蜂胶黄酮作为PPV灭活疫苗佐剂活性的研究

为研究蜂胶黄酮不同使用方法对豚鼠体液免疫和细胞免疫的影响,选取99只豚鼠用于试验研究,其中24只用于检验PPV疫苗的安全性,其余75只随机分成5组,分别为蜂胶黄酮佐剂PPV疫苗处理组(PFA)、油佐剂(OA) PPV疫苗+口服蜂胶黄酮处理组(OA-PFApo)、油佐剂(OA) PPV疫苗+肌注蜂胶黄酮处理组(OA-PFAim)、油佐剂PPV疫苗处理组(OA)和生理盐水对照组(CK)。结果表明:与油佐剂PPV疫苗组相比,蜂胶黄酮可以提高豚鼠细胞免疫和早期体液免疫; OA-PFAim组豚鼠体液免疫和细胞免疫均显著增强,而OA-PFApo组豚鼠早期体液免疫效果显著增强。综上,蜂胶黄酮可以直接作为一种PPV疫苗佐剂使用。     

猪链球菌不同佐剂苗的制备及对家兔的免疫原性

选择油乳佐剂、蜂胶佐剂和铝胶佐剂分别制成３ 种猪链球菌苗。对兔体进行了免疫试验,结果证实：油乳佐剂苗免疫原性最好,其次为蜂胶佐剂苗,铝胶佐剂苗效果较差。３ 种佐剂苗中,无论哪种佐剂疫苗,经两次免疫注射的效果均优于一次注射的;且两次注射后,抗体滴度高,维持时间长,进一步验证了免疫抗体的消长规律。     

乳酸菌发酵骨泥后上清液免疫增强作用的研究

本试验通过迟发型变态反应试验(足跖增厚法)、抗体生成细胞的检测(jeme改良玻片法)、小鼠碳廓清试验，观察灌服不同剂量乳酸菌发酵骨泥的上清液后小鼠的反应。结果证明：经乳酸菌发酵鲜骨泥后的上清液可以增强小鼠的迟发型变态反应，增加小鼠的抗体细胞生成数，加强其巨噬细胞吞噬能力。因此，说明此上清液具有增强机体细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫功能的作用。     

猫杯状病毒不同分离株免疫原性的比较

为确定猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)分离株JL-1、JL-2、JL-3、JL-4、SH免疫原性强弱,将各株灭活后分别制备油乳剂疫苗。将6~12周龄健康非免疫家猫随机分为免疫组和对照组。免疫组皮下接种相应毒株制成的灭活苗,对照组接种等量F81细胞培养液。于接种后不同时间点采集猫血清,应用ELISA方法检测免疫猫Ig G抗体、IL-2、IL-4和IFN-γ含量,评价各株诱导的体液免疫水平;采用MTT法测定淋巴细胞增殖,评价各株诱导的细胞免疫水平。结果表明:各株均能诱导试验猫产生免疫应答,其诱导体液免疫顺序依次为JL-2JL-1JL-4JL-3SH,诱导细胞免疫顺序依次为JL-4JL-2JL-1SHJL-3,初步确定各分离株免疫原性顺序为JL-2JL-4JL-1JL-3SH。     

1日龄火鸡新城疫Lasota苗免疫后免疫器官组织的免疫应答

1日龄火鸡用新城疫 Lasota 苗免疫后,在7,14,21,35日龄及攻毒后,检测了火鸡免疫器官组织法氏囊、胸腺、脾脏、盲肠扁桃体、哈德尔氏腺中浆细胞明显增多,机体体液免疫应答显著增强;胸腺、脾脏、盲肠扁桃体、哈德尔氏腺中 T_(ANAN)~+也明显增多,细胞免疫应答也显著增强。免疫后60天,用新城疫强毒攻击,免疫火鸡获得了良好的保护。     

