UPLC法同时测定烤烟中的新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、莨菪亭、芸香苷和莰菲醇基-3-芸香糖苷

[目的]为了快速、准确地测定烟草中绿原酸、芸香苷和莨菪亭等多酚类化合物的含量,[方法]建立了一种同时测定了烤烟中的新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、莨菪亭、芸香苷和莰菲醇基-3-芸香糖苷的超高效液相色谱(UPLC)分析方法。方法采用HSS T3高强度硅胶色谱柱(HSS: High Strength Silica),梯度洗脱。[结果]实验方法的加标回收率在94.4 ~ 106.8%之间,检出限为3.7 ~ 9.9 μg/g,相对标准偏差0.9 ~ 3.4%(n=5),标准溶液的相关系数均大于0.9995。采用实验方法测定了不同来源的18个烤烟样品,结果发现烤烟中6种多酚的含量从高到低依次为绿原酸＞芸香苷＞隐绿酸＞新绿原酸＞莰菲醇基-3-芸香糖苷＞莨菪亭。[结论]与传统的高效液相色谱法(HPLC)相比,实验方法简单,分析时间短,能够满足对烤烟中多酚含量的测定要求。     

不同施氮水平下烤烟多酚含量与烤后烟叶化学指标关系研究

通过田间试验和化学分析等方法,研究不同施氮量对‘翠碧1号’烤烟多酚含量的影响及其与烟叶化学成分之间的关系。结果表明,不同施氮水平下,绿原酸和芸香苷占5种多酚类物质总量的77.77%~88.64%;随施氮量上升,烤后烟叶的绿原酸、4-o-咖啡奎尼酸、芸香苷、莨菪亭含量和5种多酚总量均表现为先明显下降再略有上升的趋势,新绿原酸含量表现为上升的趋势。5种多酚类物质含量及其总量随烟叶总氮和烟碱含量、还原糖/烟碱比值和总氮/烟碱比值的变化均呈二元二次曲线变化,相关关系显著或极显著。     

植烟生态区、品种及其互作对烤烟多酚含量及品质的影响

为探究毕节烟区不同生态区（光照、降雨、温度等）对烤烟品种云烟105和云烟116多酚含量及品质的影响，采用二因素随机区组设计，分别在贵州省毕节地区威宁县和大方县植烟生态区种植云烟105和云烟116，并对中部烟叶多酚类物质及常规化学品质含量进行测定分析。结果表明，植烟生态区、品种及其互作对多酚含量的贡献不同，生态区对烤烟新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、莨菪亭、芸香苷及总酚的贡献率分别为22.68%、7.68%、9.67%、94.40%、9.48%和3.14%；品种的贡献率分别为68.53%、60.91%、82.39%、0.04%、63.10%和69.34%；生态区与品种互作的贡献率分别为8.79%、31.41%、7.94%、5.55%、27.42%和27.52%。云烟105在大方生态烟区的绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸和芸香苷含量更高，而云烟116在威宁生态烟区的莨菪亭含量更高。烟叶多酚含量与磷、钾、还原糖及总糖含量呈显著正相关关系，与烟碱含量呈显著负相关关系。综合烟叶多酚及化学成分来看，毕节新引进的品种云烟105和云烟116更适宜种植在大方地区，且云烟105表现优于云烟116。     

