UPLC法同时测定烤烟中6种多酚的研究

为快速、准确地测定烟草中绿原酸、芸香苷和莨菪亭等多酚类化合物的含量,建立一种同时测定烤烟中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、莨菪亭、芸香苷和莰菲醇基-3-芸香糖苷的超高效液相色谱(UPLC)分析方法。采用HSS T_3高强度硅胶色谱柱(HSS,high strength silica),梯度洗脱。该试验方法的加标回收率在94.4%~106.8%,检出限为3.7~9.9μg/g,相对标准偏差0.9%~3.4%(n=5),标准溶液的相关系数均大于0.9995。采用该方法测定不同来源的18个烤烟样品,结果发现烤烟中6种多酚的含量从高到低依次为绿原酸、芸香苷、隐绿酸、新绿原酸、莰菲醇基-3-芸香糖苷、莨菪亭。与传统的高效液相色谱法(HPLC)相比,该试验方法简单,分析时间短,能够满足对烤烟中多酚含量的测定要求。     

植烟生态区、品种及其互作对烤烟多酚含量及品质的影响

为探究毕节烟区不同生态区（光照、降雨、温度等）对烤烟品种云烟105和云烟116多酚含量及品质的影响，采用二因素随机区组设计，分别在贵州省毕节地区威宁县和大方县植烟生态区种植云烟105和云烟116，并对中部烟叶多酚类物质及常规化学品质含量进行测定分析。结果表明，植烟生态区、品种及其互作对多酚含量的贡献不同，生态区对烤烟新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、莨菪亭、芸香苷及总酚的贡献率分别为22.68%、7.68%、9.67%、94.40%、9.48%和3.14%；品种的贡献率分别为68.53%、60.91%、82.39%、0.04%、63.10%和69.34%；生态区与品种互作的贡献率分别为8.79%、31.41%、7.94%、5.55%、27.42%和27.52%。云烟105在大方生态烟区的绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸和芸香苷含量更高，而云烟116在威宁生态烟区的莨菪亭含量更高。烟叶多酚含量与磷、钾、还原糖及总糖含量呈显著正相关关系，与烟碱含量呈显著负相关关系。综合烟叶多酚及化学成分来看，毕节新引进的品种云烟105和云烟116更适宜种植在大方地区，且云烟105表现优于云烟116。     

不同施氮水平下烤烟多酚含量与烤后烟叶化学指标关系研究

通过田间试验和化学分析等方法,研究不同施氮量对‘翠碧1号’烤烟多酚含量的影响及其与烟叶化学成分之间的关系。结果表明,不同施氮水平下,绿原酸和芸香苷占5种多酚类物质总量的77.77%~88.64%;随施氮量上升,烤后烟叶的绿原酸、4-o-咖啡奎尼酸、芸香苷、莨菪亭含量和5种多酚总量均表现为先明显下降再略有上升的趋势,新绿原酸含量表现为上升的趋势。5种多酚类物质含量及其总量随烟叶总氮和烟碱含量、还原糖/烟碱比值和总氮/烟碱比值的变化均呈二元二次曲线变化,相关关系显著或极显著。     

金银花不同花期有机酸、木犀草苷、花青素与抗氧化活性关系

应用高效液相色谱法(HPLC)确定不同花期金银花的多种有机酸、木犀草苷、花青素成分含量及不同花期间功效成分与抗氧化活性间关系.本研究采集山东平邑地区的7个花期的金银花样本,在中药制备基础上,通过HPLC的方法,完成了对新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、花青素的含量测定,通过自由基清除试验明确不同花期样本的抗氧化活性,并进行Pearson相关性分析.结果 表明:新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、木犀草苷的峰值含量分别为(12.23±0.95)、(82.54±4.83)、(55.74±3.75)、(2.97±0.87) mg/g,均出现在大白期;隐绿原酸、花青素的峰值含量分别为(3.84±1.20)、(0.63±0.04) mg/g,出现在二白期.大白期的自由基清除能力最高;经Pearson相关分析,金银花的绿原酸含量与DPPH、ABTS清除率间均存在显著正相关,新绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷含量与ABTS清除率间均存在显著正相关(r＞0,P＜0.05);花期与花青素含量、DPPH清除率呈显著负相关(r＜0,P＜0.05).本研究初步认为,不同花期所含的有机酸、木犀草苷、花青素含量存在差异,大白期的抗氧化活性更强,DPPH自由基清除能力与绿原酸含量有关,ABTS自由基清除能力与新绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷含量水平有关.     

