猪胎儿成纤维细胞制作方法的改进及应用

实验以猪胎儿为研究材料 ,对胎儿成纤维细胞的分离与培养方法进行改进 ,采用室温消化的方法制作猪胎儿成纤维细胞。结果表明 ,室温消化方法的细胞获得量 ,细胞活力和贴壁细胞的形态均优于常规的热消化方法 ,而且操作简单 ,速度快     

哺乳动物腔前卵泡体外培养及研究进展

哺乳动物卵巢内的原始卵泡库是雌性生殖资源的储存库,但大部分卵泡在腔前阶段已退化闭锁了,这无疑是对这一资源的巨大浪费。因此,越来越多的学者致力于腔前卵泡的开发和利用,建立了一系列的培养体系,尤其在小鼠上做的比较成功,已经得到了少量后代。文章主要就卵泡的发生发育过程,腔前卵泡的分离方法,培养基的选择,不同直径腔前卵泡培养体系的建立,影响腔前卵泡发育的因素及研究进展进行了阐述,为进一步完善腔前卵泡培养体系,揭示其发育机理提供参考。     

卵母细胞体外成熟前生发泡(GV)异质性的研究进展

目前胚胎工程操作如胚胎体外生产、胚胎克隆等研究所需要的大量成熟卵母细胞主要是由卵母细胞体外成熟 (ＩＶＭ)提供的。尽管许多种动物的ＩＶＭ系统取得了很大的进展 ,但是还不十分完善 ,这在猪尤为突出。例如猪ＩＶＭ -ＩＶＦ系统生产的猪胚胎发育能力很低 ,最多也只有 2 0 %发育到囊胚阶段 ,ＩＶＭ/ＩＶＦ胚胎移植后发育到期的比率也只有 5 %～10 %。目前还不十分清楚导致发育率低的特定原因。就用于体外成熟的卵母细胞来源而言 ,通常应用初情期前母猪中等大小卵泡内的未成熟卵母细胞 ,这些卵泡与排卵卵泡的生理状态有很大的不同 ,或者从…     

哺乳动物繁殖研究进展

1　应用拉细的开口细管法 (ＯＰＳ)玻璃化冷冻 -解冻山羊囊胚移植取得成功细管经加热使之变软 ,拉细 ,在直径是原来直径一半的部位断开。山羊的扩张囊胚于ＴＣＭ - 199+2 0 %血清 +10 %乙二醇 (ＥＧ) +10 %二甲基亚砜(ＤＭＳＯ)液中 ,39℃平衡 1ｍｉｎ ,ＴＣＭ - 199+2 0 %血清 +2 0 %乙二醇 (ＥＧ) +2 0 %二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)中再作用 2 0ｓ。最后利用毛细管的毛细作用吸力将胚胎装入改良的细管狭窄端 ,然后将其垂直地浸入液氮中。以常规的玻璃化冷冻方法为对照组。结果表明 :拉细的开口细管法适于冷冻羊的第 7ｄ囊胚。该方法简易有效 ,…     

OCT-在哺乳动物早期胚胎中的表达和调控

转录调节因子OCT是POU家族的成员,有专一的细胞和组织表达模式,由于它们能与DNA八聚体模体（Octamer motif）ATGCAAAT结合而被命名为Octamerbindingprotein,即OCT,并且分别从OCT-1命名到OCT-10,其中OCT-4（也称OCT-3、OCT-3/4、POU5f1、OTF3或NF-A3）属于POU家族的第V亚族,     

猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

小鼠获能精子体外短期保存的初步研究

本实验以小鼠为实验动物 ,检测已获能精子在 4℃、 2 4℃保存能否维持其受精能力 ,以期为家畜的体外受精提供有益参考。结果表明 :1) 2 4℃保存的精子受精率明显高于 37℃和 4℃保存的精子 (P <0 0 5 ) ;2 ) 2 4℃保存的精子浓度增加 ,其受精率明显增加 (P <0 0 5 ) ;3)获能精子于 2 4℃、 5 %CO2 和空气保存 2 4h ,其受精率没有明显差异 (P >0 0 5 ) ;4 )获能精子于 2 4℃保存 5 %CO2 2 4、 4 8和 72h后的体外受精率有明显的差异 (P <0 0 5 )。