基因型、施氮量及其互作对烤烟多酚类物质的影响

为探讨基因型、施氮量及其互作效应对烤烟多酚类物质含量的影响,采用二因素随机区组设计,以烤烟品种中烟100、云烟87和K326为材料,设置低氮（45kg/hm²）、中氮（60kg/hm²）和高氮（75kg/hm²）处理,研究其对烟叶中总酚、绿原酸、芸香苷和莨菪亭含量的影响。结果表明,基因型、施氮量及其互作效应对烤烟总酚、绿原酸、芸香苷和莨菪亭含量变异的贡献率不同,其中基因型对四者的贡献率分别为2.50%、5.13%、4.70%和15.95%,施氮量的贡献率分别为59.30%、42.55%、38.30%和67.79%,基因型与施氮量互作效应的贡献率分别为36.40%、51.20%、51.50%和15.03%。基因型与施氮量互作效应结果表明,高氮与中烟100互作条件下总酚、绿原酸和芸香苷含量较高,与K326互作时总酚和芸香苷含量较高,与云烟87互作时莨菪亭含量较高;中氮与云烟87互作时总酚、绿原酸和芸香苷含量较高,与K326互作时总酚、芸香苷和莨菪亭含量较高;低氮与云烟87互作时绿原酸含量较高。与种植品种相适应的施氮量是提高烟叶多酚类物质含量的重要措施。     

不同烤烟品种香型风格与多酚类物质含量差异分析

应用高效液相色谱法（HPLC）分析测定红塔集团大理差异化原料基地5个主要栽培烤烟品种烟叶中6种主要多酚物质,通过对香型风格进行量化赋分,研究分析不同品种的香型风格与多酚类化合物含量之间的关系。结果表明,绿原酸和芸香苷占烤烟多酚类物质的92%以上,是主要的多酚类物质;不同部位与不同品种烟叶间的多酚含量均存在较明显差异;不同品种的清香型风格显著性与烟叶中的多酚类物质含量之间呈显著正相关;‘红大’的多酚总含量明显高于其他4个品种,清香型风格更显著。     

烤烟物理特性与主要化学类物质成分的秩相关分析

为研究烤烟烟叶物理特性与化学类成分的定量关系,并为客观评价烟叶质量提供理论依据,对2012年的205个烤烟烟叶的物理特性和主要化学类成分含量进行检测鉴定,并进行了秩相关与2尾检验。结果表明:在所考察的7项物理特性(叶片厚度、叶面密度、含梗率、平衡含水率、伸长率、填充值和拉力)指标中,变异从大到小的排序为:伸张率拉力叶面密度厚度含梗率平衡含水率填充值;4项化学成分指标(总氮、淀粉、石油醚和钾含量)变异从大到小的排序为:淀粉钾石油醚总氮。随着烟叶部位的增高,烟叶的厚度、叶面密度和拉力增大,而含梗率和填充值逐渐减小。5个省份烤烟的矿质元素、多酚类物质含量差异明显。5大省份应该补充锰、铁、镁肥,重金属含量总体不超标。河南烤烟的总绿原酸、多酚总量相对较高;云南烤烟的莨菪亭、芸香苷、山奈酚糖苷含量相对较高,湖北总绿原酸最低;辽宁山奈酚糖苷、多酚总量较高。烟叶物理特性与各项化学成分微量元素、重金属、多酚类物质之间存在着完全相关、正相关、负相关回归关系。具体表现为,烟叶叶片厚度、含梗率、叶面密度、填充值这4项指标与化学类物质关联度最高。     

朝鲜蓟加工品中多酚含量研究

为研究分析不同产地朝鲜蓟罐头食品中多酚种类、含量的差异,应用液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱方法(LC-MS/MS)进行检测,样品在避光条件下经70%的甲醇水溶液室温震荡提取1 h后,进行液相色谱-质谱分析。采用Agilent proshell 120 EC-C18色谱柱,流动相A为0.1%乙酸-水,流动相B为乙腈,采用线性梯度洗脱。结果表明,此方法共定性定量出朝鲜蓟罐头中17种多酚物质,同一样品中不同多酚含量差异显著,绿原酸含量最高为625.701 μg/g,洋蓟素的含量次之,平均值为315.823 μg/g;按照不同地区多酚含量比较,亚洲样品中,多酚含量普遍偏低。由此得出,应用LC-MS/MS可以快速高效检测出朝鲜蓟罐头食品中多酚含量,多酚含量因产地不同差异显著。     

