两蜂种蜂王浆蛋白质组分析

采用蛋白质组双向电泳技术和已鉴定蜂王浆蛋白质组的比对,对王浆高产蜜蜂（浆蜂）和中华蜜蜂（中蜂）的蜂王浆蛋白质组进行了差异比较。结果表明,浆蜂蜂王浆的总蛋白质点数（93个）显著高于中蜂蜂王浆总蛋白质点数（70个）,它们的等电点主要集中在5-8之间,分子量在50-80kDa之间,其中共有蛋白质点为30个;通过与已鉴定的浆蜂蜂王浆蛋白质组比较,这些共有蛋白质点推断为蜂王浆主蛋白1、2、3和葡萄糖氧化酶。同时两蜂种蜂王浆的蛋白质丰度也存在较大差异,共有点中有4个蛋白质的丰度中蜂显著高于浆蜂,7个浆蜂显著高于中蜂中。结果表明浆蜂和中蜂蜂王浆蛋白质种类及丰度均有较大差异。     

中华蜜蜂和意大利蜜蜂蜂毒磷脂酶A2基因的克隆与序列分析

从中华蜜蜂（Apis cerana cerana)和意大利蜜蜂（Apis mellifera)工蜂毒腺中快速抽提总RNA，用RT-PCR方法分别扩增各得到约含470bp的cDNA片段，将这2个片段克隆入PGEM-T载体，进行测序和序列分析，结果表明，这2个片段均含有405bp、编码蜂毒PLA2成熟肽的cDNA，并分别由cDNA推导出两者所编码的氨基酸序列，经序列比较，中蜂PLA2与意蜂PLA2具有95%的同源性，与大蜜蜂PLA2、美国熊蜂PLA2及黑腹果蝇PLA2的同源性分别为90%、54%、39%。     

不同蜂传粉对设施桃果实生长发育和品质的影响

应用意大利蜜蜂和小峰熊蜂在北京平谷区果树试验站为设施桃传粉, 以研究2 种蜂的传粉行为对设施桃果实生长发育及其品质的影响。结果表明,应用小峰熊蜂授粉, 设施桃果实在整个发育过程中的果径增长速度显著高于意大利蜜蜂授粉的果实(P<0.05)。2 种蜂授粉的设施桃果实发育历期不同,小峰熊蜂授粉区的桃果实比意大利蜜蜂授粉区的果实提前7 d 左右成熟。桃的生理落果高峰在小峰熊蜂授粉区出现2 次,而在意大利蜜蜂授粉区出现3 次。在小峰熊蜂授粉区, 距离蜂箱不同距离之间的桃座果率基本一致; 而在意大利蜜蜂授粉区, 座果率随着与蜂箱距离的增大而明显降低。小峰熊蜂授粉区桃树的平均座果率略高于意大利蜜蜂授粉区, 但二者之间差异不显著(P>0.05)。经2 种蜂传粉的设施桃果实营养品质差异不显著(P>0.05), 但二者均明显优于人工授粉组(对照)。和意大利蜜蜂授粉的桃果实相比, 经小峰熊蜂传粉后的桃果实, 单果重高, 畸形果率低(P<0.05)。本研究认为中国本土小峰熊蜂为设施桃的传粉效率优于意大利蜜蜂。     

用Taq酶反转录、扩增及克隆中蜂溶血肽成熟区cDNA的研究

蜂毒的药用价值一直受到人们的关注.溶血肽(melittin)是蜂毒的一种主要成分,分子量约2.6 kD.陈仲兵等和Vlasak等已克隆到意蜂(Apismellifera)melittin的cDNA,王关林等在大肠杆菌中对意蜂melittin进行了融合表达.但对中蜂(Apis cerana)melittin基因的研究尚未见报道.近年已有研究发现TaqDNA聚合酶具逆转录活性.本研究所用的RNA抽提试剂盒能使mRNA在高温下保持稳定,故可利用TaqDNA聚合酶对中蜂melittin的mRNA在高温下进行RT-PCR,获得中蜂melittin的成熟区双链cDNA,克隆、测序后与已发表的意蜂相应序列进行比较,为研究中蜂melittin及用Taq DNA聚合酶直接进行RT-PCR提供基础资料.     

