PRV、PRRSV和链球菌混合感染的诊断

为了解贵州某猪场猪只死亡原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理剖检诊断、细菌分离鉴定、生化鉴定和PCR/RT-PCR检测诊断等方法对发病死亡猪只进行诊断。结果表明:根据流行病学调查、病理剖检初步诊断送检病猪疑似猪瘟(CSF)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪细小病毒病(PP)、猪伪狂犬病(PR)、猪流感病毒(SI)和细菌感染,经病毒核酸检测,结果猪伪狂犬病病毒(PRV)PCR检测和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)RT-PCR检测均检出特异性条带,判断为阳性;细菌分离培养、生化鉴定确诊为链球菌感染。说明造成该猪场猪只发病死亡的原因为PRRSV、PRV和链球菌混合感染。     

断奶仔猪圆环病毒2型和葡萄球菌混合感染的诊断

河南省新乡市某种猪场仔猪出现精神沉郁、气喘、皮炎等临床特征,有的仔猪死亡,剖检可见肺脏呈肉样病变、肾脏有出血点等病变。为了对该病例做出诊断,提取病变肺脏组织的总RNA和DNA进行蓝耳病病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、伪狂犬病毒(PRV)、细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)的PCR或RT-PCR检测,同时进行了细菌的分离培养、生化鉴定、PCR检测。结果表明:PCR扩增出382 bp的PCV-2片段,分离菌为葡萄球菌,初步诊断该病例为PCV-2与葡萄球菌混合感染。     

猪蓝耳病毒、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌混合感染的实验室诊断及血清抗体检测

为了确定山东省莱西市某猪场送检病猪的发病原因,并调查猪群主要疫病抗体水平以便为猪场疫病防控提供科学参考依据,试验采集送检病猪病料,综合运用临床观察、病理剖检、细菌分离鉴定和病毒核酸检测等技术进行确诊;并对分离菌进行药敏试验;使用ELISA检测试剂盒对猪群的猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种主要病原进行检测,分析抗体水平。结果表明:送检病料经TSA培养基分离培养可见针尖状菌落,革兰氏染色镜检为阴性杆菌,生化试验鉴定为副猪嗜血杆菌;该分离细菌对大观霉素高度敏感,对头孢噻肟极度敏感;猪群中PRRSV和PCV-2为阳性,未检测出其他病毒;同场猪群的猪瘟抗体水平偏低需加强免疫,猪蓝耳病抗体水平不稳定,存在野毒感染风险。说明送检病例为PRRSV、PCV-2和副猪嗜血杆菌的混合感染,同场猪群需注意加强猪瘟免疫和猪蓝耳病抗体监测。     

1例保育猪呼吸道疾病的诊断报告

正江西泰和某猪场保育猪发生严重的呼吸道疾病,送检6头已死亡的保育猪。通过临床发病特征、病理剖检等初步诊断,推测导致死亡的可能病原为猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)等病毒感染,继发细菌感染。取样送至江西农业大学预防兽医学实验室进行RT-PCR/PCR检测结果表明,发病猪PRRSV、PCV-2和猪瘟病毒(CSFV)阳性,同时,从发病猪肺脏和心     

采用荧光定量PCR技术对新乡市猪圆环病毒2型病原进行流行病学调查

为了解河南省新乡市猪圆环病毒2型(PCV-2)流行情况,采用荧光定量PCR技术对2015年1—9月份新乡市动物疫病预防控制中心收到的118头病死猪进行剖检和样品采集,并全部进行了PCV-2的病毒核酸检测。结果表明:新乡市猪场场群猪圆环病毒2型检出率为82.35%;8—9月份检出率高达100%,1月份检出率最低,也达到了12.5%;其中育肥猪检出率高达94.12%,保育猪检出率为22.72%,哺乳仔猪检出率为20.96%;平均检出率为42.37%。此次调查反映了新乡市PCV-2的感染情况和规律,可为新乡市PCV-2的防控工作提供理论依据和指导。     

