木瓜蛋白酶水解制备天然椰子油的研究

以天然椰子为材料,通过不同的料液比、木瓜蛋白酶含量以及酶的作用时间、温度、酸度等,并利用NaCl加速油的分离,同时抑制微生物的增殖来研究制备天然椰子油的最佳条件.结果表明,制备天然椰子油适宜的工艺条件为:料液比(纯椰浆:水,W/W)为100:45～100:60,添加0.075%木瓜蛋白酶(以纯椰浆质量计),3%NaCl(以样品中总水分含量计),在55℃下酶解9 h,5 000 r/min离心30 min,然后再旋转蒸发(0.08 MPa,60℃)30 min,提油率达82.9%.所得椰子油具有显著的椰香味,其酸值为0.17 mg KOH/g,过氧化值未测出,酶解过程中pH值变化幅度较小,菌落总数比空白椰浆和不添加NaCl的酶解体系显著降低,副产物椰子乳清新鲜度高.     

椰子果肉中蛋白质亚基的组成与含量分析

采用非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）和十二烷基硫酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分离分析椰子果肉中蛋白质主要亚基的组成、分子量和含量。结果表明，用pH7．8的磷酸盐缓冲溶液提取，椰子果肉中蛋白质在浓缩胶浓度为7．5％、分离胶浓度为11．5％的SDS-PAGE凝胶系统中可以得到很好的分离。在海南本地高种椰子的椰子果肉蛋白中含有11条亚基，分子量范围为13．6～64．5kDa，主要是中、小分子量亚基。非变性凝胶电泳分析表明，高种椰子蛋白中含有5个不同分子量、不同电荷的组分。     

顶空固相微萃取-气质联用分析香荚兰浸膏风味组分的条件优化

为选择适宜的香荚兰浸膏萃取条件,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术,以固相微萃取样品处理量、萃取温度和萃取时间三个条件分析各萃取条件对香荚兰浸膏风味组分、面积及含量的影响。结果表明：在实验范围内香荚兰浸膏最佳萃取条件为萃取样品添加量2.0 g、萃取温度80 ℃、萃取时间25 min。最佳条件下香荚兰浸膏鉴定出匹配度90以上的化合物45种,此条件下总化合物面积（×10 ¹¹）及香兰素面积（×10 ¹⁰）最高分别为1.04±0.09、6.99±0.46,匹配度90以上化合物占总化合物相对百分含量的90.24%;香荚兰中主要化合物醛类百分含量占总化合物相对百分含量的72.03%。     

巴西橡胶树叶片蛋白样品的制备及质谱初步分析

采用TCA-丙酮沉淀法并稍做改进提取巴西橡胶树叶片总蛋白,蛋白溶解后,用试剂盒对蛋白上清液进行纯化和浓度测定。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和双向凝胶电泳(2-DE)的结果均表明,所制得的蛋白样品质量较高,并且纯化过的蛋白样品2-DE(双向电泳)图谱效果更好(7 cm,考染)。根据预实验结果,选用17 cm IPG预制干胶条对纯化的蛋白样品进行2-DE实验,采用快速银染法进行染色,随机挖取银染胶上6个蛋白点进行MALDI-TOF MS分析和数据库检索,鉴定了3个蛋白,它们是：1-氨基环丙烷-1羧酸合酶2,核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基和F11O4.2。本实验为进一步对巴西橡胶树叶片中具有重要生物学功能蛋白的筛选和鉴定打下了方法学基础。     

