高效液相色谱法测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留量前处理方法的优化

建立了鸡蛋中环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星4种氟喹诺酮类药物残留测定的超高效液相色谱方法。样品经磷酸盐缓冲液提取后,用正己烷脱脂,C18固相萃取柱净化,反相高效液相色谱分离,荧光检测器测定。本方法的检测限为环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星5 μg/kg,达氟沙星1 μg/kg。环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星在2~200 ng/mL、达氟沙星在0.4～40 ng/mL范围内呈线性相关,相关系数r大于0.9999。在空白鸡蛋中添加环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星5~50 μg/kg、达氟沙星1～10 μg/kg,4种氟喹诺酮类药物的平均回收率为82.2～101.3％,批内变异系数0.8～5.9％之间(n＝6),批间变异系数在1.0～6.6％之间(n＝4)。结果表明,该法灵敏、准确、特异性强,适用于鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留的测定。     

畜禽粪污中7种磺胺类和8种氟喹诺酮类兽药残留UPLC-MS/MS检测方法研究

对猪、鸡、牛、羊粪污中同时测定7种磺胺类和8种氟喹诺酮类兽药残留的超高效液相色谱-串联质谱方法进行了研究。样品采用2%氨化乙腈+0.1 mol/L 氢氧化钠溶液（50:50,V/V）提取,提取液浓缩后用磷酸盐缓冲液溶解,HLB 固相萃取小柱净化,浓缩富集后用乙腈：0.1%甲酸水溶液（20:80,V/V）复溶,过0.22 μm微孔滤膜,上机,基质加标液外标法定量。结果显示,猪、鸡、牛、羊粪污中15种兽药浓度在1~100 μg/mL范围内线性关系良好（R2>0.994）。方法的检出限为20.0 μg/kg,定量限为50.0 μg/kg。在50、100、500 μg/kg三个添加浓度下,15种兽药平均回收率为60.5 %~115.5 %,批内RSD为1.2 %~17.6 %,批间RSD为0.2 %~17.6 %。该方法具有较好的准确度、精密度,能快速、高效、方便、准确地测定猪、鸡、牛、羊粪污中15种兽药残留,为进一步调查掌握我国畜禽养殖粪污中的残留兽药种类及残留量,提供强有力的技术支撑。     

动物性食品中氟喹诺酮类药物的残留分析

综述了动物性食品中诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、氧氟沙星、单诺沙星残留的检测方法以及同时检测多种氟喹诺酮类药物残留的高效液相色谱法、毛细管区带电泳法、液相色谱-质谱联用法、高效免疫亲和色谱法和酶联免疫分析法的研究进展.     

牛奶中氟喹诺酮类药物残留量检测方法研究

建立了牛奶中5种氟喹诺酮类药物(达氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星和二氟沙星)残留检测的高效液相色谱-荧光检测法.结果表明,环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星在5～300 ng/mL,达氟沙星在1～60 ng/mL浓度范围内,呈良好的线性关系,r均大于0.999 9.方法最低检测限环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星为5 ng/mL,最低定量限为10 ng/mL.达氟沙星最低检测限为1 ng/mL,最低定量限为2 ng/mL.环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星在10、50、100 ng/mL三种浓度添加水平上,平均回收率为70%～94%,达氟沙星在2、10、20 ng/mL三种浓度添加水平上,平均回收率为73%~88%.批内、批间RSD均小于11%.     

固相萃取-高效液相色谱法同时检测奶牛粪污中5种磺胺类抗生素

建立的固相萃取-高效液相色谱法具有灵敏度高、检测限低的特点,可同时定量检测奶牛粪污中磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹噁啉的残留。采用C18色谱柱(500 mm×4.6 nm, 5μm),以0.3%的乙酸-乙腈溶液为流动相,在流速1.0 mL/min、检测波长270 nm、柱温30℃条件下,5种抗生素均能达到基线分离;3倍信噪比下,5种抗生素的检出限均为20μg/kg。在加标浓度50μg/kg条件下,奶牛粪污样品经前处理、MCX固相萃取小柱富集净化后,五种磺胺类抗生素回收率达到75%～80%,相对标准偏差为2.8%～3.9%。此方法检测了某规模化奶牛场粪污中磺胺类抗生素残留,结果显示,磺胺嘧啶的浓度范围在45～50μg/kg,其他抗生素无检出。     