HPLC同时测定花生壳中绿原酸3,4—二咖啡酰奎尼酸和木犀草素

建立了同时测定花生壳中绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸和木犀草素3种有效成分含量的反相高效液相色谱方法。采用Kromasil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),乙腈和0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长340 nm,柱温27℃。在该色谱条件下,绿原酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸和木犀草素的质量浓度分别为3.75~60μg/mL(R2=0.999 9),3.63~58.08μg/mL(R2=0.999 9),17.25~276μg/mL(R2=0.999 7)内与色谱峰面积呈现良好的线性关系,平均加标回收率(n=5)为121.6%,97.79%,124.35%,RSD分别为0.71%,1.49%,0.44%。该分析方法快速准确、重现性好,可应用于花生壳资源产业开发中质量标准的建立和完善。     

高效液相色谱-质谱法测定水中氯霉素效果分析

为建立水氯霉素残留检测方法,分析了高效液相色谱-质谱法测定水中氯霉素残留效果。结果表明高效液相色谱-质谱法测定水中氯霉素残留实验添加平均回收率为86.1%~92.1%,相对标准偏差(RSD,n=6)为3.41%~4.57%;相关系数为0.9982;方法检出限为6×10~(-3)μg·L~(-1),定量限为2×10~(-2)μg·L~(-1),说明具有快速、准确、灵敏度高等特点,适用于水中氯霉素残留检测检测分析。     

DABS-Cl柱前衍生-HPLC测定稻米中γ-氨基丁酸方法优化

建立4-二甲胺基苯基偶氮苯磺酰氯柱前衍生-高效液相色谱测定稻米γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。样品采用80%的乙醇溶液提取后,1.0mL样液依次加入0.20mL碳酸氢钠和0.40mL DABS-Cl在70℃下衍生20min,利用C18色谱柱,乙腈-三水合乙酸钠溶液作为流动相在436nm波长下测定GABA含量。结果显示：GABA在糙米和精米的添加回收率大于87.60%,相对标准偏差小于9.07%;GABA在1.0~100.0mg/L内具有良好的线性关系,相关系数为r=0.9995（n=3）。用本方法测定了14种糙米和精米样品的GABA,其含量为6.38~108.7mg/kg,湖南精米和糙米中的GABA含量最高。     

超高效液相-串联质谱法测定茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸残留

探讨一种超高效液相-串联质谱法测定茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸残留的测定方法,以期为建立茶叶中草铵膦、草甘膦及其代谢产物等农残检测方法的国家标准提供参考。茶样经超纯水、二氯甲烷提取和CAX萃取柱净化后,在硼酸盐缓冲液中与9-芴基甲基三氯甲烷(FMOC-Cl)进行衍生反应,衍生后产物在Waters HSS T3色谱柱上进行超高效液相色谱分离,质谱检测采用电喷雾正离子源、多反应离子监测模式。在0~100 ng/mL范围内,草铵膦、草甘膦和氨甲基膦酸均有良好的线性关系(R²>0.999);方法检出限为0.7 μg/kg;在不同茶类（乌龙茶、花茶、白茶）中添加浓度为2.0、4.0、10.0 μg/kg时,草甘膦的平均回收率为86.3%~100.2%,草铵膦的平均回收率为85.7%~101.5%,氨甲基膦酸的平均回收率为88.1%~98.4%;相对标准偏差(RSD)在1.1%~5.0%之间。该方法样品前处理简单,分析时间短,回收率和精密度等符合农药多残留检测技术的要求,适用于茶叶中草铵膦、草甘膦和氨甲基膦酸残留的同时检测。     

L-α-氨基酸-铜(Ⅱ)-邻菲咯啉型SOD模拟物活性及对玉米幼苗抗盐害作用的影响

[研究目的]试验旨在研究新型超氧化物歧化酶模拟化合物,这些模拟物具有较高的SOD活性且有助于提高作物抗逆作用.[方法]用改进的氯化硝基四氮唑蓝(NBT)光还原法测定了两个L-α-氨基酸-铜(Ⅱ)-邻菲咯啉型SOD模拟物[Cu(Phen)(L-Met)(H2O)]Cl·2H2O(1)和[Cu(Phcn)(L-Lcu)(H2O)]Cl·2.5H2O(1)(L-Met=L-蛋氨酸,L-Leu=L-亮氨酸,Phen=1,10-邻菲咯啉)催化歧化超氧阴离子自由基(O2·-)的活性并研究了模拟物在中度盐害的情况下对玉米幼苗抗盐害作用的影响.[结果]结果表明这些模拟物具有较高的SOD活性,在10-7～10-8mol/L1浓度范围内对NBT光还原速率均能达到50%以上的抑制率.在中度盐害的情况下,用这些模拟物对玉米浸种,八叶期后对幼苗的生理生化指标进行检测,发现生物量提高了31.95%～39.34%(鲜重)和32.12%～48.76%)(干重),叶绿素含量提高了3.25%～8.52%,体内SOD活性提高了37.78%～46.99%.[结论]这些SOD模拟物能有效抑制玉米幼苗所受的盐害胁迫作用.     