NtMYB4a基因对烟草多酚类物质合成的影响

为了解NtMYB4a基因的表达是否与烟草多酚化合物的合成有关,本研究以NtMYB4a过表达和CRISPR/Cas9敲除植株及其野生型植株为试验材料,采用实时荧光定量PCR技术分析NtMYB4a和多酚物质合成相关酶基因PAL、C4H、4CL、HCT的表达,使用HPLC方法测定烟叶中绿原酸、芦丁等8种多酚物质的含量,并进行相关性分析。结果表明,过表达NtMYB4a植株中,除花中的C4H外,茎、叶、花中PAL、C4H、4CL和HCT的表达量均极显著高于野生型,烟株茎、叶、花中绿原酸含量也显著增加;敲除NtMYB4a使烟株花、茎和叶中PAL、C4H、4CL和HCT的表达均下调,其中茎中PAL、HCT的表达极显著下调,使叶和花中的绿原酸、芦丁、槲皮素、莨菪亭含量均显著降低,茎中芦丁含量则显著增加,而山奈酚、芥子酸、对香豆酸和咖啡酸含量无显著性变化;NtMYB4a的表达量与绿原酸含量呈极显著正相关关系,与芦丁、莨菪亭、山奈酚、芥子酸、槲皮素、对香豆酸、咖啡酸含量无显著相关性。因此,NtMYB4基因对烟草绿原酸合成相关酶基因表达及绿原酸合成具有调控作用。本研究结果为进一步阐明烟叶中绿原酸形成的分子机制提供理论依据。     

不同荞麦品种主要功能成分分析及评价

采用高效液相色谱法同时测定了48份来自不同产地的荞麦品种(系)种子中的粗多糖、芦丁、槲皮素、山奈酚、山奈酚-3-O-芸香糖苷5种主要功能成分含量。结果显示,不同产地、类型的荞麦品种,功能成分含量存在差异。荞麦的芦丁含量最丰富,平均含量达3.80 g·kg^-1。苦荞种子的粗多糖、芦丁、槲皮素、山奈酚、山奈酚-3-O-芸香糖苷的平均含量均远远高于甜荞,分别是甜荞的1.99、30.27、76.05、19.02、35.56倍,以上5种功能成分含量最高的品种(系)均来自贵州省的苦荞。     

百蕊草药材中5种黄酮类化学成分的含量测定

为了揭示野生与人工栽培百蕊草5种黄酮类化学成分含量的差异,本研究采用液相色谱分析方法测定百蕊草中百蕊草素Ⅰ、山奈酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、山奈酚-7-O-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量.结果 表明百蕊草素Ⅰ、山奈酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、山奈酚-7-O-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D...     

寒地苹果地方品种果实多酚组分及其构成差异

利用超高效液相色谱(UPLC)技术对12份黑龙江苹果地方品种果实果皮和果肉多酚组成和含量进行测定,研究不同品种多酚组成和含量特性的差异,并进行主因子分析和聚类分析.结果 表明:在12份地方品种中检测到5类20种多酚类物质,果皮主要酚类物质为表儿茶素和儿茶素,果肉主要酚类物质为绿原酸、儿茶素和原花青素.不同品种间多酚组成和含量存在显著差异,变异系数最小的为槲皮素3-葡萄糖苷(37.48％),变异系数最大的为芦丁(267.18％).通过主成分分析发现果皮和果肉当中原花青素含量均较高.以多酚组分含量为依据分别进行聚类,发现果肉对多酚聚类的结果与田间表型鉴定结果和亲缘关系更相符.研究结果为黑龙江地方品种酚类物质加工利用及选育品种提供数据支持和理论依据.     