国家农业部关于兽药停药期的最新规定(三)

兽药名称执行标准停药期恩诺沙星注射液兽药典2(x用版牛、羊14日,猪10日,兔14日氧阿苯达哇片部颁标准羊4日氧氟沙星可溶性粉部颁标准28日,产蛋鸡禁用氧氟沙星溶液(碱性)部颁标准部颁标准氨苯肿酸预混剂部颁标准5日,产蛋鸡禁用海南霉素钠预混剂部颁标准鸡7日,产蛋期禁用烟酸诺氟沙星注射液部颁标准28日盐酸二氟沙星片部颁标准鸡1日盐酸二氟沙星粉部颁标准鸡1日盐酸大观称素可溶性粉兽药典2以刃版鸡5日.产蛋期禁用盐酸左旋咪哇注射液兽药典2OD()版牛14日,羊28日,猪28日,泌乳期禁用盐酸异丙嗓片兽药典2以刃版28日盐酸沙拉沙星可溶性粉部颁标准…     

高效液相色谱法测定羊奶中五种氟喹诺酮类药物残留量的研究

建立了一种可同时检测羊奶中五种氟喹诺酮类药物(环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星)残留的高效液相色谱—荧光检测法。羊奶样品经乙腈提取,正己烷去脂肪,C18柱净化。以0.05 mol/L磷酸三乙胺溶液和乙腈溶液为流动相,流速为0.8 m L/min,激发波长280 nm,发射波长450 nm。结果表明环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星在10~200 ng/m L,达氟沙星在2~40 ng/m L呈良好的线性关系,R2均大于0.999。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星的最低定量限为30μg/kg,达氟沙星的最低定量限为6μg/kg。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星在30~200μg/kg的浓度添加水平上,达氟沙星在6~40μg/kg的浓度添加水平上其回收率均在70~100%,批内、批间的相对标准偏差小于20%。该方法简单快速、灵敏度高、重复性好,适用于羊奶中五种氟喹诺酮类药物残留检测。     

兽药安全使用常识

1.我国已经批准为兽用的氟喹诺酮类药有哪些？氟喹诺酮类药有什么抗菌特性？ 目前已经批准的有诺氟沙星、烟酸诺氟沙星、盐酸诺氟沙星、盐酸环丙沙星、乳酸环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、甲磺酸培氟沙星、甲磺酸达氟沙星、盐酸沙拉沙星、盐酸二氟沙星、盐酸洛美沙星及其制剂等。     

鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留量检测方法研究

建立一种可同时检测鸡蛋中四种氟喹诺酮类药物(环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星)残留的高效液相色谱-荧光检测法。结果表明,四种氟喹诺酮类药物中环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星在2~500 ng/mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,R2均大于0.9999;达氟沙星在0.4~100 ng/mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,R2大于0.9999。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星的定量限为10μg/kg,达氟沙星的定量限为2μg/kg。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星在10~200μg/kg的浓度添加水平上,其回收率为70%~100%;达氟沙星在2~40μg/kg的浓度添加水平上,其回收率为70%~100%,批内、批间的相对标准偏差均小于10%。     

仔猪拉黄痢的治疗药物

正1)土霉素0.2～0.3 g,口服,每日3次,连用3 d。2)磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺5-甲氧嘧啶或磺胺6-甲氧嘧啶同抗菌增效剂(TMP)按5∶1比例混合,0.1～0.2 g口服,每日1次,连用3 d。3)喹诺酮类药物如恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星等,也有良好治疗效果。     

鸡蛋中磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶残留消除规律研究

本研究旨在分析磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶在鸡蛋中残留消除规律,为蛋鸡在开产前合理用药制定休药期提供依据,并建立一种检测3种磺胺类药物在鸡蛋中残留的超高效液相色谱法。将60只试验鸡随机分为4组(试验组I、试验组II、试验组III、空白组),各药物按照说明书剂量拌料给药,空白组饲喂不含任何抗生素的空白料,连续给药5 d。收集的鸡蛋样品经乙酸乙酯超声提取,正己烷除酯,复溶液复溶,高效液相色谱C18柱分离后用紫外检测器检测(该方法的检测限为0.01 mg/kg)。结果显示,停药后12 d,磺胺嘧啶检出浓度低于0.01 mg/kg;停药后9 d,磺胺氯哒嗪检出浓度低于0.01 mg/kg;停药后12 d,磺胺间甲氧嘧啶检出浓度低于0.01 mg/kg;该结果提示磺胺嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶分别在产蛋前12 d、9 d、12 d停用。     