中华蜜蜂两种化学通讯相关蛋白基因时空表达分析

利用Real-time PCR技术对中华蜜蜂(Apis cerana cerana)两个化学通讯相关蛋白：气味结合蛋白Ac-ASP2和化学感受蛋白Ac-ASP3基因的时空转录谱进行了研究。结果表明，Ac-ASP2是一个特异表达于中蜂触角的基因，在幼虫及蛹中均不表达；利用2-ΔΔCt的相对定量方法，发现Ac-ASP2在成虫触角中具有几个丰度较高的日龄，即1、9、15、27和30日龄，这几个高表达日龄均较其它时期高出近10倍以上；利用标准曲线的绝对定量方法，Ac-ASP3在其不同器官中的原始拷贝数关系为：翅>腹>胸>足>触角>头，其中翅、腹和胸部模板拷贝数较高（均达到106数量级），而在足、触角以及头中的表达丰度相对较低（均为105数量级），表明Ac-ASP3与中蜂翅与腹部的化学感受行为有密切的关系。     

蜂王浆三针夹取式拣虫机的设计与试验

蜂王浆拣虫是挖浆前必须完成的工序。由于蜜蜂幼虫个体较小、数目庞大,因此人工拣虫过程劳动强度非常大;然而中国养蜂人员老龄化日益严重,且目前蜂王浆拣虫机械化尚未成熟。该文针对中国养蜂现状提出一种以三针夹取的方式将王台中蜜蜂幼虫夹出的方法。以三针夹取的拣虫方式构建蜂王浆拣虫机整机方案。三根针在王台孔内壁同时做向心运动或分离运动,将蜜蜂幼虫夹住或松开。对传动机构中球面槽轮和凸轮的参数进行计算。通过有限元分析得出动力输入端脚踏板受力情况。计算得出球面槽轮圆柱销弧长7.5π,槽深20.68 mm;得出凸轮的理论廓线;有限元分析结果得出动力输入方式可靠。该机器在保留蜂王浆幼虫完整的前提下,一次性将整条王台(64孔)中蜜蜂幼虫全部拣出,可实现连续作业,拣虫效率为10条/min时为人工的10倍,克服了蜂场手工作业时间长和劳动强度大问题。对扩大中国蜂业养蜂规模有着极大的促进作用。     

营养生态条件对蜜蜂球囊菌生长及产孢的影响

从碳源、氮源、维生素、矿质元素等方面研究了营养生态条件对蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis Olive & Spiltoir)生长及产孢的影响.结果表明,营养生态条件的变化对蜜蜂球囊菌的影响极大.A.apis菌丝体生长最好的碳源是果糖,产孢量最高的是葡萄糖,不利用山梨糖和甘露糖;该菌优先利用有机氮源 ,不利用无机氮源中NaNO2、H2NCSNH2;维生素对A.apis 产孢量有极为显著的影响,复合维生素比单一维生素能更好地促进菌丝体生长, 尤其对产孢更为有利;矿质元素中Mg2+、P5+、K+、Zn2+促进菌丝体生长和孢子的形成,Na+对菌丝体的生长有抑制作用.     

茶芬氨基酸含量及茶皂甙对蜜蜂的毒性试验

本文测定了茶花，油茶花和杂花粉中蛋白质和氨基酸的含量，首次使用高浓度茶皂地群蜂进行了现场毒性试验，结果表明，茶花粉中蛋白质，游离氨基酸和水解必需氨基酸的总量高于油茶花粉和杂花粉，试验证实了茶皂甙对蜜蜂无毒性作用。     