广西断奶仔猪猪圆环病毒2型的检测

对广西16个养猪场的22份断奶仔猪病料用PCR技术检测猪圆环病毒2型（PCV-2），对阳性病进一步检测猪瘟病毒、猪生殖和呼吸系统综合征病毒、伪狂犬病病毒及细菌性病原。结果，从南宁市郊某猪场表现衰弱症状的病猪病料中检测出PCV-2，而这些病料没有检出猪瘟病毒、猪生残和呼吸系统综合征病毒、伪狂犬病病毒及可疑细菌，证实广西存在PCV-2引起的断奶仔猪多系统衰弱综合征（PMWS）。     

猪圆环病毒2型和致病性沙门氏菌的混合感染

诸多规模化猪场断奶后仔猪出现全身消耗性综合征,同时出现呼吸困难,寒颤,下痢,体温升高等症状。发病猪的病变组织用PCR检测PCV-2为阳性,分离的细菌可于普通琼脂、伊红美兰和麦康凯琼脂培养基上生长,革兰氏染色为阴性;形态与组织触片镜检及生化反应特征与沙门氏菌一致,并可致死小鼠,仅对头孢唑啉呈中度敏感。结合该病的流行病学调查、临床症状、病理剖检,证实2型猪圆环病毒(PorcineCircovirus2,PCV-2)和致病性沙门氏菌混合感染。     

鸭源血清4型禽腺病毒的分离鉴定

山东省某鸭场发生以心包积液-肝炎为特征的传染性疾病,并造成死亡。为探究其发病原因,对病料进行临床剖检、细菌学检查、病毒分离以及动物回归等试验,结果显示:剖检均可见心包大量淡黄色或透明积液,肝脏有不同程度的坏死出血;细菌分离呈阴性;PCR检测显示血清4型禽腺病毒为阳性;动物回归试验与临床病例一致。确定引起山东省鸭心包积液-肝炎综合征的病原为血清4型禽腺病毒。     

猪瘟疫苗在猪圆环病毒2型阳性猪场的免疫效果观察

为了研究猪圆环病毒2型(PCV-2)感染对猪瘟疫苗免疫效力的影响,对PCR证实为PCV-2阳性的试验猪进行猪瘟疫苗的免疫,分别在免疫后第1、3、7、14、21、28和63天对试验猪进行猪瘟病毒(CSFV)和PCV-2的抗体检测。检测结果表明PCV-2阳性猪在猪瘟疫苗免疫后均未能产生有效的CSFV抗体,从免疫猪的血液和内脏组织中也未能检测到CSFV核酸。虽然只能从1头PCV-2阳性猪的血清中检测到PCV-2抗体,但是却能从全部实验猪的淋巴结中检测到PCV-2的核酸。试验猪的病理组织学观察和白细胞计数也表明PCV-2阳性猪的淋巴结呈典型的PCV-2感染的病理变化,且白细胞数量显著低于健康猪。表明PCV-2的感染会对猪的免疫系统造成损害从而抑制猪瘟疫苗的免疫效果。     

猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及其在临床检测中的应用

选择猪圆环病毒2型(PCV-2)基因保守区设计1对引物P1和P2,扩增536 bp的片段,该方法可以特异地检测出PCV-2的DNA,而对猪细小病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒及未接PCV-2的PK-15细胞均呈阴性;该法能检测出29 ng/L的病毒DNA。对扩增片段进行测序,结果表明扩增片段属于PCV-2。应用该方法对2008年度上海及周边地区送检的91份临床样本进行了PCV-2的检测,结果表明,阳性样本为52份,阳性率为57.14%。研究结果表明,建立的PCR方法检测PCV-2具有较好的敏感性和特异性,可用于PCV-2感染疑似病例的诊断及其分子流行病学调查。     

