卵母细胞体外成熟前生发泡(GV)异质性的研究进展

目前胚胎工程操作如胚胎体外生产、胚胎克隆等研究所需要的大量成熟卵母细胞主要是由卵母细胞体外成熟 (ＩＶＭ)提供的。尽管许多种动物的ＩＶＭ系统取得了很大的进展 ,但是还不十分完善 ,这在猪尤为突出。例如猪ＩＶＭ -ＩＶＦ系统生产的猪胚胎发育能力很低 ,最多也只有 2 0 %发育到囊胚阶段 ,ＩＶＭ/ＩＶＦ胚胎移植后发育到期的比率也只有 5 %～10 %。目前还不十分清楚导致发育率低的特定原因。就用于体外成熟的卵母细胞来源而言 ,通常应用初情期前母猪中等大小卵泡内的未成熟卵母细胞 ,这些卵泡与排卵卵泡的生理状态有很大的不同 ,或者从…     

哺乳动物繁殖研究进展

1　应用拉细的开口细管法 (ＯＰＳ)玻璃化冷冻 -解冻山羊囊胚移植取得成功细管经加热使之变软 ,拉细 ,在直径是原来直径一半的部位断开。山羊的扩张囊胚于ＴＣＭ - 199+2 0 %血清 +10 %乙二醇 (ＥＧ) +10 %二甲基亚砜(ＤＭＳＯ)液中 ,39℃平衡 1ｍｉｎ ,ＴＣＭ - 199+2 0 %血清 +2 0 %乙二醇 (ＥＧ) +2 0 %二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)中再作用 2 0ｓ。最后利用毛细管的毛细作用吸力将胚胎装入改良的细管狭窄端 ,然后将其垂直地浸入液氮中。以常规的玻璃化冷冻方法为对照组。结果表明 :拉细的开口细管法适于冷冻羊的第 7ｄ囊胚。该方法简易有效 ,…     

猪胎儿成纤维细胞制作方法的改进及应用

实验以猪胎儿为研究材料 ,对胎儿成纤维细胞的分离与培养方法进行改进 ,采用室温消化的方法制作猪胎儿成纤维细胞。结果表明 ,室温消化方法的细胞获得量 ,细胞活力和贴壁细胞的形态均优于常规的热消化方法 ,而且操作简单 ,速度快     

哺乳动物腔前卵泡体外培养及研究进展

哺乳动物卵巢内的原始卵泡库是雌性生殖资源的储存库,但大部分卵泡在腔前阶段已退化闭锁了,这无疑是对这一资源的巨大浪费。因此,越来越多的学者致力于腔前卵泡的开发和利用,建立了一系列的培养体系,尤其在小鼠上做的比较成功,已经得到了少量后代。文章主要就卵泡的发生发育过程,腔前卵泡的分离方法,培养基的选择,不同直径腔前卵泡培养体系的建立,影响腔前卵泡发育的因素及研究进展进行了阐述,为进一步完善腔前卵泡培养体系,揭示其发育机理提供参考。     

OCT-在哺乳动物早期胚胎中的表达和调控

转录调节因子OCT是POU家族的成员,有专一的细胞和组织表达模式,由于它们能与DNA八聚体模体（Octamer motif）ATGCAAAT结合而被命名为Octamerbindingprotein,即OCT,并且分别从OCT-1命名到OCT-10,其中OCT-4（也称OCT-3、OCT-3/4、POU5f1、OTF3或NF-A3）属于POU家族的第V亚族,     

亚胺环己酮对猪卵母细胞人工孤雌激活作用的研究

本文以体外成熟的猪卵母细胞为材料，以乙醇、电脉冲和氯化锶为人工刺激条件，研究了蛋白质合成抑制剂－亚胺环己酮（CHX）对猪卵母细胞的孤雌激活效果的影响。结果表明，乙醇、电脉冲和SrCl2均可使猪母细胞激活，而电脉冲的活效果最好。当分别与CHX联合使用时，激活率显著高于单独的乙醇、电脉冲或SrCl2刺激。说明，CHX与乙醇、电脉冲及SrCl2联合使用对猪IVM卵母细胞激活具有显著的协同促进作用。     

改进山羊超数排卵方法的研究

实验以黑龙江地方山羊为实验材料 ,应用国产激素研究了单纯使用 FSH和 FSH结合PMSG,以及氯前列烯醇 (PG)和孕酮 (Pr)的超排和发情同步效果。结果显示 ,单纯用 FSH处理的山羊 (N=6 )平均排卵 6 .83± 1.19个 ,平均获卵 5.83± 1.0 1个 ,获卵率在 85.30 % ;用 FSH结合 PMSG处理的母羊 (N=17)平均排卵 13.94± 1.11个 ,平均获卵 10 .59± 0 .97个 ,获卵率为 78.2 0 % ;t检验证明 ,两种处理山羊的排卵和获卵数差异均显著 (P <0 .0 5) ;说明 FSH与PMSG联合使用大大提高了山羊的排卵和获卵数。尽管 PG和 Pr两种同步发情方法都使山羊在开始超排处理后 72到 96 h之间发情 ,但用 PG处理的超排山羊 (N =2 0 )发情时间更为集中 ,大多数 (70 % )都于注射 PG后 2 4～ 30 (开始超排处理后 72～ 78) h开始发情。注射 h CG(发情 )后2 4～ 30 h,70 %以上的卵母细胞都具有第一极体 ,为新排的卵母细胞 ;到 h CG后 36～ 4 0 h,只有不到 4 0 %的卵子有第一极体     

上游处理方法对山羊精子活力影响研究

通过延长精子上游时间的方法研究了该处理过程中影响精子活力的几个因素。主要结果如下：１、不同的培养液对上游后的精子活力有影响;２、不含白蛋白（ＢＳＡ）的培养液不适于精子的上游处理;３、肝素浓度增加,上游处理后精子活力有所下降;４、山羊精（子）液在室温（２２℃）和低温（４℃）条件下至少可以保存２ｈ,上游处理后精子活力未受到明显影响,但保存时间长于２ｈ,上游处理后精子活力有所下降