滇东南南瓜传粉昆虫密度对生境丧失的差异性响应

响应多样性理论认为不同传粉蜂对环境胁迫的响应尺度和过程在时空上存在差异,然而目前尚不清楚我国重要农林生态系统传粉蜂对环境胁迫的响应规律。试验以云南省文山州广南县南瓜农田生态系统为研究对象,根据农田景观中自然半自然生境数量和面积的变化梯度和离自然半自然生境的距离梯度选择南瓜样地,抽样调查南瓜样地内熊蜂密度和蜜蜂密度。解译卫星影像获取土地类型数据,分析熊蜂密度和蜜蜂密度同自然半自然生境面积百分率和耕地面积百分率的相关系数,在最大相关系数对应的空间尺度下探索蜜蜂密度和熊蜂密度对生境丧失的响应规律。研究发现,熊蜂密度随自然半自然生境面积百分率的增加而显著增加,但蜜蜂密度并不受自然半自然生境面积的影响。同时,熊蜂密度随耕地面积百分率的增加而显著下降,但蜜蜂密度不受耕地面积的影响。此外,熊蜂密度随离自然半自然生境的距离增加而显著下降,但蜜蜂密度不受距离作用的影响。由此可见,云南省文山州南瓜传粉熊蜂和蜜蜂多度对生境丧失表现出多样的响应规律。熊蜂和蜜蜂对生境丧失的差异性响应可能是保障该区域南瓜受粉的重要机制。     

黄龙县林下中蜂养殖技术探索

黄龙县中蜂养殖历史悠久,森林资源丰富,蜂蜜品质优良。通过对林下发展中蜂养殖方面的研究,重点对场地的选择、蜂场的环境要求、蜂场蜜源植物的要求、蜂场的密度、蜂箱的放置方法、春夏秋冬的养殖管理方法和中蜂经常出现的病虫害防治方面进行了综合阐述,为广大蜂农提供养殖技术借鉴。     

不同发育期及授粉方式对设施甜瓜中稳定同位素比值变化的影响研究

为探究不同发育期及授粉方式对设施甜瓜稳定同位素比值变化的影响,本研究基于元素分析——稳定同位素比率质谱(EA-IRMS),测定在不同发育期和授粉方式中设施甜瓜的4种稳定同位素比值(δ¹³C、δ¹⁵N、δ¹⁸O和δ²H),采用单因素方差分析法解析激素授粉和中华蜜蜂授粉对甜瓜稳定同位素比值的差异性。结果表明,在相同的种植和环境条件下,自然分馏效应导致设施甜瓜在不同发育时期的同位素差异。在甜瓜发育期间,不同授粉方式设施甜瓜的δ¹³C、δ¹⁵N和δ¹⁸O值较稳定,无显著差异(P>0.05),而在发育30 d时激素授粉与蜜蜂授粉甜瓜的δ²H值分别为-43.63‰和-53.50‰,存在显著差异(P<0.05)。本研究初步揭示了稳定同位素在甜瓜发育过程中以及不同授粉方式下的分馏情况,其中δ²H值可作为甜瓜授粉方式的一项标识性指标,对丰富设施甜瓜溯源体系具有重要意义。     

不同采收时期蜂王浆抗氧化活性研究

为研究不同采收时间对蜂王浆品质的影响,以4-9月份采收的蜂王浆为研究对象,通过比较不同采收时间蜂王浆中蜂王浆主蛋白(MRJPs)、总水溶性蛋白和多酚的含量,分析了MRJPs与自由基清除能力和总抗氧化能力的相关性。结果表明,不同采收期蜂王浆中MRJPs含量存在显著差异(P<0.05),且6月份采收的MRJPs含量最低。水溶性蛋白及总酚含量差异不大(P>0.05)。蜂王浆自由基清除能力与MRJP1和 MRJP3含量的相关系数达0.828和0.847;总抗氧化能力与MRJP1和 MRJP3含量的相关系数分别为0.680和0.743。蜂王浆的抗氧化活性与其MRJPs存在一定程度的正相关,但与多酚含量相关性不明显,说明其自由基清除能力与总抗氧化活性可能是多种抗氧化性活性物质共同作用的结果。本研究为蜂王浆的抗氧化活性研究提供了参考。     