华南地区猪圆环病毒1型与2型感染情况调查及相互关系

根据已发表的猪圆环病毒1型(PCV-1)与猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组序列,设计4对特异性引物,用套式PCR方法对广东地区的规模养猪场或个体养殖户送检的144份猪血清进行了PCV-1与PCV-2病毒检测.结果显示PCV-1阳性血清21份,PCV-2阳性血清40份,PCV-1与PCV-2均为阳性的血清7份,PCV-1阳性率为14.6%,PCV-2阳性率为27.8%;PCV-1与PCV-2均为阳性的阳性率为4.9%,从数据上的比较可知PCV-2的感染率高于PCV-1的感染率.说明PCV-2感染比较普遍,患病猪群中也存在一定比例的PCV-1病毒感染.     

猪肺疫多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

为了研究四川乐山某猪场爆发的保育猪严重呼吸道疾病的主要病原,试验采用病理剖检、病毒检测、细菌分离鉴定、生化鉴定、动物回归试验以及多杀性巴氏杆菌种特异性KMT基因的PCR检测对病原进行鉴定。结果表明:发病猪有严重肺炎症状,支气管内部有少量泡沫,腹股沟淋巴结出血、水肿,其他实质器官未见明显病理变化;病毒检测结果显示为蓝耳病病毒阳性,猪瘟病毒、伪狂犬病毒、圆环病毒2型阴性;从病猪肺脏中分离获得大肠杆菌和1株蓝耳病病毒继发的高致病性多杀性巴氏杆菌;该分离菌株对多种药物均高度敏感。     

一起猪多杀性巴氏杆菌与猪圆环病毒2型混合感染的诊断

为了确定引起猪出现发热、呼吸困难、进行性消瘦等症状的病原,试验采用细菌分离、间接免疫荧光试验检测抗原、PCR检测以及病理检查等方法进行诊断。结果表明:从扑杀猪体内分离到巴氏杆菌,并经16S rRNA测序判定为多杀性巴氏杆菌(Pm);通过间接免疫荧光试验鉴定出猪圆环病毒2型(PCV-2)。说明引起猪患病的病原为Pm和PCV-2。     

猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的混合感染

2005年以来,贵州省一些猪场发生以母猪流产、产弱仔、死胎,仔猪腹泻、消瘦、行动障碍等为特征的疾病,剖检病猪可见心肌、肾、淋巴结等出血,肺水肿,肝脏表面有灰白色坏死点,脾脏边缘有出血性梗死,发病率和死亡率较高。运用荧光抗体技术检测猪瘟（CSF）,设计套式引物用RT PCR或PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV-2),并进行了细菌分离培养。综合临床症状、病理变化、实验室检验,确诊为猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪圆环病毒2型（PCV-2）混合感染。     

一起猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒2型混合感染的诊断

为了给某规模化猪场提供疫病诊断防控依据,试验对该规模化猪场3头发病猪进行了临床诊断、病理解剖和实验室检测。采集3份组织样品提取核酸后进行PCR检测,采集169份血清采用ELISA方法检测抗体。结果表明:猪群整体食欲下降,病猪体温为39.8~41.5℃,部分病猪四肢末端呈蓝紫色,剖检可见猪肾脏表面密布点状出血,肺脏有明显出血点,肠壁变薄;有1份病料为猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)阳性,有2份病料为PRRSV和PCV-2阳性;PRRSV抗体平均阳性率为76.92%,CSFV抗体平均阳性率为81.66%。说明该猪场出现CSFV、PRRSV、PCV-2混合感染,免疫抗体整齐度差,保护率低,应加强饲养管理,降低饲养密度,实行严格的全进全出制度和混群制度,减少环境应激因素,控制并发感染,保证猪群具有稳定的免疫状态。     