乙烯利对红掌佛焰苞花青素和总黄酮含量的影响

为了研究乙烯利对红掌花色的影响及调控,采用高效液相色谱(HPLC)直接进样、梯度洗脱的分析方法,测定5个不同乙烯利浓度处理对红掌佛焰苞的花青素和总黄酮含量的变化。结果表明,红掌 “亚利桑那”花青素主要成分是矢车菊素-3-芸香糖苷。乙烯利处理诱导花青素和总黄酮含量的积累,浓度600 mg/L处理效果最佳,花青素和总黄酮含量提前在展开期出现最高峰,而对照在盛花期才出现高峰,峰值为3496.7581 μg/g和5088.3177 μg/g,比对照峰值分别高出56.9%和59.0%。     

高效液相色谱法测定蜂胶中的六种黄酮

采用甲醇-水提取液体系提取蜂胶中的6种黄酮,即芦丁、莰菲醇、芹菜素、松属素、苛因和高良姜素,以高效液相色谱法-紫外检测法测定,对不同比例的甲醇-水溶液对蜂胶中黄酮类物质的提取率进行研究。结果发现,以60%甲醇-水为提取液提取效果较好,空白加标回收率均在85%～99%,检出限为0.1 g/kg,定量限为0.3 g/kg,线性范围为0.2～50μg/mL。     

苹果浓缩汁中多酚物质的高效液相指纹图谱研究

通过优化多酚检测条件,分析不同来源苹果浓缩汁中多酚的种类与含量,建立苹果汁多酚的高效液相(HPLC)指纹图谱,以控制苹果多酚的质量及鉴别苹果汁产品的真伪。试验以苹果浓缩汁为样品,采用Welchrom C18色谱柱,在检测波长280 nm,柱温30℃,进样量20 μL,流动相0.3%三氟乙酸水溶液和甲醇（流速1 mL/min）以及梯度洗脱的条件下,标定了12个共有指纹峰,测定出10个不同来源苹果浓缩汁多酚的指纹相似度均在0.900以上,多酚含量为5559~7971 μg/mL。研究初步建立了苹果汁多酚的高效液相指纹图谱。该方法可为苹果加工企业进行苹果多酚的定性、定量分析及质量控制提供理论依据。     

高效液相色谱-质谱法测定水中氯霉素效果分析

为建立水氯霉素残留检测方法,分析了高效液相色谱-质谱法测定水中氯霉素残留效果。结果表明高效液相色谱-质谱法测定水中氯霉素残留实验添加平均回收率为86.1%~92.1%,相对标准偏差(RSD,n=6)为3.41%~4.57%;相关系数为0.9982;方法检出限为6×10~(-3)μg·L~(-1),定量限为2×10~(-2)μg·L~(-1),说明具有快速、准确、灵敏度高等特点,适用于水中氯霉素残留检测检测分析。     

软儿梨冷冻贮藏过程酚类物质与多酚氧化酶的区域化分布

为研究冷冻贮藏中不同部位酚类物质和多酚氧化酶的分布特征,以青海省地方梨优良品种‘软儿梨’果实为研究材料,采用高效液相色谱法和比色法测定软儿梨果实后熟(室温)、冻藏(-18℃)和解冻(室温)3个时期的果皮、果肉中总多酚、绿原酸的含量和多酚氧化酶活性。结果表明:软儿梨果实后熟后,酚类物质果肉?果皮,多酚氧化酶则果皮?果肉;冷冻贮藏过程中,不同部位的酚类物质和多酚氧化酶均呈现不同程度的升高,但绿原酸在果皮急剧下降、果肉中略有增加。解冻后总体呈下降趋势,2个部位总酚、多酚氧化酶下降明显,而果皮中的绿原酸变化不大。研究表明:软儿梨果实后熟后,酚类物质和多酚氧化酶分布呈现区域化,冷冻贮藏加剧了酚类物质和多酚氧化酶活性的积累,导致了软儿梨冷冻贮藏后果皮先于果肉发生了褐变。     