UV-C处理对贡橘冷害的影响

为探讨UV-C处理对贡橘冷害的影响,以贡橘为试材,在贮前分别用0、1、3、5 KJ·m~(-2)UV-C辐射处理,研究在1℃贮藏时,果实冷害指数、失重率、果皮细胞膜透性、MDA、POD、SOD等指标的变化。结果表明,3 KJ·m~(-2)的UV-C处理能有效延迟贡橘果实的冷害发生时间,并能减轻冷害症状,降低果实失重率,降低细胞膜透性,抑制MDA的积累,提高果实POD、SOD活性。由此可见,适当剂量的UV-C处理能提高贡橘对低温的适应性,降低冷害的发生,延长果实贮藏期,减少经济损失。本研究结果为减缓柑橘类果实冷害提供了理论依据。     

Silicon Effect on Nutrient Acquisition of Peanut (Arachis hypogaea L.) Under Aluminum Stress

Aluminum (Al) toxicity represents one of the main yield-limiting factors for crops in acid soils. Silicon (Si) is known to increase tolerance in higher plants. This study was conducted to determine whether treatment with Si could improve nutrient uptake by peanut under Al stress. Peanut (Arachis hypogaea L. cv Zhonghua 4) was raised with or without Si (1.5 mM) in the growth chamber under 0 and toxic Al (0.3 mM) levels. Aluminum stress significantly decreased the root- and total-dry weight by 52.4% and 32.0%, respectively. The content of nitrogen (N), phosphorus (P), potassium (K), calcium (Ca), and magnesium (Mg) was significantly decreased, but that of Al increased markedly in shoots and roots after Al exposure at seedling, flower-needle, and pod-setting stage. Silicon alleviates Al toxicity in peanut plants in relation to Al distribution and allocation of tissue P, K, Ca, and Mg by favoring the partitioning of dry mass to roots.     

Trace Metal Contamination During Grinding of Plant Samples

Inductively coupled plasma-mass spectroscopic (ICP-MS) analysis of leaves from 22 cabbage crops in the Sa P? and B?c Hà districts of Láo Cai Province, North-Western Vi?t Nam, revealed unexpectedly high concentrations of chromium (Cr) and nickel (Ni). The concentrations were strongly linearly related (r² = 0.94), indicating sample contamination during grinding through a stainless-steel hammer mill. We tested this hypothesis in two ways. First, brown rice ground through the same mill was contaminated not only by Cr and Ni, but also cobalt (Co), iron (Fe) and molybdenum (Mo). Second, scanning electron microscopy/energy dispersive analysis of x-rays (SEM/EDS) of the ground samples revealed small fragments with co-located Fe, Cr and Ni, consistent with stainless steel wear fragments. Other grinders may perform differently and we suggest that quality assurance protocols for trace metal analysis of plants should include testing for grinder wear metals. Lastly, brown rice appears to be convenient for investigating contamination of plant tissues during grinding.     

Effects of humic acid on remediation of the nutritional deficiency of gerbera in hydroponic culture

Information is scant on the effect of humic acid (HA) on physiological, antioxidant and photosynthesis attributes of gerbera plants undergoing nutrient deficiency in culture solution. Gerbera plants cv. Malibu were grown in a factorial experiment based on a completely randomized design with 3 replications, using 3 different nutrient solutions [complete nutrient solution (NSc), 25% NSc (NS1), and 50% NSc (NS2)] treated with 2 levels of humic acid [0 (HA0) and 500 mg/l (HA1)].The interaction effect of HA and NS showed that HA improved the flower number in NSc, the transpiration in NS1+HA1, photosynthesis rate in NSc+HA1, stomatal conductance (gs) in NS2, mesophyll conductance of leaves in all NS levels and photosynthetic water use efficiency in NSc+HA1. The interaction effect of nutrient solution and HA on antioxidant activity was inconclusive, malondialdehyde content was the highest in NS2 and the lowest in NS1+HA1. The peroxidase activity increased in complete nutrient solution with and without HA and there were no differences among other treatments. Superoxide dismutase activity increased in NS1 and complete nutrient solution with HA and reached the highest in NSc. Humic acid was more effective in nutrient uptake, i.e., nitrogen, phosphorus, potassium, calcium, zinc, and iron (N, P, K, Ca, Zn, and Fe) in complete nutrient solution compared to NS1 and NS2. Conclusively, humic acid can compensate the nutrient deficiency stress of the culture solution in regards to protein synthesis, photosynthesis attributes regardless of the nutrient uptake of gerbera.     

