紫甘薯京薯6号脱毒苗的诱导与快繁

针对紫甘薯京薯6号生产现状,应用植物茎尖分生组织脱毒培养技术,对紫甘薯京薯6号脱毒苗的生产进行研究.结果显示,茎尖分生组织在添加0.75mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA从的MS培养基上可诱导得到无毒苗,出芽率达到100%,出芽平均时间为28d,脱毒率达到95%.以紫甘薯京薯6号脱毒苗茎节为材料,在MS培养基中培养20～25d可以获得无毒快繁苗,繁殖系数为5～6倍.     

宁薯10号茎尖离体培养及种薯生产

为了保持宁薯10号甘薯品种的优良种性,延长种薯的田间应用年限,运用茎尖分生组织培养,指示植物检测方法获得脱毒苗。结果表明,以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L为宁薯10号茎尖初代培养基,成苗率达94.4%;以6-BA0.2 mg/L+NAA0.05 mg/L为茎切段继代增殖培养基,繁殖系数达2.54倍;宁薯10号脱毒苗产量比对照原品种提高16.5%,达到极显著水平,可大面积推广应用。     

甘薯茎尖脱毒培养技术研究

[目的]探讨利用甘薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法。[方法]以甘薯茎尖分生组织为培养对象,通过蔗糖及外源激素单因素试验研究甘薯茎尖脱毒培养技术。[结果]甘薯茎尖分生组织生长培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+ NAA 0.10 mg/L+蔗糖40 g/L+琼脂6.5 g/L,试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.20 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。在茎尖生长培养基上对25个甘薯品种的茎尖分生组织进行培养,结果表明,8个品种的出苗率为50.0%~79.3%,16个品种的出苗率达80.0%以上,其中,5个品种的出苗率为100.0%。在生根培养基上,试管苗生根率达100%,根多而粗壮,茎叶生长旺盛。试管苗不用炼苗,可直接从培养瓶中移栽至细河沙中,成活率达100%。以巴西牵牛作为指示植物,采用靠接法对试管苗进行脱毒鉴定,脱毒率为79.1%。[结论]该研究为甘薯茎尖脱毒苗生产提供适宜的培养基配方和简便易行的脱毒苗鉴定技术。     

甘薯G病毒基因克隆及组培快繁苗病毒检测

为了脱除甘薯G病毒,获得优良的脱毒甘薯种苗,提高甘薯的质量和产量,根据NCBI上已报道的甘薯G病毒外壳蛋白基因序列设计引物,用RT-PCR克隆了商薯19叶片G病毒外壳蛋白基因序列.测序结果显示,获得的G病毒外壳蛋白基因为800 bp,与报道的基因序列同源性达99％.经过茎尖脱除病毒和组织快繁技术发现,商薯19芽诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;苗增殖的最佳培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+2.0 g/L椰汁水;根诱导的最适培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA.经过PCR检测,商薯19中确实存在G病毒,经过茎尖脱除病毒后,G病毒的脱毒率达到83％.这为获得甘薯脱毒苗及甘薯病毒检测提供了实践操作的依据.     

秦薯5号甘薯茎尖分生组织培养脱毒及种苗快繁技术研究

为获得秦薯5号甘薯脱毒苗用于规模化种苗生产,研究了秦薯5号茎尖分生组织培养各阶段的培养基,适宜的茎尖分生组织芽诱导培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.2 mg/L+GA₃ 0.05 mg/L+蔗糖3%,适宜的试管苗增殖培养基为MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.05 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%, 1/2MS+NAA0.01 mg/L+蔗糖2%+琼脂0.6%适宜生根培养,繁殖倍数可达5.8。试管苗炼苗后移栽至泥炭与珍珠岩(2∶1)混合基质中,成活率可达98%以上。     

不同品种马铃薯茎尖脱毒培养方法优化技术研究

[目的]通过对大西洋、夏波蒂、陇薯三号和中联红四个马铃薯品种茎尖成苗培养基和茎尖剥取方式的研究,分别筛选出适宜这四个品种茎尖成苗的培养基和剥取方式,为适宜新疆栽培的马铃薯品种脱毒研究提供理论依据.[方法]试验以大西洋、夏波蒂、陇薯三号和中联红四个品种为材料,研究不同培养基及茎尖大小对各品种茎尖培养成苗率及脱毒率的影响.[结果](1)MS培养基中加入0.2 mg/L NAA的培养基有助于中联红茎尖分生组织分化成苗,加入0.15 mg/L NAA和0.05 mg/L 6-BA的培养基有助于大西洋、夏波蒂和陇薯三号茎尖分生组织分化成苗;(2)叶原基为1～2时夏波蒂、陇薯三号和中联红脱毒效果较好,叶原基数为2时大西洋因拥有较高的成苗率而获得较好的脱毒效果.[结论]适宜不同马铃薯品种茎尖成苗的培养基不同,剥取方式也有所不同.     

