium provides more accurate ultrasonographic confirmation of centesis and better radiographic definition than does injection without air.     

不同样本商品蜂蜜中硒含量的测定

用硝酸和高氯酸消化蜂蜜,使硒游离出来,在微酸性环境下,硒和2,3-二氨基萘(DAN)生成有较强荧光的物质,用环己烷萃取,在激发波长378nm,荧光波长518nm处测定其荧光强度。蜂蜜中硒含量范围:0.10～0.82μg/g。表明:蜂蜜应视为天然富硒营养品。     

乳酸杆菌益生作用机制的研究进展

乳酸杆菌作为益生菌广泛用于人和动物。本文综述了乳酸杆菌改善宿主健康的机制。乳酸杆菌可通过产生抗菌物质如乳酸、过氧化氢、细菌素,或者通过竞争营养或肠道黏附位点来抑制致病菌;通过诱导黏附素的分泌或阻止细胞凋亡而增强肠道的屏障功能,从而保护肠道。文章重点讨论了乳酸杆菌表面成分（表面蛋白、脂磷壁酸和肽聚糖）与肠道受体（Ｃ型凝集素受体、Ｔｏｌｌ样受体和 Ｎｏｄ样受体）,阐述了他们结合后启动免疫调节信号,调控肠道免疫功能以发挥改善健康作用的机制。     

Effects of size of ingestively masticated fragments of plant tissues on kinetics of digestion of NDF

Ingestively masticated fragments were collected and sized via sieving. Different sizes of esophageal masticate and ruminal digesta fragments, and ground fragments of larger masticated pieces were incubated in vitro, and undigested NDF remaining at intervals of up to 168 h of incubation was determined. The ruminal age-dependent time delay (tau) for onset of digestion of NDF was positively correlated (P < 0.004) with the mean sieve aperture estimated to retain 50% of the fragments between successive sieve apertures (MRA). Degradation rate of potentially degradable NDF (PDF) and level of indigestible NDF were not related (P > 0.10) to MRA of masticated and ground fragments. Estimates of tau were positively related to MRA, with slopes of bermudagrass < corn silage < ruminal fragments of corn silage. It was concluded that fragment size-, and consequently, ruminal age-dependent onset of PDF degradation of a mixture of different fragment sizes results in an age-dependent rate of degradation of the more rapidly degrading of two subentities of PDF. Models are proposed that assume a tau before onset of simultaneous degradation of PDF from two pools characterized as having gamma-modeled age-dependency and age-constant rates. The ruminal age-dependent pool seems to be associated with the faster-degrading pool, and its rate parameter increases with range in MRA in the population of fragments. Conceptually, the ruminal age-dependent rate parameter for PDF degradation seems to represent a composite of several effects: 1) effects of the size-dependent tau; 2) range in MRA of the population of ingestively masticated fragments; and 3) subentities of PDF that degrade via more rapid age-dependent rates compared with subentities of PDF that degrade via age-constant rates. The estimated fractional rates of ruminative comminution of ingestively masticated fragments (0.060 to 0.075/h) were of a magnitude similar to the mean fractional rates of PDF digestion (0.030 to 0.085/h), which implies that ruminative comminution may be first-limiting to fractional rate of PDF digestion. The in vivo roles of ingestive and ruminative mastication of fragments on PDF degradation must be considered in any kinetic system for estimating PDF digestion in the rumen. These results and others in the literature suggest that the rate of surface area exposure rather than intrinsic chemical attributes of PDF may be first-limiting to degradation rate of PDF in vivo.