分泌抗鸡Ig单抗杂交瘤细胞系的建立与单抗生物学特性的鉴定

从传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系１Ｄ１０、１Ｇ１中得到了３株能稳定分泌抗鸡免疫球蛋白（Ｉｇ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６。其抗体类和亚类均属ＩｇＧ２ｂ，腹水的ＥＬＩＳＡ效价≥１∶２５６００，琼扩效价为１∶８～１∶１６。３株ＭｃＡｂ能与鸡血清中的Ｉｇ出现沉淀反应，琼扩在２４ｈ以内出现清晰的沉淀线，而不能和鸭、鸽、鹌鹑等禽类及异种动物血清出现沉淀线。纯化的鸡ＩｇＧ、ＩｇＭ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后，分别用纯化并经辣根过氧化物酶（ＨＰＲ）标记的１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６单抗酶结合物进行免疫印迹试验证明，３株单抗识别的均为ＩｇＧ、ＩｇＭ分子的轻链     

中国禽流感流行株的分离鉴定

分别从广东、四川、新疆等地禽流感（ＡＩ）血检阳性、发病率高、产蛋率下降的鸡群中采集１８６份病料，先后分离到６株Ａ型流感病毒。这些分离株可在鸡胚中传代，可凝集鸡红细胞，血凝价达１６０～１２８０倍。不被新城疫、减蛋综合症、败血支原体阳性血清所抑制。用这些分离毒株制成琼脂扩散（ＡＧＰ）抗原与禽流感标准阳性血清可出现白色沉淀线。分别将分离毒株与ＡＩ标准分型血清Ｈ１～Ｈ１４、Ｎ１～Ｎ９进行ＨＩ、ＮＩ试验，结果川和川农株均为Ｈ４Ｎ６，西昌１和２株及Ｓｈ株均为Ｈ９Ｎ２，新疆石河子（石）株为Ｈ１４Ｎ５。分离株分别做脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）、静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）测定，结果所有分离株ＩＣＰＩ介于０２４～１４８之间，ＩＶＰＩ介于０１５～０５６之间．通过电镜观察，可见直径为８０～１２０ｎｍ球状或杆状典型的禽流感病毒．经联机检索，从新疆石河子ＡＩ阳性鸡场产蛋下降的鸡群中分离出的Ｈ１４Ｎ５株为国内外首次从鸡中分离出的Ｈ１４亚型禽流感病毒。将某单位送检的禽流感鹅体分离株（Ｇ１株和Ｇ２株）做了血清型和毒力测定，试验结果认定，Ｇ１和Ｇ２株均为Ａ型禽流感病毒Ｈ５Ｎ１亚型，Ｇ１、Ｇ２株对鸡均达到高致病力毒株标准。     

断乳后猪卵巢对hCG的反应性

五头断乳后非情期母猪分别在断乳后第２天（４头）和第３６天（１头）肌注，１，０００ＩＵｈＵＧ）五头猪者有单个或多个囊肿卵泡发生，４头母猪血浆Ｅ２在小范围内波动，表现安静发情，注射ｈＣＧ后既不发情也不排卵的母猪没有出现排卵前ＬＨ峰，血浆孕酮水平银低（＜１ｎｇ／ｍｌ）。结果表明用ｈＣＧ治疗母猪卵巢功能低下，将诱导异常的卵泡生长和ＬＨ释放，导致排卵障碍和卵巢囊肿。     

断乳后母猪卵巢对hCG的反应性

五头断乳后非情期母猪分别在断乳后第２天（４头）和第３６天（１头）肌注１，０００ＩＵｈＣＧ）Ｈ头猪都有单个或多个囊肿卵泡发生。４头母猪血浆Ｅ２在小范围内波动，表现安静发情．注射ｈＣＧ后既不发情也不排卵的母猪没有出现排卵前ＬＨ峰，血浆孕酮水平很低（＜１ｎｇ／ｍｌ）。结果表明用ｈＣＧ治疗母猪卵巢功能低下，将诱导异常的卵泡生长和ＬＨ释放，导致排卵障碍和卵巢囊肿。     

PMSG诱导的双胎母牛血清中P_4、LH、E_2的变化及与单、双胎的关系

于发情周期的第１０天,给１２头参试母牛肌注ＰＭＳＧ（孕马血清促性腺激素,总剂量为１３５０～２０００ＩＵ）。每头参试牛于肌注ＰＭＳＧ前的当天,肌注后２４ｈ、４８ｈ,肌注氯前列烯醇后２４ｈ、４８ｈ,发情后４８ｈ,排卵或妊娠５、１０、２０、６０ｄ,从颈静脉各采血１次,共采１０次,每次１０ｍｌ,离心后分离血清。用放免法测定上述各生理时期血清中Ｐ４（孕酮）、ＬＨ（促黄体素）、Ｅ２（雌二醇）水平。结果表明,适量的ＰＭＳＧ（１３５０～２０００ＩＵ）能诱导母牛产双胎,其双胎率为４２．９％（３／７）。测定早期妊娠母牛（５、１０、２０、６０ｄ）血清中Ｐ４水平,证明双胎牛均高于单胎牛。     

