一起猪高热病的诊断与流行病学分析

2006年7月以来,浙江省某地区猪群出现发热、局部皮肤发绀、呼吸困难为主的临床症状,死亡率高达39.3%,疑似猪高热病。通过流行病学调查和实验室检测9份病料与17份血清样品,发现临床病程5d以上的病猪无论是PRRSV还是PRRSV抗体阳性率均为100%;PCV2检出率达44.4%;所有病料CSFV检测均为阴性;17份血清样品伪狂犬(PR)(gE)抗体均为阴性。因此,判定此病是以PRRSV为主要原发性病因、PCV2协同作用的猪高热病。本次高热病不排除PRRSV强毒株或病毒变异株、未知病原及其它未检病原共同感染的可能性。     

3种ELISA试剂盒检测猪伪狂犬病gE抗体的比较

通过对猪伪狂犬病毒gE抗体的3种ELISA试剂盒比较试验数据分析,3种试剂盒检测值均呈极显著的相关关系(P<0.01)。检测定性结果一致程度较高,其中HIPRA与IDEXX一致性强度为极强(Kappa=0.808),且其符合率达89.4%;HIPRA与LSI、LSI与IDEXX均为高度一致(Kappa=0.732、0.724),且其符合率依次为85.6%、85.3%。经gE抗体阳性率检测结果统计学检验,3种试剂盒gE抗体阳性率之间差异均不显著(P>0.05),其检测灵敏度从高到低次序为LSI、IDEXX和HIPRA。临床应用数据分析表明,LSI检测样品存在1.26%假阳性结果,使用LSI检测gE抗体易造成临床猪伪狂犬误诊,为降低误诊率须加大检测群体的样本数或要求有阻断率≥76.73%的样品存在。在临床样品检测群体定性中HIPRA、IDEXX与临床相符率均达100%,LSI与临床相符率为95.5%,其中相符率LSI与HIPRA差异显著(P<0.05)。从猪伪狂犬病净化角度来说,3种试剂盒均可使用,但若用于猪伪狂犬病诊断或了解群体猪伪狂犬病毒野毒感染程度则宜采用HIPRA或IDEXX试剂盒。在实际应用中除选择合适的试剂盒外还应注意检测数据的科学分析。     

检测猪伪狂犬病抗体的3种ELISA试剂盒的比较分析

为评价用于检测猪伪狂犬病抗体的3种商用的试剂盒,择优选取一种作为本中心的检测试剂。用3种试剂盒检测386份免疫背景清楚的临床及试验血清,比较各试剂盒的检测阳性率、敏感性。结果386份血清经HIPRA、LSI和IDEXX试剂盒检测,检测阳性率分别为30.83%、59.84%和71.24%,且3种试剂盒相同血清的检测阳性率相互间差异均极显著性(P<0.01),但是对于高抗体水平的38份母猪血清检测阳性率相互间差异均不显著(P>0.05)。检测数据表明IDEXX与LSI两者相关系数为-0.941,检测定性完全相符率达81.12%。结果3种试剂盒检测阳性率、敏感性均以IDEXX为最高,LSI次之,HIPRA最低;IDEXX与LSI两者呈现强相关,造成阳性检测率差异显著的主要因素是方法的敏感性、试验结果的判定标准。     

猪圆环病毒检测与分型寡核苷酸芯片的建立及应用

本研究应用寡聚核苷酸基因杂交技术建立了一种快速可靠的检测猪圆环病毒(PCV)基因型的方法.在PCV保守序列复制酶基因内设计了2对特异性引物,在此物之间设计了2种基因型特异的核苷酸探针(22～30 mer).通过PCR扩增Cy5标记的DNA片段与固定在玻片表面的探针杂交进行PCV基因分型.该技术结合了PCR方法的高度敏感性和DNA-DNA杂交技术的选择特异性.利用该方法对58倒临床样品进行了检测鉴定.结果显示,该技术能准确鉴别PCV病毒基因型.且其灵敏度是凝胶电泳的5倍.试验结果表明寡核苷酸基因芯片技术可有效地应用于PCV临床诊断和分子流行病学调查.     

三合激素注射液诱导断奶杂交母猪发情的效果

杂交母猪的发情症状总是不够明显,影响配种,因此,如何诱导和促进杂交断奶母猪的发情症状是养猪业关心的问题。我们对三合激素(由丙酸睾酮、黄体酮、苯甲酸雌二醇组成)诱导断奶杂交母猪发情的临床应用效果进行了研究。将299头断奶后1～2d未发情的初产或经产母猪分别肌注三合激素3.0,2.0,1.0mL/头(高、中、低剂量),苯甲酸雌二醇组3～10mg/头和生理盐水2～3mL/头(空白对照组)。结果表明,三合激素对断奶母猪催情效果显著且对其繁殖无不良影响,而且能改善产活仔率,以2.0～3.0mL/头肌注为佳。     

抗菌药物治疗奶牛子宫内膜炎后牛奶中药物残留及其对酸奶发酵的影响

用TTC法检测44例经过抗菌药物治疗的患子宫内膜炎荷斯坦奶牛。其中，41例采用子宫内灌注药物治疗，主要药物有土霉素、金霉素和庆大霉素；每个病例治疗1～5次不等，3例采用静脉注射，主要药物有磺胺嘧啶钠和头孢噻啶。结果表明，31例经土霉素子宫内灌注的奶牛，停药后第24h所采的奶样均可检出抗生素；其中6头奶牛在第6d仍然抗生素阳性，残留时间最长的可达8d。8例用金霉素子宫灌注治疗的奶牛，停药后第48h所采的奶样，抗生素检出率100％，其在牛奶中的残留时间为2～5d不等。2例经庆大霉素子宫灌注治疗的患病牛，药残时间分别为1～2d。3头经静脉滴注治疗的病牛，牛奶中的药残时间约达到9d以上。此外，从3头用金霉素子宫内灌注的奶牛采集牛奶用于乳酸菌发酵试验。结果表明，牛奶TTC阳性时，发酵产酸较低。在治疗后6h采集的牛奶都不能正常发酵产酸、凝固。3例试验牛牛奶发酵产生的酸度分别于治疗后第13、24和48h恢复到治疗前的水平。     

TTC法检测牛奶中的抗菌药物

针对用TTC法检测牛奶抗菌药物残留过程中因为在被检乳样中加入指示菌的数量不稳定而影响检测的问题,本研究增设了菌液稀释度试验以确定加入的菌液量。同时,采用TTC法对奶牛场常用的几种抗菌药物检测其在乳中的最低检测浓度。结果是青霉素3μg/kg,链霉素660μg/kg,庆大霉素620μg/kg,卡那霉素6200μg/kg,红霉素30μg/kg,环丙沙星500μg/kg,土霉素100μg/kg,金霉素100μg/kg,磺胺嘧啶100μg/kg。本研究用TTC法对青霉素、红霉素、土霉素、金霉素和磺胺嘧啶的检测灵敏度均达到农业部规定的牛乳中兽药残留最高限量要求。TTC法具有简便、价廉的优点,并且所检测的抗菌素范围较广,符合我国奶牛场中使用抗菌药物种类较多的现状。