"猪高热病"的流行病学调查与主要病因分析

按浙江省出现"猪高热病"流行高峰前后两个时段,采集了53个养猪场户的病猪组织病料和114份病猪及健康猪血清样品,应用PCR或RT-PCR同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环II型病毒(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流感病毒(SIV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)等7种病毒,应用ELISA方法检测PRRSV、PCV-2、PRV(gE)三种抗体。高热病病猪的病毒检测结果表明,疫情发生前对病猪检测7种病毒性病原,检到PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV和PPV共5种病毒,检出率分别为24%、32%、34%、1.5%和0.5%,与发生疫情后的检出率比较,只有PRRSV的病毒检出率呈明显上升,从24%上升到57.7%,PCV-2病毒检出率基本持平,CSFV、PRV和PPV病毒检出率则出现下降或未检到,且流行高峰出现前后均未检到SIV和JEV。抗体检测结果显示,疫情发生后发病猪群的PRRS抗体上升最为显著,从8.97%上升到80.6%,PCV-2抗体从16.7%上升到27.8%,PR(gE)抗体下降为0,提示此次疫病是以PRRS为主要病原或诱因所致的多病原综合性传染病。     

猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和沙门氏菌混合感染病例的诊断

近年来.随着猪场养殖规模的不断扩大,加上猪群频繁的调入转出,猪群发病的动态也越来越复杂。猪群发病是由多种致病因素作用的结果,往往由两种或两种以上的病原混合感染所造成。常常是多种病毒和细菌混合感染或者是继发感染,导致发病率和死亡率急剧升高,危害加大,使疾病的预防和控制难度增大,造成严重的经济损失。本文对某发病猪场病死仔猪进行了剖检诊断、病理组织学观察及实验室病原检测,确诊其为猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和沙门氏菌混合感染。     

上海地区发病猪群猪圆环病毒2型阳性样本中其他病原混合感染状况调查

本研究对2009年至2011年上海地区发病猪群内脏样本进行猪圆环病毒2型(Porcine circovirus,PCV2)检测,对PCV2阳性样本进行2a/2b分型检测,并对PCV2阳性样本进行其他病原混合感染状况调查。上海地区发病猪群PCV2阳性率平均为54.34%,以PCV2b单纯感染为主。在PCV2阳性样品中,其他病毒混合感染率平均达到60.2%,细菌混合感染率达到61.22%,病毒与细菌同时混合感染率为41.84%,平均混合感染率达到53.06%。研究表明,上海地区发病猪群PCV2阳性样本与其他病原混合感染比例较高,病毒主要以PRRSV为主,细菌主要以大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌及副猪嗜血杆菌为主;混合感染是导致猪群死亡的重要因素,也是当今上海地区猪群疫病的感染现状及发病模式。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒人工感染试验

为探讨单纯猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染与猪"高热病"及猪群死亡率的关系,用经检测为PRRSV阳性的猪病料接种2头断奶仔猪,每日测定体温,将发病猪处死剖检,用PCR方法进行PRRSV检测和ELISA检测抗体,发现攻毒猪均迅速出现持续高热症状,无死亡趋向,剖检试验猪以肺脏损伤为主,无细菌的继发感染,PCR检测P...     

猪圆环病毒分子生物学研究进展

自1974年Tischer等首次发现猪圆环病毒(porcinecircovirus,PCV)以来,随着对PCV研究的深入,根据猪圆环病毒的致病性及基因组差异又可将其分为无致病性(或PK-15源性)的猪圆环病毒I型(PCV-1)和有致病性(PMWS源性)的猪圆环病毒II型(PCV-2)。PCV-1对猪无致病性,但能产生血清抗体,在猪群中普遍存在,接种2日龄与9日龄的猪无临床症状。PCV-2对猪有致病性,主要导致一种以断奶仔猪呼吸急促或困难、腹泻、贫血、明显的淋巴组织病变和进行性消瘦为特征的新的疾病,即仔猪断奶后多系统衰竭综合症(PMWS)。近期研究表明,PCV-2还能引起其他许多…