农村散养猪口蹄疫免疫方法研究

[目的]为了制定在农村散养条件下猪口蹄疫控制的疫苗免疫策略。[方法]研究猪口蹄疫O型和亚洲I型母源抗体、口蹄疫免疫后抗体消长规律和猪瘟与口蹄疫免疫干扰。[结果]结果表明,仔猪口蹄疫O型母源抗体能保护15日龄内仔猪,而亚I抗体不能保护仔猪。2 ml免疫剂量组的O型和亚I抗体水平均明显高于1ml免疫剂量组,1次免疫接种不能形成免疫反应的抗体平台期,抗体效价迅速下降;2次免疫接种后60 d达到峰值,O型和I型抗体滴度维持长达60 d以上;猪瘟和口蹄疫疫苗同时免疫相互不发生干扰。[结论]结合农村散养实际情况,为提高免疫保护力,建议实行30日龄同时首免口蹄疫和猪瘟,间隔28 d进行二免,每次免疫剂量口蹄疫为2 ml/头,猪瘟为2头份/头。     

仔猪O型口蹄疫母源抗体消长试验

[目的]为制定科学合理的仔猪口蹄疫免疫程序提供依据。[方法]以规模化养猪场和散养户中经猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫后母猪所生产的仔猪为研究对象,利用液相阻断ELISA诊断试剂盒对仔猪母源抗体消长情况进行检测。[结果]仔猪通过母乳获得被动保护,在21日龄母源抗体达到高峰,规模化猪场和散养户母猪的平均效价分别达1∶142和1∶89。规模化猪场场仔猪21~30日龄保护率在80%以上,45日龄下降到65%,60日龄时基本无保护;而农户仔猪21日龄保护率为60%左右,30日龄仅为40%左右。农户饲养母猪免疫抗体水平远低于规模化猪场。[结论]对规模化猪场的仔猪进行口蹄疫疫苗的最佳首免时间为45~50日龄,而对散养户仔猪的最佳首免时间应为30日龄左右。     

猪O型口蹄疫母源抗体消长规律及疫苗免疫的干扰作用

[目的]制定科学合理的免疫程序,从根本上控制仔猪O型口蹄疫的发生。[方法]采用ELISA抗体检测试剂盒对涪陵某规模化养殖场母猪和仔猪进行了母源抗体和免疫抗体检测。[结果]仔猪在10日龄左右抗体效价最高,平均效价为2.62。随着日龄的增长,仔猪母源抗体水平迅速下降至不完全保护水平。不同日龄首免仔猪口蹄疫疫苗免疫抗体检测结果表明母源抗体效价对试验猪的免疫应答有较大的影响。[结论]30～45日龄是仔猪接种FMD疫苗的最佳时间,这与母源抗体的消长规律相一致。     

Growth and Decline Laws of Maternal Antibody of Newcastle Disease in Commercial Meat Goose and Its Optimal First - immunization

[目的]探讨商品肉鹅新城疫母源抗体消长规律及最佳首免日龄.[方法]通过血凝(HA)试验和血凝抑制(HI)试验,对商品肉雏鹅在不同时间首次接种鹅源新城疫油乳剂灭活疫苗后的免疫效果进行监测,以确定最佳首免日龄,并对ND母源抗体进行动态分析.[结果]霍尔多巴吉肉鹅的母源抗体由1日龄的10 log2下降到25日龄的0.6 log2.母源抗体水平4l0g2作为免疫接种的临界点.7日龄免疫组HI抗体水平20日龄后一直维持在临界点以下,不能达到疫苗保护水平;11日龄免疫组HI抗体水平在免疫后16 d达到临界点,到出栏前仍维持较高水平;14日龄免疫组HI抗体水平在免疫后约22d达到临界点.[结论]霍尔多巴吉肉鹅母源抗体半衰期约为2.7d,11日龄为霍尔多巴吉商品肉鹅新城疫的最佳首免日龄.     