金银花不同花期有机酸、木犀草苷、花青素与抗氧化活性关系

应用高效液相色谱法(HPLC)确定不同花期金银花的多种有机酸、木犀草苷、花青素成分含量及不同花期间功效成分与抗氧化活性间关系.本研究采集山东平邑地区的7个花期的金银花样本,在中药制备基础上,通过HPLC的方法,完成了对新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、花青素的含量测定,通过自由基清除试验明确不同花期样本的抗氧化活性,并进行Pearson相关性分析.结果 表明:新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、木犀草苷的峰值含量分别为(12.23±0.95)、(82.54±4.83)、(55.74±3.75)、(2.97±0.87) mg/g,均出现在大白期;隐绿原酸、花青素的峰值含量分别为(3.84±1.20)、(0.63±0.04) mg/g,出现在二白期.大白期的自由基清除能力最高;经Pearson相关分析,金银花的绿原酸含量与DPPH、ABTS清除率间均存在显著正相关,新绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷含量与ABTS清除率间均存在显著正相关(r＞0,P＜0.05);花期与花青素含量、DPPH清除率呈显著负相关(r＜0,P＜0.05).本研究初步认为,不同花期所含的有机酸、木犀草苷、花青素含量存在差异,大白期的抗氧化活性更强,DPPH自由基清除能力与绿原酸含量有关,ABTS自由基清除能力与新绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷含量水平有关.     

HPLC法测定洋蓟茎叶提取物中绿原酸与洋蓟素的含量

建立了测定洋蓟提取物中绿原酸与洋蓟素含量的高效液相色谱法。采用高效液相色谱法,色谱柱C-18(150mm×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈,B为0.2%磷酸水,采用梯度洗脱30min,乙腈与磷酸水体积比从5∶95至50∶50;检测波长为330nm;流速:1mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL。结果表明,绿原酸为0.13～0.66μg,线性关系良好,洋蓟素为0.12～0.62μg,线性关系良好,相关线性系数均为R=0.9999,绿原酸平均回收率为99.6%,RSD为0.41%;洋蓟素平均回收率为99.4%,RSD为0.31%;绿原酸与洋蓟素峰的理论塔板数均大于10000。该方法操作简单、准确、重复性好,适用于洋蓟茎叶提取物中绿原酸与洋蓟素含量的测定。     

石榴果实花青苷差异性分析

为了探讨石榴果实中花青苷的种类及果皮和果肉间的差异,采用高效液相色谱-光电二极管阵列检测器联用技术(HPLC-PAD)和高效液相色谱-电喷雾离子化-多级质谱联用技术(HPLC-ESI-MSn),进行花青苷的定性及定量分析。结果发现,从11份不同产地观赏或食用石榴的果皮和果肉中,在525 nm共检测出10种花青苷成分,其中飞燕草素3-戊糖苷(Dp-3-pentoside)和芍药花素3-己糖苷(Pn-3-hexoside)首次从石榴果实中检测到。果皮和果肉中总花青苷含量无相关性,且种类也不完全相同。从检测的几种材料中发现,观赏石榴果皮中花青苷含量高于果肉,而食用品种果肉中的含量高于果皮。     

超高效液相-串联质谱法测定茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸残留

探讨一种超高效液相-串联质谱法测定茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸残留的测定方法,以期为建立茶叶中草铵膦、草甘膦及其代谢产物等农残检测方法的国家标准提供参考。茶样经超纯水、二氯甲烷提取和CAX萃取柱净化后,在硼酸盐缓冲液中与9-芴基甲基三氯甲烷(FMOC-Cl)进行衍生反应,衍生后产物在Waters HSS T3色谱柱上进行超高效液相色谱分离,质谱检测采用电喷雾正离子源、多反应离子监测模式。在0~100 ng/mL范围内,草铵膦、草甘膦和氨甲基膦酸均有良好的线性关系(R²>0.999);方法检出限为0.7 μg/kg;在不同茶类（乌龙茶、花茶、白茶）中添加浓度为2.0、4.0、10.0 μg/kg时,草甘膦的平均回收率为86.3%~100.2%,草铵膦的平均回收率为85.7%~101.5%,氨甲基膦酸的平均回收率为88.1%~98.4%;相对标准偏差(RSD)在1.1%~5.0%之间。该方法样品前处理简单,分析时间短,回收率和精密度等符合农药多残留检测技术的要求,适用于茶叶中草铵膦、草甘膦和氨甲基膦酸残留的同时检测。