分散固相萃取-超高液相色谱/质谱测定水产品中磺胺类抗生素的残留量

为了更快、更准、更简易地测定水产品中磺胺类抗生素的残留量,建立了分散固相萃取(dSPE)-超高液相色谱/质谱(UPLC-MS/MS)测定水产品中磺胺类抗生素残留量的方法。实验主要比较了3种样品净化方法:分散固相萃取(dSPE)法、旋转蒸发浓缩法、国家标准净化方法。处理的水产样品,稀释后经UPLC-MS/MS进行检测分析。结果表明,分散固相萃取(dSPE)法对样品前处理比其他2种方法快速,精确,简易。经分散固相萃取(dSPE)法净化后的磺胺类药物在0.5~50μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9;仪器检出限为0.0007~0.002μg/L,方法的检出限为0.007~0.02μg/kg,定量限为0.02~0.08μg/kg。在水产品中的加标回收率为67.0%~173.5%,RSD为2%~24.5%。该方法实现了快速、简单、准确地测定水产品中磺胺类抗生素残留分析,为研究水产品中磺胺类抗生素残留快速准确检测的方法提供参考。     

基因型、施氮量及其互作对烤烟多酚类物质的影响

为探讨基因型、施氮量及其互作效应对烤烟多酚类物质含量的影响,采用二因素随机区组设计,以烤烟品种中烟100、云烟87和K326为材料,设置低氮（45kg/hm²）、中氮（60kg/hm²）和高氮（75kg/hm²）处理,研究其对烟叶中总酚、绿原酸、芸香苷和莨菪亭含量的影响。结果表明,基因型、施氮量及其互作效应对烤烟总酚、绿原酸、芸香苷和莨菪亭含量变异的贡献率不同,其中基因型对四者的贡献率分别为2.50%、5.13%、4.70%和15.95%,施氮量的贡献率分别为59.30%、42.55%、38.30%和67.79%,基因型与施氮量互作效应的贡献率分别为36.40%、51.20%、51.50%和15.03%。基因型与施氮量互作效应结果表明,高氮与中烟100互作条件下总酚、绿原酸和芸香苷含量较高,与K326互作时总酚和芸香苷含量较高,与云烟87互作时莨菪亭含量较高;中氮与云烟87互作时总酚、绿原酸和芸香苷含量较高,与K326互作时总酚、芸香苷和莨菪亭含量较高;低氮与云烟87互作时绿原酸含量较高。与种植品种相适应的施氮量是提高烟叶多酚类物质含量的重要措施。     

不同光温培养烟苗对浓香型初烤烟叶香气物质的影响

为探明不同光温培养烟苗对浓香型初烤烟叶香气前体物和香气物质的影响,以苗期进行不同光温处理的浏阳烟区C3F初烤烟叶为材料,进行了类胡萝卜素、绿原酸、芸香苷、非挥发性有机酸、中性香气物质的比较分析。结果表明,烤房光环境处理的类胡萝卜素、绿原酸和芸香苷含量最高,而对照处理的绿原酸和芸香苷高于大棚增温不补光处理;大棚增温补光处理的非挥发性有机酸总量最高,苹果酸亦最高,而烤房光环境处理总量最低,却柠檬酸最高;叶绿素降解产物和类胡萝卜素降解产物各处理差异很大,其他降解产物差异不明显,新植二烯以烤房光环境处理最高,类胡萝卜素降解产物以大棚增温补光处理最高,从香气物质来看,苗期大棚增温补光最有利于改善初烤烟叶的香气品质。     

低次烟叶中绿原酸与芸香苷提取工艺的研究

旨在获得合适的绿原酸与芸香苷提取工艺，提高低次烟叶的经济附加值。笔者采用单因素试验和响应面设计，高效液相色谱法检测提取量，选择乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度4个因素优化提取工艺。结果表明，绿原酸与芸香苷最佳提取工艺条件为：乙醇浓度67%，料液比1:16 (g:mL)，提取温度61℃，提取时间150 min。此条件下，绿原酸与芸香苷理论提取量之和为43.59 mg/g，相对误差0.36%。使用Design-Expert 软件对4 个因素进行分析，其影响大小顺序依次为：乙醇浓度>提取时间>料液比>提取温度。本研究获得了从低次烟叶中提取绿原酸与芸香苷的工艺条件，为更好利用低次烟叶提供了新思路。     