动源性食品中常见氟喹诺酮类残留检测前处理的优化

建立了一个检测动物源性食品中6种氟喹诺酮类药物残留的高效液相色谱方法。对不同基质的样品前处理条件经行了优化：鱼、肉及肝脏样品经过乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢钾缓冲液提取,正己烷洗涤去除油脂;蛋及乳制品样品经过乙腈提取,正己烷洗涤去除油脂。目标化合物采用高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量。添加10、20、50、100μg/kg浓度水平时,回收率在82%~105%之间,相对标准偏差在4%~12%之间,方法的检出限为诺氟沙星、环丙沙星、沙拉沙星及单诺沙星为5.0μg/kg、恩诺沙星、达氟沙星为3.0μg/kg。方法操作简单、实用,基质干扰小,灵敏度高,可以满足动源性食品中氟喹诺酮类药物残留检测的需要。     

固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中5种磺胺类药物的研究

建立了固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)测定饲料中磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉5种磺胺类药物的方法。考察了碱性氧化铝小柱的最大饱和容量及洗脱条件,优化了色谱条件:流动相为乙腈和水(257∶5,v/v),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm。在优化条件下,方法的最低定量限分别为磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶5 mg/kg;磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉2 mg/kg。方法的线性范围在0.2～200μg/mL之间,线性相关系数高于0.9996。将该方法用于鸡配合饲料、猪配合饲料和浓缩饲料中磺胺类药物残留的测定,不同添加浓度的回收率均高于80%,相对标准偏差≤10%,能够满足实际样品的分析要求。     

TTC法检测牛奶中的抗菌药物

针对用TTC法检测牛奶抗菌药物残留过程中因为在被检乳样中加入指示菌的数量不稳定而影响检测的问题,本研究增设了菌液稀释度试验以确定加入的菌液量。同时,采用TTC法对奶牛场常用的几种抗菌药物检测其在乳中的最低检测浓度。结果是青霉素3μg/kg,链霉素660μg/kg,庆大霉素620μg/kg,卡那霉素6200μg/kg,红霉素30μg/kg,环丙沙星500μg/kg,土霉素100μg/kg,金霉素100μg/kg,磺胺嘧啶100μg/kg。本研究用TTC法对青霉素、红霉素、土霉素、金霉素和磺胺嘧啶的检测灵敏度均达到农业部规定的牛乳中兽药残留最高限量要求。TTC法具有简便、价廉的优点,并且所检测的抗菌素范围较广,符合我国奶牛场中使用抗菌药物种类较多的现状。     

高效液相色谱法同时测定猪肌肉中氟喹诺酮类和磺胺类药物残留

为了建立同时检测猪肌肉组织中3种喹诺酮类药物(环丙沙星、单诺沙星、恩诺沙星)和3种磺胺类药物(磺胺二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺甲唑)的高效液相色谱(HPLC)检测方法,试验采用磷酸盐缓冲液(pH值为6)提取动物组织样品,混合型阳离子交换(MCX)固相萃取柱净化,无水乙醇平衡、洗涤,无水乙醇-氨水(95/5)洗脱,Symmetry C18色谱柱分离,紫外检测器串联荧光检测器同时测定。线性良好,相关系数(r2)大于0.998 7,平均回收率为70.6%~89.3%,相对标准偏差为2.5%~13.4%。喹诺酮类药物的检出限为0.04~0.20μg/kg,定量限为0.2~1.0μg/kg;磺胺类药物的检出限为4μg/kg,定量限为15μg/kg。结果表明:HPLC法具有快速、环保的特点,可以用于猪肌肉组织中氟喹诺酮类和磺胺类药物的常规残留检测。     