激素配比与茎尖大小对甘薯脱毒苗培育的影响

[目的]研究激素配比与茎尖大小对甘薯脱毒苗培育的影响。[方法]以高淀粉甘薯品种湘福1号和美国SL-9为材料,进行甘薯脱毒苗培育试验。[结果]湘福1号在MS+0.8 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.05 mg/L GA3培养基中,愈伤组织生长最快,成苗率最高,1次培养成苗率比转移的2次培养成苗率高24.5%,秧苗素质也好;美国SL-9茎尖所带叶原基越多,则成苗率越高,脱毒率越低。[结论]综合成苗率与脱毒效果认为,以带2个叶原基的茎尖在含有激素的培养基中的培育效果最好。     

几种因素对甘薯龙薯9号茎尖脱毒的影响

为满足生产上对龙薯9号不带病毒种苗的需求,进行龙薯9号茎尖脱毒组织培养研究。通过正交试验筛选龙薯9号的茎尖组织培养的最佳培养基;以MS为基础培养基,分别添加6-BA、NAA和GA3进行组培苗快速繁殖培养基的筛选;采用指示植物巴西牵牛检测脱毒苗的带病率。结果表明:茎尖组织培养的最优培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.02mg/L+GA3 0.2mg/L+蔗糖30g/L;快繁培养的最佳培养基为MS+NAA 0.2mg/L+蔗糖30g/L;指示植物巴西牵牛检测龙薯9号脱毒苗是否带毒的最佳时期为5-6月,选用植株的中部为接穗可以提高检测效果。     

甘薯茎尖脱毒及组培快繁技术

[目的]研究甘薯茎尖分生组织的分化培养基配方及快繁培养的影响因素。[方法]以甘薯茎尖作为外植体,总结出茎尖分化培养前的灭菌方法,筛选出适宜的分化培养基配方、快繁培养基配方以及影响快繁的各因素。[结果]75%的乙醇30 s+0.1%升汞10 min能取得较好的灭菌效果,降低污染率;适宜的茎尖分化培养基配方为:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.25 mg/L GA3+10 mg/L病毒唑;快繁培养基配方为:Ms+0.1~0.2 mg/L NAA+2 mg/L泛酸钙;适宜的糖用量为30 g/L;培养条件为温度28℃、光照强度2 000lx、光照时间16 h/d时脱毒苗茎段生根较快,侧芽萌发后节间适中,有利于提高繁殖系数。[结论]为脱毒苗工厂化生产提供技术支持。     

不同浓度NAA对甘薯茎尖诱导植株再生的影响

[目的]研究不同浓度NAA对甘薯茎尖诱导植株再生的影响。[方法]以甘薯品种烟薯25号、烟薯26号和烟紫薯3号的茎尖为材料,采用不同浓度NAA处理,对甘薯茎尖组织的诱导培养及高效植株再生进行了研究。[结果]烟薯25号较适宜的茎尖诱导培养基为1.0 mg/L NAA+MS,植株再生率为91%;烟薯26号和烟紫薯3号较适宜的茎尖诱导培养基为1.5 mg/L NAA+MS,植株再生率分别为88%和80%。[结论]该研究可为今后开展规模化甘薯脱毒苗生产提供基础资料。     

紫薯济薯18号脱毒苗的芽诱导及快繁技术研究

为生产出紫薯脱毒苗,进行了紫薯济薯18号脱毒苗的芽诱导及快繁技术研究。结果表明,济薯18号茎尖分生组织最佳芽诱导培养基为MS+0.6 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。在含有NAA的MS培养基中,当NAA浓度为1.0 mg/L时,茎的出芽和生根所需时间最短,培养28 d后叶片数和生根数也最多;但根长和株高在NAA浓度为0.1 mg/L时最高,说明NAA在较低浓度时促进根的生长。在6-BA浓度为0.1 mg/L时,株高最高,根最长;在6-BA浓度为1.0 mg/L时,脱毒苗的生根生芽时间最短,根数最多,叶片数也最多。     

紫薯脱毒快繁技术研究

为促进紫薯优良品种脱毒种苗的推广应用,提高紫薯产量和品质,以济薯18和济黑1号的优良种薯芽为外植体建立无菌体系,采用正交试验设计,研究了不同培养基、6苄氨基嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)及蔗糖浓度对紫薯苗诱导的影响。获得苗诱导的最佳培养基后,再从无菌材料上剥取茎尖进行分生组织脱毒培养。结果表明:这种方法脱毒难度低,脱毒效果好,脱毒率达100%;济薯18茎尖脱毒培养的最佳培养基为:1/2MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20g/L;济黑1号最佳培养基为:MS、1/2MS或1/4MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖20g/L。     

滁菊组织培养脱病毒技术研究

采用改良热处理结合茎尖分生组织培养的方法,建立滁菊组培脱毒快繁技术体系.研究结果表明,滁菊茎段诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;茎尖增殖的最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;壮苗生根的最佳培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA.接种脱毒结果为,脱毒率＞83%,茎尖成活率＞42%.     