正向间接血凝试验监测家畜O型口蹄疫抗体

有效控制口蹄疫关键在于早期监测,准确监测是防制口蹄疫的重要环节。特对某地方乡镇散养、规模化养殖场采取牛、羊、猪的血清,利用正向间接血凝试验对家畜O型口蹄疫疫苗免疫抗体进行监测,了解家畜免疫效果。监测结果显示,该地方牛羊的口蹄疫疫苗免疫合格率平均为76%,猪的口蹄疫疫苗免疫合格率平均为60%;规模化养殖场较个体散养户免疫抗体效果好;牛口蹄疫O型灭活苗的免疫抗体效果好于牛口蹄疫AsiaⅠ-O型双价灭活疫苗的免疫抗体效果。     

基于免疫层析试纸的猪O型FMDV抗体水平监测

为了应用免疫层析试纸评价猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果,对50头试验仔猪进行免疫注射,并在首次免疫后28 d及2次免疫后20 d采血,通过试纸定量测定结果来监测试验猪抗体水平变化,同时对比猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒的检测结果.结果表明,猪口蹄疫O型合成肽疫苗能快速诱导产生高水平的抗体,首次免疫抗体阳性率达88%,2次免疫抗体阳性率高达100%.试纸定量测定结果表明,2次免疫后猪群免疫抗体水平整体显著提升,并保持在较高水平.与ELISA试剂盒比较二者具有相同的敏感性和特异性,符合率为100%.     

用酶联免疫吸附法对猪O型口蹄疫免疫抗体监测及分析

为切实了解、掌握遂宁市生猪口蹄疫免疫效果,以科学有效预防该病,2015年,随机抽取全市部分规模场、散养户以及屠宰场猪血清3100份,用酶联免疫吸附试验监测O型口蹄疫免疫抗体。结果表明,猪O型口蹄疫免疫抗体整体合格率为80.98%,其中抗体最好的是规模场,四个季度的免疫抗体合格率差异不大,各规模场商品猪在不同季度,猪O型口蹄疫免疫抗体群体合格率均达到80%以上,种猪多数场免疫抗体群体合格率达到了90%以上;散养户及屠宰场免疫抗体合格率分别为74.71%、71.96%。说明我市始终坚持"规模养殖场按程序进行免疫,散养畜禽实行春秋两季集中免疫、每月及时补免"的工作制度,坚持"应免尽免,不留空档"的工作标准,把口蹄疫等重大动物疫病免疫放在防疫工作的突出位置,成效显著。     

规模猪场不同日龄仔猪O型口蹄疫母源抗体消长规律及免疫试验

为确定仔猪口蹄疫疫苗首次免疫时间,以规模化养猪场经猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫后母猪所生产的仔猪为研究对象,利用液相阻断ELISA诊断试剂盒对仔猪母源抗体消长情况进行检测.结果表明,10、20、30、40日龄仔猪99％以上被保护的分别占该日龄组的60％、80％、80％、50％,50、60、70、80日龄仔猪99％以上被保护的分别占该日龄组的40％、0、0、0,60％以上仔猪未被充分保护.随着日龄的增加,抗体效价明显下降.对检测猪O型口蹄疫抗体小于1∶45的45日龄仔猪10头进行猪O型口蹄疫免疫试验,结果O型口蹄疫一免后14 d抗体效价≥27的有10份,达到100％保护.因此,对规模化猪场的仔猪进行口蹄疫疫苗的最佳首免时间为45～50日龄.     

商品肉鹅新城疫母源抗体的消长规律及其最佳首免日龄

[目的]探讨商品肉鹅新城疫母源抗体消长规律及最佳首免日龄。[方法]通过血凝(HA)试验和血凝抑制(HI)试验,对商品肉雏鹅在不同时间首次接种鹅源新城疫油乳剂灭活疫苗后的免疫效果进行监测,以确定最佳首免日龄,并对ND母源抗体进行动态分析。[结果]霍尔多巴吉肉鹅的母源抗体由1日龄的10 log2下降到25日龄的0.6 log2。母源抗体水平4 log2作为免疫接种的临界点。7日龄免疫组HI抗体水平20日龄后一直维持在临界点以下,不能达到疫苗保护水平;11日龄免疫组HI抗体水平在免疫后16 d达到临界点,到出栏前仍维持较高水平;14日龄免疫组HI抗体水平在免疫后约22 d达到临界点。[结论]霍尔多巴吉肉鹅母源抗体半衰期约为2.7d,11日龄为霍尔多巴吉商品肉鹅新城疫的最佳首免日龄。     