皮下注射布氏菌活疫苗免疫持久性观察

以小鼠为动物模型,通过检测皮下注射布氏菌活疫苗后小鼠产生长期的体液免疫、细胞免疫应答及保护力,对其进行免疫学评价。将120只小鼠随机分为3组,皮下注射免疫布氏菌活疫苗,分别在免疫后1,3,6,12个月,采血分离血清及脾脏淋巴细胞。ELISA法检测免疫动物血清中抗Br-PPD Ig G抗体;ELISPOT法检测分泌IFN-γ、IL-4的脾脏淋巴细胞数目,以及用ELISA方法检测体外再刺激后小鼠脾细胞分泌细胞因子水平;用羊布氏菌弱毒株M5攻击免疫动物,通过脾脏细菌计数评价布氏菌活疫苗的免疫保护力。皮下注射免疫布氏菌活疫苗,免疫1,3,6和12个月,均能产生较强的体液免疫和细胞免疫应答,体液免疫、细胞免疫及保护力呈先增强后减弱趋势,免疫3个月效果最佳。通过皮下注射方式免疫小鼠布氏菌活疫苗显示了很好的免疫原性,免疫后能诱导长期的体液免疫、细胞免疫及保护力。     

火鸡新城疫免疫后局部免疫组织的免疫应答

本实验以Lasota疫苗点眼、滴鼻免疫21日龄火鸡,研究其盲肠扁桃体、哈德尔腺和支气管粘膜淋巴组织的免疫应答。结果如下:免疫火鸡上述局部免疫组织的浆细胞、酯酶阳性T细胞及淋巴细胞显著增多,巨噬细胞程度不等地增加;盲肠扁桃体淋巴小结增多、增大。这表明,免疫火鸡消化道和呼吸道局部免疫组织不仅体液免疫应答显著加强,而且细胞免疫反应也明显增强。NDD 强毒攻击后,免疫火鸡呼吸道和消化道局部免疫组织的体液免疫和细胞免疫水平进一步升高;对照火鸡则出现细胞免疫和体液免疫机能衰竭。     

鸡肾型传染性支气管炎(IB)疫苗的研制

用鸡传染性支气管炎病毒X株接种10日龄鸡胚尿囊腔,收集尿囊液,经甲醛灭活后,按一定的比例,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活苗,免疫鸡30d后,保护率达100％,并呈现良好的体液免疫应答,血凝抑制抗体效价达2     

鸡白细胞介素-18对H9亚型禽流感灭活油乳苗的免疫增强作用

[目的]探索鸡白细胞介素-18（IL-18）在H9禽流感（AI）灭活油乳苗免疫中的免疫佐剂作用.[方法]从鸡脾淋巴细胞中克隆鸡IL-18基因,亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1（＋）中,构建真核表达质粒pIL-18.将重组真核表达质粒pIL-18、H9亚型AI灭活油乳苗及其二者联合分别免疫14日龄SPF鸡,检测其细胞免疫和体液免疫水平,评价鸡IL-18在H9亚型禽流感灭活油乳苗中的免疫增强作用.[结果]成功克隆了鸡IL-18全基因,大小为597 bp.质粒pIL-18和H9亚型AI灭活油乳苗联合免疫的SPF鸡所产生的HI抗体效价在接种第4周后明显高于H9亚型AI灭活油乳苗免疫组;其T淋巴细胞的增殖反应也强于H9亚型AI灭活油乳苗免疫组.[结论]质粒pIL-18能提高H9亚型禽流感灭活油乳苗诱发的免疫应答,为研究防制禽流感的新型疫苗提供了新思路.     

囊提取物对产蛋鸡免疫增强作用的初步研究

按一定比例将SPF鸡法氏囊提取物加入ND油乳剂灭活疫苗 ,免疫接种 1 2 0日龄的产蛋鸡。试验发现 ,囊提取物试验组鸡的ND -HI抗体产生时间有所提前 ,试验组淋巴细胞数比免疫对照组高。结果表明 ,囊提取物能够促进产蛋鸡对ND灭活苗的早期体液免疫应答 ,增强鸡体的免疫功能     

猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选

为筛选猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂,将5种佐剂(聚合物佐剂、矿物油佐剂ISA 201 VG、蜂胶佐剂、弗氏佐剂、铝胶佐剂)分别与3株猪丹毒丝菌株(AEr21、AEr31和AEr32)制备成15种灭活疫苗,经物理性状检验、无菌检验、安全检验合格后分别免疫小鼠,应用ELISA方法检测小鼠血清中IgG抗体水平和细胞因子含量(IL-4、IL-10、TNF-β、IFN-γ、MCP-1)。通过腹腔注射和灌胃2种方式对免疫后小鼠进行攻毒,计算免疫保护率。结果显示,5种佐剂与3株猪丹毒丝菌株制备的灭活疫苗均可刺激小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫,矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组诱导小鼠产生的IgG抗体水平和细胞因子含量最高,与铝胶佐剂、弗氏佐剂疫苗免疫组差异显著(P<0.05),与聚合物佐剂、蜂胶佐剂疫苗免疫组差异不显著(P>0.05);矿物油佐剂ISA 201 VG疫苗免疫组在攻毒后的免疫保护率最高,对腹腔注射和灌胃攻毒小鼠的免疫保护率分别为80%、80%、60%和100%、100%、80%。试验结果表明,矿物油佐剂ISA 201 VG可作为猪丹毒丝菌灭活疫苗制备的候选免疫佐剂。     