晋麦47幼苗中一个水分胁迫应答蛋白的SDS-PAGE和Nano LC-MS/MS鉴定

水分胁迫应答蛋白的表达与小麦品种的抗旱性密切相关。为了明确与抗旱相关的水分胁迫D-应答蛋白的表达特点及蛋白组成,对小麦品种晋麦47幼苗进行不同供水量处理,应用SDS-PAGE、纳升级液相色谱-电喷雾串联质谱联用技术(Nano LC-MS/MS),分析了水分胁迫D-应答蛋白条带表达量的变化和蛋白组成。SDS-PAGE检测结果表明,水分胁迫D-应答蛋白条带在-0.5 MPa PEG-6000水溶液胁迫下,6 h出现可见表达,胁迫至48 h时表达量最大,之后,此蛋白条带的表达量又逐渐下降;幼苗胁迫48 h后恢复正常供水,复水72 h后该蛋白消失。切取正常供水和胁迫处理两个条件下SDS-PAGE胶差异表达蛋白条带,经质谱分析分别获得两个阳性结果,且正常供水和PEG-6000胁迫两种处理条件下D-应答蛋白组成一致,均由核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基和磷酸甘油酸变位酶组成(P<0.05);PEG-6000胁迫条件下两个蛋白(亚基)的鉴定得分分别为1 632和88,覆盖率分别为30%和21%;在鉴定的肽段中,有65个肽段同属于核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基,其中35个肽段可信度均超过阈值分数;有5个肽段同属于磷酸甘油酸变位酶,其中4个肽段的可信度超过阈值分数。结果表明该蛋白条带可能主要由核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶大亚基等组成。     

高效液相色谱法测定热带水果中维生素E含量

采用高效液相色谱(HPLC)法测定冷冻干燥处理的11种热带水果中维生素E的含量。使用SB-Phenyl柱,用甲醇/水为流动相,采用紫外检测器在300nm处对样品中的维生素E进行测定,用外标法进行定性定量分析。结果表明:8种热带水果的维生素E质量分数分别为,红毛丹0.935mg/kg,杧果23.9mg/kg,菠萝蜜17.7mg/kg,火龙果24.1mg/kg,菠萝1.28mg/kg,番木瓜16.5mg/kg,人心果10.6mg/kg,草莓20.0mg/kg;尚有龙眼、椰子、荔枝未检出。维生素E质量浓度在2~21 mg/L时,其峰面积与进样质量的线性相关系数达到0.9997,测定的相对标准偏差(RSD)为1.4%~3.5%(n=6)。试样加标回收率为94%~102%。该方法的最小检测质量分数为0.10mg/kg。      

绿玉树茎皮脂溶性成分及其抗氧化活性研究

运用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对绿玉树茎皮脂溶性成分进行分析，为绿玉树的综合利用提供科学依据及数据支持。应用色谱峰面积归一化法定量分析各成分的相对百分含量，共分离鉴定出32个化合物，占其总量的96.01％。含量较高的分别是羊毛甾醇（29.86％）、13, 27-环乌苏-3-酮（8.45％）、9, 19-环羊毛甾-7-烯-3-醇（5.31％）。并运用DPPH法对绿玉树茎皮脂溶性成分进行抗氧化活性测定结果表明：其具一定的抗氧化活性，IC50为263.70 μg/mL。     

不同品种木薯叶绿体比较蛋白质组学初步研究

以“华南8号”木薯(SC8)和“华南124号”木薯(SC124)的叶绿体作为研究材料,采用改进酚抽提法提取蛋白,通过单向SDS-PAGE电泳和双向SDS-PAGE电泳,比较不同木薯品种叶绿体的蛋白表达谱,并对表达的差异蛋白进行MALDI-TOF MS质谱鉴定,获得15个差异蛋白,其中有6个蛋白在SC124木薯叶绿体中表达较高,9个蛋白表达很低.对蛋白进行功能分析,发现差异蛋白主要参与蛋白翻译后修饰、周转、分子伴侣、碳水化合物运输等过程.通过RT-PCR验证了木薯核酮糖1.5-二磷酸羧化酶、ATP合酶β亚基的基因表达情况,结果表明,ATP合酶β亚基基因表达与蛋白质的表达比较一致,而核酮糖1,5-二磷酸羧化酶基因与蛋白质表达变化不一致.     

毛细管电泳图谱在小麦品种鉴定中的应用及其与品质的关系

为了给种质资源和育种研究、种子管理及新品种保护提供理论依据,用优质面包小麦中优9507和中优9701的4个杂交组合CA9614/中优9507、CA9614/中优9701、中优16/津麦2号//中优9701和中优9507/CA9640的46份高代品系,研究了毛细管电泳在鉴别亲缘关系很近的小麦品种中的应用潜力及醇溶蛋白组成与加工品质的关系.结果表明,4个杂交组合醇溶蛋白毛细管电泳分离峰的聚类分析结果与其选择历史一致,说明毛细管电泳是小麦品种(系)鉴定的有效方法.来自于同一F3或F4株系的亲缘关系很近的杂交后代在6～8 min或10～12 min的分离峰中存在较大差异,说明毛细管电泳能够用于鉴定亲缘关系很近的品种.品质表现一致的材料其醇溶蛋白组成无明显共性,说明醇溶蛋白组成对小麦蛋白质含量、SDS沉淀值和揉面特性等品质性状影响不大.     