物理气调法片烟养护及醇化效果研究

为进一步加深对物理气调法的了解,研究了物理气调法片烟养护效果及片烟醇化品质随时间的变化规律。结果表明,物理气调法能使堆垛内氧气浓度稳定保持在适宜片烟醇化范围内。使用物理气调法时,堆垛内相对湿度对外界湿度条件的敏感性较低,有利于在高湿条件下防止烟叶受潮霉变。在12个月的醇化周期内,片烟绿原酸、芸香苷、叶黄素和β-胡萝卜素等香气前体物含量呈氧化分解下降趋势,片烟的醇化过程朝着改善品质的方向进行。物理气调法经低氧处理再将氧气浓度回调至15%~21%的处理片烟感官品质最佳;与化学气调法相比,物理气调法更有利于提升片烟醇化质量。     

不同烤烟品种香型风格与多酚类物质含量差异分析

应用高效液相色谱法（HPLC）分析测定红塔集团大理差异化原料基地5个主要栽培烤烟品种烟叶中6种主要多酚物质,通过对香型风格进行量化赋分,研究分析不同品种的香型风格与多酚类化合物含量之间的关系。结果表明,绿原酸和芸香苷占烤烟多酚类物质的92%以上,是主要的多酚类物质;不同部位与不同品种烟叶间的多酚含量均存在较明显差异;不同品种的清香型风格显著性与烟叶中的多酚类物质含量之间呈显著正相关;‘红大’的多酚总含量明显高于其他4个品种,清香型风格更显著。     

梨实生树不同节位酚类物质含量的动态变化

利用高效液相色谱检测京白梨 ╳ 鸭梨杂种实生树的叶片、韧皮部和芽中的多酚类物质的含量,结果表明,叶片中的槲皮素、儿茶素、绿原酸和芦丁含量在86-90节迅速升高,在86-90节以下,槲皮素和儿茶素含量变化不大,绿原酸含量持续下降,芦丁在51-55节出现一个含量高峰;韧皮部中的根皮苷和杨梅苷在66-70节均出现一个含量高峰,在86-90节以上,根皮苷的含量趋于平稳,杨梅苷的含量迅速升高;芽中的咖啡酸含量在81-85节以下变化不大,81-85节以上迅速升高。     

云南与津巴布韦烤烟致香物质含量差异研究

【研究目的】为明确云南与津巴布韦烤烟在致香物质方面的差距，指导云南部分替代进口烤烟的研究和生产，提高烟叶质量，特进行此项试验。【方法】采用比色法测定了烟叶多酚总量，索式提取法测定石油醚提取物，硫酸甲酯、三氯甲烷萃取法测定多元酸和高级脂肪酸，水蒸汽-二氯甲烷同时蒸馏萃取、GC/MS-内标定量检测挥发性香气物质；并分类分析比较了云南与津巴布韦烤烟的多酚总量、石油醚提取物、多元酸、高级脂肪酸及挥发性香气物质等烟草致香物质含量的差异。【结果】结果表明云南烤烟各部位烟叶的石油醚提取物、芳香氨基酸降解的香气物质超过津巴布韦烤烟，多酚、高级脂肪酸则低于津巴布韦烤烟；上部烟叶的西柏烷类香气物质高于津巴布韦烤烟，多元酸、类胡萝卜素降解的香气物质、梅拉德反应的香气物质则低于津巴布韦烤烟；中部和下部烟叶的多元酸、类胡萝卜素降解的香气物质、梅拉德反应的香气物质高于津巴布韦烤烟，而西柏烷类香气物质则低于津巴布韦烤烟。云南与津巴布韦烤烟在致香物质方面的差距，主要表现在上部烟叶的柠檬酸、油酸、巨豆三烯酮、金合欢基丙酮、β-二氢大马酮、二氢猕猴桃内酯、糠醇、糠醛等致香物质含量低于津巴布韦烟叶。【结论】云南与津巴布韦烤烟的致香物质差异比较明显，上部烟叶致香物质含量明显不如津巴布韦。     

海藻酸和磷酸二氢钾对烟草花期和烟叶品质的影响差异

为探讨高海拔烟区在植烟期易发生冷害、导致烟草早花的问题,采用抗冷剂海藻酸和磷酸二氢钾处理烟苗,对烟草的现蕾时间、烟叶品质和产量进行了研究。结果表明：喷施海藻酸可延迟现蕾期约8天;磷酸二氢钾最多延迟现蕾期5天。喷施海藻酸和磷酸二氢钾对烤烟致香成分的总量影响不大。但在产量方面,海藻酸处理获得了2100 kg/hm2的最优产量,比对照增产16.67%;中上等烟比率占97.80%,高于对照3.7个百分点。