NS复合乳酸菌制剂对母猪生产性能和免疫水平的影响

[目的],探讨微生态制剂NS复合乳酸菌对母猪的生产性能和部分免疫指标的影响。[方法]通过在母猪日粮中添加NS复合乳酸菌制剂,研究其对母猪生产性能、血清和初乳中的免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量以及T淋巴细胞亚群的影响。[结果]在母猪各阶段日粮中添加0.2%NS复合乳酸菌制剂后,哺乳仔猪平均21日龄断奶窝重和平均断奶窝重均显著提高,分娩时和分娩后30 d母猪血清与初乳中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM含量均显著提高,并且在初乳中的抗体滴度能维持在较高的水平。另外,在母猪日粮中添加0.2%NS复合乳酸菌制剂能显著提高CD3+和CD4+细胞亚群的百分比。[结论]NS复合乳酸菌制剂对提高母猪生产性能、加强机体体液免疫和促进细胞免疫具有良好的效果。     

Protection from genital herpes simplex virus type 2 infection by vaccination with cloned type 1 glycoprotein D

Guinea pigs were vaccinated with truncated herpes simplex virus type-1 (HSV-1) glycoprotein D produced in the genetically engineered mammalian cell line gD10.2. Vaccinated animals formed antibodies that neutralized both HSV-1 and herpes simplex virus type 2 (HSV-2) in an in vitro neutralization assay. Vaccinated animals were challenged with HSV-2 by intravaginal infection. Animals that received the immunogen in Freund's complete adjuvant were completely protected from the clinical manifestations of genital HSV-2 infection. Animals that received the immunogen incorporated in alum adjuvants were partly protected from clinical disease; the infections that did develop were significantly less severe than those that occurred in control animals injected with adjuvant alone. The results demonstrate that immunization with a purified viral protein can provide significant protection against primary genital infection by HSV-2 in guinea pigs.     

抗白色念球菌的复方"克清甲"软膏毒性研究

[目的]考察抗白色念球菌的复方＂克清甲＂软膏经皮给药及入眼对试验动物的安全性。[方法]采用健康家兔进行皮肤急性毒性试验、皮肤及眼刺激试验,用健康豚鼠进行主动皮肤过敏试验,并观察。[结果]复方＂克清甲＂软膏未产生急性毒性反应和眼刺激反应;对于家兔完整皮肤,单次和多次经皮给药均无刺激性,对破损皮肤有轻度刺激反应,但除去药物后这种刺激性消失;对健康豚鼠完整及破损皮肤均无致敏性。[结论]复方＂克清甲＂软膏是一种安全的外用制剂。     

CFNCpG对BVDV1灭活抗原的免疫佐剂效应研究

分别用CFNCpG、弗氏完全佐剂、氢氧化铝胶与BVDV1灭活抗原配制成疫苗免疫家兔,于免疫后每间隔7d检测中和抗体变化,来探讨CFNCpG对BVDV1灭活抗原的佐剂效应。试验结果表明,CFNCpG单独作为佐剂应用7d可使抗体滴度达到4.4(log_2SN_(50)),14d可达到7.0以上;与氢氧化铝胶联合可使抗体滴度在21d达到7.0以上,其佐剂水平与弗氏完全佐剂相当。有望进—步研制成为BVDV1灭活疫苗佐剂成分。     

猪口蹄疫病毒DNA疫苗与常规灭活苗的比较

以含有FMDV VPI基因和VPI基因主要抗原位点141—160及200—213位的氨基酸的真核表达质粒pcDNA-VPI和pcDNA-F与常规O型FMD灭活疫苗分别免疫6—8周龄的BALB／c小鼠和豚鼠，同时设生理盐水为阴性对照，以肌肉注射，间隔2周3次免疫的方式进行．通过脾脏T淋巴细胞增殖（MTT）、T淋巴细胞亚群、中和抗体、抗病毒能力的检测和病理组织学观察等方面比较DNA疫苗与常规灭活苗的免疫效果．结果发现pcDNA-VPI和pcDNA-F能够诱导细胞免疫和体液免疫反应，pcDNA-F可使小鼠和豚鼠产生一定程度的抗FMDV感染的保护性免疫，但与常规灭活苗比较还存在差异．     