一种安全简便测定椰子胚乳乙酰辅酶A羧化酶活性的方法

建立利用HPLC测定椰子胚乳乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)活性的方法。色谱柱为德国MN nucleosil C18(4.60 mm i.d×250 mm,5.0 μm),流动相为10 mmol/L 磷酸二氢钾(pH 6.7)︰甲醇＝90︰10(V︰V)。结果表明：Malonyl-CoA浓度在0.02～0.12 μg/mL,色谱方法有良好的线性关系,线性相关系数为0.999,Malonyl-CoA最低检测浓度为0.02 μg/mL,最终测定椰子胚乳ACCase活性为1.20 ng Malonyl-CoA/min/μg酶蛋白。     

不同品牌椰子汁质量的研究

为了更好地了解市售椰子汁的质量状况,本实验以市场上常见的20种不同品牌的椰子汁为样品,通过测量这20个样品的脂肪含量、可溶性固形物含量、蛋白质含量、酸价以及色差,分析了市售椰子汁的质量状况。结果发现:脂肪、可溶性固形物、蛋白质含量达到国家标准QB/T 2300-2006规定的均有19个样品;被测样品的酸价均值为0.86 mg/g,个别样品酸价较大,色差值(Lab值)的变化揭示了椰子汁在颜色上的差异。     

椰子ZF-HD基因家族的鉴定及生物信息学分析

ZF-HD蛋白是一类只存在于植物体内且含有锌指结构域的转录因子家族,其不仅能够调节植物的生长发育,且在植物响应逆境过程中也起着重要的作用。本研究通过比对已开发的椰子基因组数据,共鉴定出20个椰子ZF-HD蛋白。采用生物信息学的方法,对其基因结构、蛋白理化性质、蛋白质保守结构域、超二级结构、系统进化树及表达谱进行分析。结果显示：椰子ZF-HD蛋白多为碱性蛋白,且主要定位于细胞核、叶绿体及线粒体中。椰子ZF-HD基因家族可分为6个亚族,每个亚家族都具有相似的结构域和超二级结构。motif搜索分析显示,CoMIF亚族只含有锌指结构域保守序列,其他亚族均含有锌指结构域序列与同源异形盒结构域序列。表达谱分析显示,CoZHD18、CoZHD20在测序的各组织中表达较少,其他家族成员在各组织中的表达量具有差异性。     

椰汁冰淇淋的生产工艺

研究以椰子汁为辅料生产椰汁冰淇淋的生产工艺,探讨不同椰汁用量对冰淇淋品质的影响,开发出一种含有脂肪、蛋白质、维生素等营养成分的冰淇淋,并通过正交试验确立了生产椰汁冰淇淋的工艺参数。结果表明:以25%椰子果汁、10%奶油、10%白砂糖、12%全脂淡奶粉、0.3%稳定乳化剂为配方可生产出品质优良的产品。     

椰麸组分蛋白的氨基酸组成、结构与乳化性分析

为提高椰子加工副产物的利用,本研究从椰麸中依次提取4种组分蛋白,包括清蛋白、球蛋白、谷蛋白-1和谷蛋白-2.分析这4种组分蛋白的氨基酸组成,并利用SDS-PAGE技术分析其亚基组成和分子量.同时分析其表面疏水性,并研究不同离子强度对椰麸各组分蛋白的乳化性和乳化稳定性的影响.结果表明,椰麸蛋白质中清单白、球蛋白、谷蛋白-...     

海南滨海椰林Bt菌株的筛选与鉴定

以海南省文昌市的滨海椰林为试点,采集144份天然土壤样品,分离出10株苏云金芽孢杆菌,对其中10株菌株进行光学显微镜观察,发现菌体有长菱形、短菱形、方形等晶体类型.对这10株菌进行cry1、cry11、cry2、cry3、cry4、cry5、cry6、cry7、cry8、cry9、cry10类基因的PCR-RFLP鉴定...     