玉环剪豆茎尖脱毒与快繁技术

[目的]研究玉环剪豆的茎尖脱毒及快繁技术。[方法]选用含1～2个叶原基的玉环剪豆无菌苗茎尖为外植体,筛选其最佳脱毒培养基,并建立其组培快繁体系。[结果]玉环剪豆茎尖脱毒及诱导的最佳培养基为MS+1.0μmol/L 6-BA+0.5μmol/L NAA,成活率可达75.0%;RT-PCR检测结果显示试管苗脱毒率超过90%;脱毒苗茎段快繁的最佳配方为MS+10.0μmol/L 6-BA+0.5μmol/L NAA;脱毒苗在MS+20μmol/L NAA培养基上的生根率达80%以上。[结论]该研究建立了一套适宜玉环剪豆地方品种的脱毒快繁体系,为玉环剪豆脱毒组培苗的工厂化生产奠定了基础。     

生长素类物质对甘薯茎尖分生组织培养成苗的影响

以豫薯4号和豫薯12号为试材,研究了生长素类物质(IBA和NAA)、温度和光照时间对转移后甘薯茎尖分生组织培养成苗的影响.结果表明,适宜甘薯茎尖分生组织培养成苗的温度为28℃,光照时间以不低于14h@d-1为好,培养基中加入0.1～0.5mg/L的IBA(或NAA)有利于甘薯茎尖分生组织培养成苗,IBA的效果优于NAA.与不加任何生长素类物质的MS培养基相比,添加IBA 0.5mg/L的MS培养基可使甘薯茎尖分生组织培养成苗率提高9.9%～15.4%,平均成苗天数缩短3.3～8.5d.IBA(或NAA)浓度过高时(达到1.0mg/L),甘薯茎尖外植体形成大量的愈伤组织,导致成苗率降低,平均成苗天数延长.     

紫甘薯福宁紫3号茎尖离体培养及种薯生产

为防止紫甘薯新品种福宁紫3号经田间无性繁殖感染病毒导致优良种性退化,运用茎尖分生组织培养获得脱毒苗。试验结果表明,福宁紫3号茎尖诱导成芽培养基为MS+6-BA(0~0.1 mg/L)+NAA(0~0.5 mg/L),成苗率达50%~66.7%,继代增殖培养基为MS基本培养基,繁殖系数达5~6倍;福宁紫3号脱毒种产量比对照原品种提高5.13%,差异达到显著水平。     

高唐栝楼茎尖分生组织培养与快速繁殖技术研究

[目的]采用茎尖分生组织培养脱毒技术培育高唐栝楼的脱病毒试管苗。[方法]对添加不同浓度外源生长调节剂的培养基进行一系列优化试验,筛选出高唐栝楼脱毒试管苗最佳繁殖培养基。[结果]在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.10 mg/L KT培养基中诱导效果较好,技术上达到了快速繁殖规模生产的要求。经反复的病毒检测,证明脱毒试管苗脱病毒彻底。[结论]最终获得了高唐栝楼茎尖培养脱毒与诱导、增殖和生根的培养基,及其生长所需要的外部环境条件和相关配套技术。     

越南紫薯组培快繁及FMV病毒检测

[目的]探究获得大规模的越南紫薯脱毒苗的技术方法。[方法]采用茎尖组织培养快繁技术和RT-PCR技术，探讨不同培养基成分对越南紫薯无毒茎尖的诱导、分化、增殖以及生根的影响和羽状斑驳病毒的检测，建立越南紫薯高效再生体系和病毒检测体系。[结果]筛选出最适越南紫薯不定芽产生的培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L,最佳增殖培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+CW 2.0 mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L。[结论]该试验为大田甘薯种苗FMV病毒的高效检测提供了理论依据。     

甘薯茎尖快速剥离及成苗技术研究

以优质食用型甘薯品种‘烟薯25'为材料,在室内和田间条件下,进行不同茎尖剥离方式对比试验、茎尖成苗对比试验、病毒检测试验、试管苗快繁试验以及产量对比试验,研究甘薯高效脱毒的最佳方式。结果表明:采用"一刀切"的茎尖剥离技术平均茎尖成活率和成苗率比常规的层层剥离技术分别高219.2%和429.7%,茎尖培养的最佳培养基配方为MS+0.08 mg/LIBA+0.06 mg/L6-BA;经病毒检测,采用"一刀切"技术病毒脱除率为50%,而常规技术为25%;通过6种不同快繁培养基配方的试验发现,MS+0.04 mg/LIBA+0.05 mg/LGA为最理想的快繁培养基;经田间产量对比分析,脱毒苗鲜薯产量比不脱毒苗平均增产19.9%、薯干增产19.6%,单株结薯数增加0.6块,大中薯率提高3.8%。     

山药茎尖脱毒试管苗分化培养基的筛选

[目的]筛选山药茎尖脱毒苗分化培养基配方。[方法]选用MS为基础培养基,6-BA、2,4-D、NAA为激素处理因素和不同激素浓度处理水平的3因素3水平的试验设计,进行了山药茎尖脱毒苗分化培养基的筛选研究。[结果]MS＋2.0mg/L6-BA＋1.0mg/L2,4-D＋3.0mg/LNAA为山药茎尖脱毒苗最佳分化培养基。[结论]该培养基能达到山药茎尖离体脱分化与分化之间的一种良好的平衡,是一种进行山药茎尖脱毒苗培养适宜的分化培养基。