液相阻断ELISA检测方法在猪牛A型口蹄疫免疫抗体检测中的应用

用液相阻断ELISA试验方法监测辖区内经口蹄疫A型灭活疫苗免疫牛血清样品593份,其中:规模场牛群免疫抗体滴度<1∶64的有24份,抗体滴度≥1∶64的有82份,抗体保护率为77.79%;散养户牛群免疫抗体滴度<1∶64的有54份,抗体滴度≥1∶64的有433份,抗体保护率为88.91%。在猪群推广免疫口蹄疫A型灭活疫苗并跟踪监测血清样品20份,检测结果与北京市兽医兽医诊断所检测结果相同,抗体滴度≥1∶64的有20份,抗体保护率为100.00%,为推广口蹄疫A型灭活疫苗在猪群免疫提供了试验数据。     

卵黄抗体三种提取工艺的比较

The experiment mainly compares three different methods of extracting antibodies: octanoic acid method, water dilution method and poloxamol method,by observing the physical properties of the antibody, detecting the protein content of the extract, and using the hemagglutination test and the hemagglutination inhibition test to detect the antibody titer, select the best process of the yolk antibody.The results showed that the protein content of the three different extraction methods was the highest by poloxamol method and the lowest by octylic acid method;The contents of Newcastle disease and avian influenza were the highest by water dilution method and the lowest by octanoic acid method;The volume of antibody solution was the highest by water dilution method and the lowest by poloxamu method.Comprehensive comparison of experimental results finally determined that water dilution method is the best effect, using this method to extract yolk antibody titer is the highest, easy to operate, can achieve large-scale production workshop.     

利用羊抗鸡抗体检测鹅血浆中的抗体水平

利用商品供应的山羊抗鸡抗体ELISA检测鹅血液中抗体水平的可行性.在相同条件下,以羊抗鸡抗体作为第2抗体,在ELISA分析中检测利用同一抗原免疫后鸡和鹅血浆样品中抗体水平.经过相同倍数梯度稀释的鸡和鹅血浆样品中,所测到的鹅血样的D450 nm值曲线在处理组和对照组均与鸡的D450 nm值曲线变化趋势相同,只是随血样的稀释倍数上升,鹅血样D450 nm值的下降速度较慢.结果表明只要反应条件适当,抗鸡抗体可以作为第2抗体用于ELISA检测鹅血液中的抗体.通过抗原/血浆浓度梯度交叉试验,ELISA中抗原的最适包被质量浓度为100 μg/mL(150 μL/孔),血样最佳稀释比为1:12 800.ELISA测定所得鹅免疫试验中的抗体变化与理论预计结果一致,与在鸡上的变化也类似.     

抗体检测技术在基层畜牧业生产中的指导作用

本文主要根据作者自身工作经验,从抗体检测技术原理,基层常用的抗原抗体反应实验,以及抗体检测技术在指导畜牧业生产中的重要作用等方面进行阐述,说明了抗体检测技术在制定免疫程序、疾病诊断、疫苗评估及免疫效果评价等领域发挥着积极的作用。     

内蒙古自治区鸡ND、MD、IBD系列免疫程序的研究

本文选择内蒙古自治区较大两种类型的鸡场进行鸡新城疫、马立克氏病及传染性囊病免疫程序的实验研究、经过几年的中试和效果观察。认为此程序对于鸡场预防这３种疾病的发生具有明显的效果。其结果表明：鸡新城疫以血凝抑制抗体４ｌｏｇ￣２为临界点进行免疫，１免和２免用Ⅱ系苗，３免用Ⅰ系，在开产前Ⅰ系苗或油佐剂苗加强，肉用鸡用Ⅱ系苗免疫两次；鸡马立克病在雏鸡出壳后尽早用倍量国产ＨＶＴ苗进行免疫；鸡传染性囊病根据鸡的性能和用途的不同可选择不同的日龄用国产中等毒力苗倍量进行免疫。对于蛋鸡最好在６０～７０日龄时用中等毒力苗加强免疫１次。鸡种群在开产前和４０～４２周龄时用ＩＢＤ油苗进行加强免疫。     