奶牛乳腺炎分离细菌裂解苗免疫试验

应用自奶牛乳房炎检测为阳性的牛乳汁中分离的4种优势G+菌,分别与葡聚糖、油佐剂和FIA3种佐剂制成细菌裂解苗免疫家兔。于免疫后第7天开始,每隔7d采集心脏血,分离血清,以试管凝集试验检测血清中抗体效价,以此评价所分离细菌的免疫原性和所用佐剂的免疫促进作用,筛选适宜的佐剂。结果显示,所分离的优势G+菌刺激家兔机体后可产生高效价的抗体,免疫后第7天,抗体效价开始明显上升,第28天左右达到峰值,并一直持续到试验结束(63d)。比较3种佐剂的免疫促进效果,以FIA效果最好,但3种疫苗间的免疫效果差异不显著,而与对照组相比,差异均达极显著(P<0.01)。     

Sterility in female guinea pigs induced by injection with testis

Adult virgin female guinea pigs were injected with an emulsion of homologous adult testis and Freund's adjuvant before exposure to males. The fertility of this group was only 24 percent while the fertility of the control group was 84 percent. The testis-injected guinea pigs had also a high titer of antibodies against testis.     

Adjuvant Effects of Recombinant Plasmids of Porcine IL-4 and IFN-γ to Cysticercosis cellulosae Vaccines in Mice and Pigs

To investigate the adjuvant potential of porcine IL-4 and IFN-γ in mice and pigs, the genes of porcine IL-4 and IFN-γ were cloned and the recombinant mammalian expression plasmids were constructed for in vivo expression of the cytokines. Adjuvant effects of recombinant expression plasmids of IL-4 and IFN-γ （pcDNA-IL-4, pcDNA-IFN-γ） co-administrated with Cysticercus cellulosae crude antigen or TSOL18 recombinant protein antigen have been carried out in mice and pigs, respectively. We have demonstrated that recombinant plasmids of the cytokines as an adjuvant could induce stronger immune response in mice and pigs. With the C. cellulosae parasite antigen, porcine pcDNA-IL-4 induced higher specific antibody of immunized mice than pcDNA-IFN-γ. But pcDNA-IFN-γ is significantly stronger than that of no adjuvant or empty plasmids with the antigen control group. For the TSOL18 recombinant protein antigen vaccine, pcDNA-IL-4 still had a stronger ability to enhance specific antibody in swine than pcDNA-IFN-γ （P 〈 0.01）, but the immune protective rate was lower in challenged pigs （only 68.7%）. Although pcDNA-IFN-γ showed lower specific antibody, the protection rate was very high （91%） than other group （P 〈 0.01）. This study indicated that the recombinant expression plasmids of porcine IL-4 and IFN-γ display stronger adjuvant effects to C. cellulosae vaccine, further research should be carried out for understanding of the interaction mechanism.     

壳聚糖为递送载体的鸭肠炎病毒gC基因疫苗诱导Balb/c小鼠

  【目的】探讨壳聚糖对鸭肠炎病毒（duck enteritis virus, DEV）gC基因疫苗免疫反应的影响。【方法】应用壳聚糖作为DEV gC基因疫苗（pcDNA-DEV-gC）递送载体,采用肌肉注射和口服单次免疫Balb/c小鼠50µg剂量基因疫苗,并以肌注不同剂量裸质粒组、弱毒组和生理盐水组作为对照,分别检测不同疫苗免疫后的细胞、体液和黏膜免疫水平。【结果】肌注壳聚糖疫苗组诱导小鼠产生较肌注裸质粒50µg组和口服壳聚糖疫苗组高的细胞和体液免疫反应,且产生与弱毒疫苗相似的细胞免疫应答,但弱毒疫苗诱导体液免疫的能力更强,仅口服壳聚糖疫苗组产生粘膜免疫。【结论】上述研究结果表明壳聚糖具有一定的佐剂效应,为获得更有效的DEV gC基因疫苗提供了新策略,但该疫苗的推广应用还有待于对影响疫苗免疫效果的各因素进行进一步优化。