2种提取椰子树RNA方法的比较研究

椰子树组织中富含多糖和酚类化合物，为了获取高质量的RNA，笔者以椰子树叶片和根部为材料，比较分析CTAB法和SDS法提取RNA的效果。结果表明：CTAB法提取椰子树组织的总RNA效果较好，能有效克服酚类物质和多糖对RNA提取的影响。经OD值检测和电泳检测，总RNA的28 S和18 S条带清晰可见，纯度较高，完整性好，无明显降解，以此RNA为模板进行RT-PCR反应，能获得特异条带，表明该RNA完全可以用于后续的分子生物学操作。     

Characterization of soybean proteins by HPLC

Proteins extracted from five soybean cultivars were separated by reversed-phase (RP) and size exclusion (SE) high performance liquid chromatography (HPLC). A RP-HPLC method was developed that permits protein separation of nondefatted flours from soybean clutivars. RP-HPLC showed that protein of these cultivars could be classified into two groups, one of which contained intermediate component peaks under identical conditions. Genetically closely related cultivars exhibited only small differences in their RP-HPLC chromatograms. Size exclusion high performance liquid chromatography (SE-HPLC) resolved extracts of nondefatted flours from various soybean cultivars into six common peaks which accounted for 80 to 94% of the total peak area. Soybean cultivars were primarily identified by the percent area of their fifth peak (fraction F5) which had the highest variability of the total peak area. Seed protein of the cultivars was closely related with the area percent of peak F2 (r=0.91). SE-HPLC proved to be a rapid one step quantitative method with potential for assessing soybean cultivars on the basis of protein content.     

利用固相微萃取-气质联用技术分析中国主栽品种椰子水的挥发性成分

采用顶空-固相微萃取气质联用(HS-SPME-GC/MS)方法分析5种中国椰子品种‘本地高种’、‘文椰2号’、‘文椰3号’、‘文椰4号’、‘小黄椰’的椰子水挥发性成分。在5种椰子水中共鉴定出24种挥发性成分,其中‘本地高种’和‘文椰4号’鉴定出15种、‘文椰2号’和‘文椰3号’鉴定出14种、‘小黄椰’鉴定出13种,主要为醇类、醛类、酸类、酮类、酯类和酚类,其相对含量分别是16.71%~40.64%、1.82%~19.29%、14.14%~56.30%、2.49%~3.46%、2.24%~9.11%和10.76%~20.28%。醇类和酸类分别在‘文椰4号’和‘小黄椰’中相对含量最高,醛类在‘本地高种’中相对含量最高,酯类和酚类在‘文椰2号’相对含量最高。5种椰子水不仅在香气物质构成上差异显著,相同挥发性成分在不同品种中相对含量差异也显著,这些差异的呈现可为今后矮种椰子的育种提供新的方法和手段。     

Effects of polymerization changes in maize proteins during nixtamalization on the thermal and viscoelastic properties of masa in model systems

Although nixtamalization is widely used in the food industry, a comprehensive understanding of the influence of proteins on the viscoelastic behavior and thermal properties in masa is still lacking. In this work, the effect of protein changes and its influence on the masa viscoelastic behavior were studied using model systems. Mixtures of lime-starch, zein-starch and lime-zein-starch were cooked at 90 °C from 20 to 150 min. Zein changes during cooking were analyzed by SDS-PAGE. Thermal transition temperatures and enthalpies were determined using differential scanning calorimetry (DSC). Dynamic oscillatory tests were undertaken on model system samples with 50% (w/v) moisture content, using a strain-controlled rheometer. SDS-PAGE showed that zein polymerizes during cooking. In the zein-starch model system, no visible protein bands were found after 30 min cooking; however, when lime was present, five bands were observed in all samples. Thermal transitions were observed around 55–62 °C for all model systems, probably corresponding to starch retrogradation. Rheological studies showed that protein exhibited higher influence in the gel strength by increasing the elastic character of the system. It was hypothesized that the combined effects of lime on starch, zein polymerization and the formation of calcium-zein bonds during cooking, yield a stronger and more elastic gel structure.