电活化前后小鼠卵母细胞的超微结构

为了给小鼠卵母细胞电活化的深入研究提供形态学依据,以１．０ｋＶ／ｃｍ、３２０μｓ、３次直流电脉冲（每次间隔１ｓ）的条件,对小鼠卵母细胞（ｈＣＧ后１７ｈ）进行了电活化处理,对活化前后小鼠卵母细胞的超微结构进行了观察。结果显示,电活化刺激后１～７ｈ,大多数小鼠卵母细胞的细胞膜、细胞器和细胞核的超微结构呈现出功能活动逐渐活化的结构相,而少数卵母细胞中泡状线粒体和核仁的超微结构见有异常变化。结果表明,本试验所采用的电活化条件可有效地使小鼠卵母细胞发生活化,而少数卵母细胞中泡状线粒体和核仁出现异常,说明并非所有的活化卵都是正常的。     

白细胞介素-1α调节仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的机制

本实验利用体外培养的２～３周龄仔猪睾丸间质细胞，研究了ＩＬ１α调节间质细胞睾酮分泌的机制。结果表明，ＩＬ１α能抑制ｈＣＧ刺激间质细胞分泌睾酮，其睾酮产生量随ＩＬ１α剂量增大（０～１００μ／ｍｌ）及刺激时间延长（０～４８ｈ）而下降。用２０μ／ｍｌ和５０μ／ｍｌ的ＩＬ１α刺激４８ｈ，可分别抑制６０％和６５％的睾酮产生。ＩＬ１α同样抑制ｃＡＭＰ（３μｍｏｌ／ｍｌ）诱导的间质细胞睾酮的分泌，但不影响ｈＣＧ与间质细胞膜受体的结合量及ｈＣＧ诱导的第二信使ｃＡＭＰ的增加。说明ＩＬ１α抑制ｈＣＧ促睾酮分泌的作用，其抑制点不在ｈＣＧ与受体的结合及第二信使ｃＡＭＰ的聚集上，而在ｃＡＭＰ产生之后的某个环节。     

鸽新城疫野毒株的分离及生物学特性研究

对分离的Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３３株鸽新城疫病毒进行了电镜检查、致病性指数测定、血凝试验（ＨＡ）,与鸡新城疫Ｌａｓｏｔａ毒株的交叉血凝抑制试验（ＨＩ）、致病性试验。测得鸡胚半数感染量（ＥＩＤ５０）分别为１０－８．４１,１０－７．５３,１０－７．８３;鸡胚最小致死量（ＬＤ）均为１０－４;鸡胚平均致死时间（ＭＤＴ）分别为８０ｈ,９０ｈ,９６ｈ;１日龄雏鸡脑内致病指数（ＩＣＰＩ）分别为１．６０,１．５０,１．５５;分离毒株与Ｌａｓｏｔａ毒株和其相应血清的交叉凝集抑制试验有明显差异。将分离毒株分别接种１月龄鸽各３只,４～１０ｄ全部出现典型神经症状,１５ｄ内死亡。结果表明所分离的３株病毒为鸽新城疫病毒,在抗原性上与鸡新城疫病毒存在一定差异,对鸡也有一定致病力。为制定防制措施,研制鸽新城疫疫苗,控制新城疫流行提供了科学依据。     

内毒素诱导的红细胞过氧化损伤及山莨菪碱的保护效应

通过给山羊静脉注射大肠杆菌内毒素复制的休克模型,研究了内毒素诱导的红细胞脂质过氧化损伤,并观察了山莨菪碱的相关保护效应。将３０头山羊随机分成３组,第Ⅰ组（ｎ＝６）静注生理盐水作为正常对照,第Ⅱ组（ｎ＝１２）静注大肠杆菌（Ｏ１１１Ｂ４）内毒素２次（间隔２４ｈ）,第Ⅲ组（ｎ＝１２）处理同第Ⅱ组,仅处理前１０ｍｉｎ静注山莨菪碱。分别于处理后１、３、５、７、９、１２ｈ采血,制备样本供测定。结果显示,山羊注射内毒素１ｈ后,红细胞脂质过氧化物含量明显增加（Ｐ＜０．０１）,红细胞膜还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量显著下降（Ｐ＜０．０１）,并伴有红细胞ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ、ＧＲ活性降低（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）;而注射内毒素前给与山莨菪碱的山羊,其上述各项指标的变化均较小。以上结果表明,内毒素可使红细胞脂质过氧化作用增强,而山莨菪碱能拮抗红细胞的这种过氧化损伤,对细胞有一定的保护作用。     