氮磷钾不同配比对饲用稻威优198产量及糙米蛋白含量的影响

采用田间小区试验研究“推荐配比”(N:P2O5:K2O比率为190:90:100 kg hm-2)、“高氮量配比”(N:P2O5:K2O比率为210:90:100 kg hm-2)、“低氮量配比”(N:P2O5:K2O比率为170:90:100 kg hm-2)以及“常规配比”(N:P2O5:K2O比率为216:112.5:202.5 kg hm-2)4种氮、磷、钾配比施肥对饲用稻威优198蔗糖合成酶(SUS)、腺苷二磷酸焦磷酸化酶(AGPase)、硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)以及产量和糙米蛋白质的影响。结果表明:“推荐配比”能提高不同生育时期水稻功能叶(旗叶)和粒籽中碳、氮代谢关键酶的活性,这些关键酶活性的变化显著影响水稻产量和糙米全氮以及蛋白氮的含量。统计(P0.05)结果证实“推荐配比”能提高水稻产量达到8200 kg hm-2,与“常规配比”相比产量提高了24.81%;“推荐配比”糙米全氮和蛋白氮含量分别达到22.70 g kg-1和21.98 g kg-1,与“常规配比”相比差异显著,并且其全氮和蛋白氮含量分别提高17.01%,18.38%。     

小反刍兽疫N蛋白单克隆抗体的制备及竞争ELISA方法的建立

小反刍兽疫(PPR)是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的一种危害严重的急性接触性传染病。为了检测血清中存在的抗PPRV的抗体,本研究利用纯化后的真核表达的PPRVN蛋白重组蛋白(rBacmid-PPRN)作为免疫原免疫BALB/c小鼠(Mus musculus),并使用原核表达的PPRVN蛋白重组蛋白(rpET-PPRN)作为间接ELISA检测抗原,共筛选得到8株抗PPRVN蛋白的单克隆抗体(mAb)。其中1D5单抗腹水效价达1∶106,分泌单抗亚类为IgG2b。以1D5作为竞争抗体、纯化后的rpET-PPRN蛋白作为包被抗原,建立了检测小反刍兽疫血清抗体的单抗竞争性ELISA(c-ELISA)方法。所建立的c-ELISA方法能够特异性的区分牛瘟阳性血清和小反刍兽疫阳性血清,并具有较高的灵敏度和特异性。应用建立c-ELISA检测方法检测共129份山羊(Capra hircus)血清样品,与标准c-ELISA试剂盒的符合率为96.9%。本研究成功地建立了可特异性检测动物血清中抗PPRV抗体的竞争性ELISA方法,对小反刍兽疫的诊断、疫苗免疫水平的监控及控制其流行具有重要意义。     

四种常规方法提取伊利石有效钾的机制比较

采用化学分析、X射线衍射、中红外光声光谱以及原子力显微镜的方法,比较了0.2 mol L~(-1)四苯硼钠法、1 mol L~(-1)沸硝酸法、2 mol L~(-1)冷硝酸法和2 mol L~(-1)热盐酸法浸提伊利石中有效钾的机制。结果表明,四苯硼钠法浸提时,伊利石中钾素释放量达到全钾量的59.5%,且基本均通过层间交换反应予以释放,结构离子铁、铝和硅释放量极低;采用三种酸溶液浸提时,其钾素释放量仅占全钾量的1.53%~2.46%,通过层间交换反应释放的钾量占释放量的比例为88.4%~94.0%。四苯硼钠浸提时伊利石层间距扩大,产生次生过渡矿物,并形成富硅表层,但在伊利石表面无溶蚀特征;三种酸溶液浸提时伊利石结构无改变,但其结晶度降低,且表面有明显的溶蚀特征。因此,土壤矿物层间钾是作物可利用有效钾的主要来源,三种酸溶液浸提方法一方面低估了有效钾容量,另一方面提取了一部分不能为植物所利用的结构态钾,不适宜于用来评价伊利石及土壤有效钾库容量。