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相似文献
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1.
以30%~60%硫酸铵饱和度分级沉淀、DEAE SepharoseCL-6B、SephadexG-200、Phenyl SepharoseCL-4B和羟基磷灰石层析纯化了小麦5-氨基酮戊酸脱水酶(ALAD),其在pH8.5时比活为31U.mg^-1蛋白;酶纯化了91倍,得率5%,酶亚基分子质量约52ku,全酶分子质量约330ku,表明酶由6个亚基组成;酶的等电点为4.8,在400nm有吸收峰,最适反应温度45℃,Mg^3+激活酶,Zn^  相似文献   

2.
人工感染RHDV-NJ株病死兔肝经-50℃反复冻融,氯仿处理,PEG沉淀、差速离心,Sepharose-4B柱层析得纯化病毒,纯化RHDV经SDS-PAGE、CuCl2负染色后,切取主要结构多肽VP1(64.5KD)凝胶带,除去CuCl2和SDS获得VP1,高效液相色谱鉴定只有一个蛋白峰,Western-Blotting,HA和HI结果显示纯化VP1具有良好的抗原表位稳定性。无母源抗体的3月龄兔1  相似文献   

3.
鱼类RAPD的影响因素及其最优反应体系的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
在研究白鲢/团头鲂遗传图谱时,对RAPD反应中的模板浓度,引物浓度、dNTPs浓度,镁离子浓度等反应结果的因素进行了系统分析,并在此基础上建立了适于实验室RAPD研究的最佳反应体系:25μL反应体系中,含10mmol/L Tris-HCl(pH8.0),10mmol/L 、8mmol/L (NH4)2SO4,2mmol/L MgCl2、0.05% NP-40、0.2mmol/L dNTP,15ng  相似文献   

4.
依次采用DEAE-纤维素、肝素-Sepharose,酷蛋白-Sepharose和羟基磷灰石层析将大鼠酷蛋白激酶Ⅱ纯化了2486倍,回收率9.5%。SDS-PAGE表明CKⅡ由三个不同亚基组成,分子量分别是37,35和26KD。该激酶利用酷蛋白为底物,Ca^2+,Ca^2+-磷脂酰丝氨酸的cAMP对CKⅡ的活性无影响,而肝素对该酶的活性有抑制作用。  相似文献   

5.
催化光度法测定痕量α-萘酚   总被引:1,自引:0,他引:1  
研究了α-萘酚对碘催化硫酸铈与亚砷酸氧化还原反应的抑制作用及其动力学条件。在此基础上建立了催化动力学光度法测定α-萘酚的新方法。研究结果表明,在0.36mol/L H2SO4,0.001mol/LCe(SO4)2,0.00125mol/LAs2O3,0.025g/LNaCl和0.01mg/LI-溶液中测定α-萘酚,其线性范围为0.20~2.3mg/L,表观摩尔吸光系数为2.50×104L·mol(-1)·cm(-1),灵敏度Sandell为5.77μg/cm2。  相似文献   

6.
花生幼苗内精氨酸脱羧酶的初步研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
花生体内控制多胺生物合成的主要酶是ADC,主要定位于代谢活跃的分生组织内。部分纯化(13倍)的酶最适底物是L-Arg,Km值和Vmax依次为0.56mmol/L、0.66μlCO2/mg protein.min。反应最适pH和温度为8 ̄8.5和40 ̄45℃。该酶对热、乙醇、脲稳定性差。0.8mmol/L PLP(磷酸吡哆醛)可提高酶活性21%,DTT(二硫苏糖醇)、ME(颈基乙醇)提高酶的稳定性,  相似文献   

7.
依次采用DEAE-纤维素、肝素-Sepharose,酪蛋白-Sepharose和羟基磷灰石层析将大鼠酪蛋白激酶Ⅱ纯化了2486倍,回收率9.5%。SDS-PAGE表明CKⅡ由三个不同亚基组成,分子量分别是37,35和26KD。该激酶利用酪蛋白为底物,Ca~(2+),Ca~(2+)-磷脂酰丝氨酸和cAMP对CKⅡ的活性无影响,而肝素对该酶的活性有抑制作用。  相似文献   

8.
家兔RAPD分析反应体系的优化   总被引:3,自引:0,他引:3  
《山东农业科学》1999,(5):15-17
以家兔的基因组DNA 为模板,研究影响家兔RAPD 扩增的因素。实验结果表明,Taq酶、随机引物和Mg2 + 浓度及模板DNA 的纯度对RAPD 扩增影响较大。本实验建立了适于家兔RAPD 分析的反应体系:反应体积为20μl,其中含有1 ×扩增缓冲液,2 .0m mol/L MgCl2 ,0 .1m mol/LdNTP,0-2μmol/L 随机引物,1 .5UTaq 酶,90ng 模板DNA  相似文献   

9.
研究了在硫酸环境中8-羟基喹啉对碘催化亚砷酸与硫酸铈氧化还原反应的抑制作用及其动力学条件。据此建立了动力学的直接光度法测定痕量8-羟基喹啉的新方法。结果表明,在0225mol/LH2SO4,000125mol/LAs2O3,0001mol/LCe(SO4)2,001mg/LI,05g/LNaCl环境中测定8-羟基喹啉,其线性范围为0020~027mg/L,表观摩尔吸光系数为27×105L·mol1·cm1,Sandel灵敏度为0538μg/cm2。用本法对药物硫酸羟基喹啉钾中的8-羟基喹啉含量的测定,结果满意。  相似文献   

10.
家猪随机扩增多态DNA最佳反应体系的探讨   总被引:6,自引:1,他引:5  
在研究江西方猪种的遗传多样性及其系统分类时,对模板浓度和纯度,引物种类和浓度、dNTP浓度,镁离子浓度,温度转换时间及双引物扩增等影响RAPD分析的因素进行了系统的探讨,在此基础上建立了适宜于本实验室研究的最佳RAPD技术体系:20μL反应体系中,含10mmol/LTris-HCl,pH8.3,50mmol/LKCl,2.5mmol/LMgCl2,0.2mmol/LdNTP,0.45μmol/L随  相似文献   

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