家兔显微受精影响因素及显微受精胚胎超微结构

以家兔为实验动物，利用胞质内精子注射技术和透明带下精子注射技术，对卵龄、精子获能、注射针管口径、操作室温和操作方法等影响显微受精的因素以及显微受精胚胎的超微结构进行了研究。结果显示：（１）胞质内单精子注射，ｈＣＧ后１５－１７ｈ卵的存活率为６９．４％，显著（Ｐ〈０．０５）高于ｈＣＧ后１９－２１ｈ卵的存活率（４７．３％）；而受精率和卵裂率（分别为５２．９％和４１．２％）分别低于ｈＣＧ后１９－２１ｈ卵的     

磁处理对减少家蚕微粒子病发生的效果研究

当用２００Ｇ × ２４ｈ、２０Ｇ × ２４ｈ恒定直流磁场处理一代杂交蚕催青期蚕卵时，可减少家蚕食下感染微粒子病的发生率，并可同时提高蚕茧产量与经济效益，但对胚种感染引发的微粒子病无减少作用。恒定直流磁场处理催青期蚕卵的最适强度为２００Ｇ × ２４ｈ；Ｎ极单向处理效应好于Ｎ、Ｓ极双向处理；磁处理的滞后效应可一直保留至５龄。     

新生羔羊血液某些免疫功能指标的特点和发育变化

本文以１２只自然分娩、初生重１．５－４．５ｋｇ的新生湖羊羔为对象，研究了７日龄产后期内血液某些免疫功能指标的特点和发育变化。结果表明：羔羊出生时ＷＢＣ较低，２４ｈ内明显升高，然后稍降，３日龄后逐渐回升至相对稳定；中性粒细胞％出生时较低，１日龄明显升高，然后缓慢下降，５日龄后相对稳定，淋巴细胞和单核细胞％与中性粒细胞呈相反关系变化，也于５日龄后相对稳定；淋巴细胞中Ｂ淋巴细胞比例２４ｈ内明显上升，以后随日龄增长呈波动性下降，Ｔ淋巴细胞比例变化与其相反；血浆ＴＰ、Ａ、Ｇ、ｒ－Ｇ含量出生时均较低，１日龄吃初乳后明显升高，以后ＴＰ保持相对稳定的高水平，Ａ呈下降趋势，Ｇ特别是ｒ－Ｇ进一步上升，约３日龄趋于相对稳定。     

伊氏锥虫HGPRT缺陷株驯化及生物学特性观察

为了获得伊氏锥虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶（ＨＧＰＲＴ）缺陷株,用不同浓度的８－氮鸟嘌呤（８－ＡＧ）和８－ＡＧ加紫外线照射的方法,对伊氏锥虫体外培养株进行了为期６０～１０１ｄ诱导驯化。结果,以每毫升含８－ＡＧ４０μｇ的培养液培养驯化,再配合紫外线照射,以及以每毫升含８－ＡＧ６０μｇ的培养液培养驯化,均获得了伊氏锥虫ＨＧＰＲＴ缺陷株。试验表明,培养虫体经过２～３个死亡期后逐步进入适应期,虫数升高到（１．５～２．５）×１０６／ｍＬ,饲养细胞通常于２～５ｄ变黑、崩解,应适时更换。培养驯化的１３株克隆虫株,经６－巯基鸟嘌呤（６－ＴＧ）抗性测定,１０株存活。克隆株在３倍量氨基喋呤的ＨＡＴ选择性培养液中死亡。生物学试验表明,ＨＧＰＲＴ缺陷株在无ＨＴ的培养液中生长良好,对小鼠致病力有下隆的趋势,虫血症和小鼠死亡时间比对照组延长１倍多。抗体凝集试验表明,ＨＧＰＲＴ缺陷株未发生抗原变异现象。超微结构显示,ＨＧＰＲＴ缺陷株的动基体、核和核仁比对照组明显增大,核膜电子密度区也明显增宽。     

山莨菪碱对山羊内毒素休克时肝脏自由基损伤的保护机理

将３６头杂交山羊随机分成３组：１组作为对照;Ⅱ组静注大肠力内毒素１８００ＥＵ／ｋｇ,注射２次,间隔２４ｈ,Ⅲ组在同Ⅱ组处理基础上,于第２次注前１０ｍｉｎ静注山莨菪碱（６５４－２）注射液２．５ｍｇ／ｋｇ,第２次注射内毒素后５ｈ和１２ｈ各组均剖杀６头山羊,检测肝脏抗氧化系统功能。结果表明：Ⅱ组肝组织丙二醛（ＭＤＡ）含量明显高于Ⅰ组,谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽不麦（ＧＲ）活性及总超氧化物岐化酶（Ｔ－Ｓ     