分散固相萃取法结合高效液相色谱-串联质谱法测定禽蛋中喹诺酮类兽药残留量

试验建立了一种分散固相萃取前处理技术结合高效液相色谱-串联质谱法检测禽蛋中9种喹诺酮类(丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、依诺沙星、培氧沙星、双氟沙星)兽药残留的分析方法。样品以乙腈、EDTA-Mcllvaine和乙酸为提取试剂、无水氯化钠为脱水剂、C18为吸附剂进行净化,以甲醇-0.1%甲酸水为流动相,反相C18色谱柱分离,正离子多反应监测模式进行质谱分析。结果:9种喹诺酮在1.0~200μg/kg范围内具有良好的线性关系,相关系数(r~2)均在0.991以上;检出限范围为0.07~0.20μg/kg,定量限范围为0.22~0.67μg/kg;平均回收率介于73.5%~92.9%之间,相对标准偏差(RSD)低于11.8%。结果表明,该方法适合于检测禽蛋中喹诺酮类药物残留量。     

氟喹诺酮类药物多组份残留的酶免疫分析法

采用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯法制备诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星和沙拉沙星完全抗原,经紫外光谱扫描鉴定后,免疫小鼠,ELISA测定抗体交叉反应性,筛选簇特异性抗体,建立多组份ciELISA检测方法.紫外光谱扫描结果证实4种半抗原与载体蛋白发生共价结合,所制备的沙拉沙星与诺氟沙星抗血清效价都在1:64 000以上,环丙沙星和达氟沙星抗血清效价都在1 :32 000以上.交叉反应率测定结果表明,沙拉沙星抗血清对沙拉沙星、诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的交叉反应率依次为100.00%、92.68%、89.12%和83.56%;利用沙拉沙星抗血清建立了针对上述4种药物的多组份ciELISA检测方法,最低检测限依次为19.3、34.5、31.3、29.2 μg/L,大于5μg/L水平的添加回收率均大于83%.     

高效液相色谱荧光检测法测定牛奶中4种氟喹诺酮类药物残留

为了建立一种同时测定牛奶中4种氟喹诺酮类药物(恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、二氟沙星)多残留高效液相色谱检测方法,将牛奶中的残留药物用磷酸-甲醇溶液重复提取2次,正己烷除去脂肪净化后浓缩,流动相溶解后用高效液相色谱-荧光检测器测定。结果表明,4种氟喹诺酮类药物在0.01~1.00μg/mL浓度范围内具有良好的线性关系(R=0.999 9),在0.01,0.05,0.10,0.50μg/mL和1.00μg/mL 5个浓度添加水平上,平均回收率为77%~93%,样品的批内和批间变异系数均值分别为5.29%和7.83%,定量限均为10 ng/mL。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星检测限均为5 ng/mL,二氟沙星检测限为8 ng/mL。本研究建立的检测方法简单、快速、灵敏度和回收率高,适用于牛奶中4种氟喹诺酮类药物残留检测。     

新型反相固相萃取吸附剂测定鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留量

建立了一种使用新型反相固相萃取吸附剂(PRiME HLB)的前处理净化流程,采用高效液相色谱-荧光检测器同时测定鸡蛋中环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星残留量的方法。试样经乙腈∶0.2%甲酸水溶液(80∶20)提取,PRiME HLB固相萃取柱净化后进行测定,外标法定量。实验结果表明:(1)在鸡蛋中环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的检测限为0.75μg/kg,达氟沙星的检测限为0.15μg/kg;在0.005~0.5μg/mL质量浓度范围(达氟沙星在0.001~0.2μg/mL浓度范围)内线性回归关系良好(r0.99999)。(2)环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的添加量为0.005、0.05、0.5μg/mL(达氟沙星0.001、0.02、0.2μg/mL)时,方法的添加回收率在74.24%~98.78%,RSD5.15%。本方法适用于鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留量的测定。     

动物源性食品中六种氟喹诺酮类残留检测前处理的优化

建立了一个检测动物源性食品中6种氟喹诺酮类药物残留的高效液相色谱方法.对不同基质的样品前处理条件经行了优化:鱼、肉及肝脏样品经过乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢钾缓冲液提取,正己烷洗涤去除油脂;蛋及乳制品样品经过乙腈提取,正己烷洗涤去除油脂.目标化合物采用高效液相色谱-荧光检测器检测,外标法定量.添加10、20、50、100 μg/kg浓度水平时,回收率在82%～105%之间,相对标准偏差在4%～12%之间,方法的检出限为诺氟沙星、环丙沙星、沙拉沙星及单诺沙星为5.0 μg/kg、恩诺沙星、达氟沙星为3.0 μg/kg.方法操作简单、实用,基质干扰小,灵敏度高,可以满足动源性食品中氟喹诺酮类药物残留检测的需要.