禽流感病毒分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)全基因克隆及序列分析

本研究用无特定病原体（ＳＰＦ）鸡胚增殖禽流感病毒鹅体分离株Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ／１／９６（Ｈ５Ｎ１）（ＧＤ１／９６）,提取病毒基因组总ＲＮＡ,运用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术分别扩增该病毒分离株的８个基因片段的ｃＤＮＡ,分别克隆后进行序列测定。序列分析结果表明,所扩增到的８个片段均包含相应的病毒基因的完整开放阅读框架。ＧＤ１／９６株与１９９７年香港禽流感事件中的４株香港流感病毒分离株（分别来自人、鸡、鸭和鹅）的ＨＡ基因的高度同源性说明它们可能起源于同一种系,但ＮＳ基因的差异说明它们分属于不同的基因群系。ＧＤ１／９６株与香港流感病毒分离株的核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性较低（６３．９％￣９８．１％）,而香港流感病毒分离株之间的核苷酸和氨基酸序列的同源性很高（９６．５％￣１００％）,且香     

胆酸负荷对绵羊和大鼠血浆(血清)甘胆酸浓度的影响

湖羊通过颈静脉插管灌注较高剂量的胆酸和大鼠通过尾静脉给予不同剂量的胆酸造成胆酸负荷,研究其对血浆（血清）甘胆酸（ＣＧ）浓度的影响,结果表明：湖羊血浆ＣＧ浓度在灌注胆酸后呈波动性变化,在１８ｈ和１３８ｈ显著高于灌注前。大鼠以中胆酸组血清ＣＧ变动最为显著,灌注４ｈ后开始升高,１８ｈ后达到显著水平,一直持续至１３８ｈ,并在１８,９０,１１４和１３８ｈ显著高于对照组;低胆酸组仅在灌注后１８ｈ血清ＣＧ显著高于对照组,其他时间变化不显著;而高胆酸组在灌注后４２,６６,９０和１１４ｈ显著高于灌注前,但与对照组比较差异均不显著     

一种快速有效制备单克隆抗体的方法

以人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）为抗原,对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠一次脾内直接注射免疫,免疫后６ｄ,取其血清进行抗体检测,结果１２８００倍稀释度仍呈阳性。取此免疫小鼠脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞ＮＳ－１进行细胞融合。融合后,将经检测抗体阳性的细胞孔置于显微镜下,挑选单个克隆进行克隆化,得到２株单克隆抗体细胞株２Ａ８、４Ｅ６。将其分别接种于ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔中,收获的腹水效价分别达１０－６和１０－５。     

禽霍乱基因缺陷菌株双型联合免疫的研究

将禽源多杀性巴氏杆菌Ｃ４８－１株（血清型为５∶Ａ）用化学诱变剂亚硝基胍（ＮＴＧ）处理，从３０００多个克隆中筛选出９株链霉素依赖性基因缺陷型菌株（Ｃｓｔｄ株），经２０代连续回复突变测定，除１株外，其余８株表型稳定。将８株Ｃｓｔｄ株用小鼠做毒力比较试验，...     

饲喂乳杆菌对雏鸡生长性能的影响

１材料与方法１．ｌ鸡源乳杆菌制剂由健康雏鸡消化道分离鉴定后接种于普通营养肉汤内,经３７ｔ、２４ｈ培养后,保存在４Ｔ冰箱中备用。ｌ．２鸡白痢沙门氏菌由患有鸡白痢死亡的雏鸡的心脏及肝脏中分离并鉴定后,３７℃、２４ｈ条件下,培养于普通营养肉汤内,然后置于４℃冰箱中备用。１．３试验动物依沙褐雏鸡,由吉林省长春市宏大禽业开发公司提供。１．４增重试验将１２０只依沙褐雏鸡随机分成２组,每组６０只。试验组在雏鸡出壳后即开始每天每只雏鸡饮服０．５亿鸡源乳杆菌,单鸡饲喂,然后进行自由采食和饮水;对照组不进行任何处理…     

初乳免疫物质向新生仔猪血液转移的研究

２４头太湖猪仔猪，在出生后即被卫离分为４组，并分别人工哺葡萄糖盐水、牛初乳、牛常乳和自然哺乳。前３且在４８ｈ后归圈哺乳。经酶联免疫竞争抑制法测定，牛ＩｇＧ向ＢＣ组和ＢＭ组仔猪血液中的转移分别在２４ｈ和１６ｈ左右达到峰值，为（２８．１９±１５．４６）ｇ／Ｌ和（１２．８９±１．７８）ｇ／Ｌ，以后逐渐下降，归圈自然哺乳后７ｄ，两组仔猪均仍有５ｇ／Ｌ左右牛ＩｇＧ残留；ＰＣ组和ＧＳ组未检测到牛ＩｇＧ免疫反应