重金属钼离子单抗的制备及其免疫学特性研究

为了检测水质、土壤、食品中的重金属钼离子的残留,故制备用于钼离子检测用的单克隆抗体。采用已合成的钼离子人工抗原Mo6+-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,用间接ELISA和间接竞争ELISA法筛选出备用小鼠,用细胞融合技术筛选制作单克隆抗体。结果表明:筛选出4株特异性强、敏感度高的杂交瘤细胞,其中4B3杂交瘤细胞株间接ELISA检测培养上清抗体效价为1∶(3.6×102);体内诱生法制备腹水效价为1∶(5.12×105);杂交瘤核型鉴定结果显示4B3杂交瘤细胞株染色体数目平均为99.4。4B3杂交瘤细胞株用间接竞争ELISA结果显示,IC50值为23.4μg/L,与Cr3+-EDTA的交叉反应率为81.8%,与其他金属螯合物无交叉反应。说明Mo6+-EDTA-mAb可用于Mo6+污染检测的免疫学试验。     

卵黄抗体测定与鸡新城疫免疫接种的应用研究

利用血凝（ＨＡ）和血凝抑制（ＨＩ）试验，对来自同一机体和同一鸡群非同一机体的２７９６只罗曼蛋鸡血样及蛋样进行了鸡新城疫血清和卵黄抗体水平的检测。结果表明：血清和卵黄无论来自同一机体，还是来自同一鸡群，所测抗体效价基本一致。对６１０枚入孵种蛋不同时间卵黄抗体和该批种蛋孵出的６１０只雏鸡不同日龄血清抗体水平进行了检测，发现种蛋卵黄抗体效价与雏鸡血清抗体效价有一定的相关性，用卵黄监测种蛋的抗体水平可以得知雏鸡出壳后首免时间。     

一种快速检测抗沙门氏菌O抗原单克隆抗体的微量间接血凝试验

用热酚—水法提取沙门氏菌脂多糖(LPS),经pH8.0热处理后,致敏醛化的绵羊红血球,建立了一种快速检测抗沙门氏菌O抗原单克隆抗体的微量间接血凝试验。用致敏血球在96孔V型血凝板上与杂交瘤培养上清作凝集试验,数秒钟即能判定结果。本试验具有快速的特点,且有一定的敏感性。     

高致病性猪蓝耳病疫苗对猪瘟和蓝耳病抗体水平的影响

[目的]研究高致病性猪蓝耳病(High pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome,HP-PRRS)疫苗对猪瘟(Classical swine fever,CSF)和猪蓝耳病(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)抗体水平的影响。[方法]采用ELISA方法检测3个猪场248份血清的猪瘟(CSF)和猪蓝耳病(PRRS)抗体,并对CSF抗体阻断率和PRRS抗体的S/P值进行多重比较。[结果]猪场A(没有免疫HP-PRRS疫苗)、猪场B和猪场C(都免疫HP-PRRS毒株JXA-1R疫苗)全群猪的CSF抗体阳性率分别为94.29%、53.93%和66.29%,其PRRS抗体阳性率分别为42.86%、91.01%和82.02%。猪场A、C母猪和全群猪的CSF抗体阻断率极显著高于猪场B(P0.01);猪场A的育肥猪和全群猪的CSF抗体阻断率显著高于猪场C。猪场B的母猪、后备母猪、育肥猪、全群猪PRRS抗体S/P值极显著高于猪场A、C(P0.01),猪场C的育肥猪、全群猪PRRS抗体S/P值显著高于猪场A(P0.05)。[结论]免疫HP-PRRS毒株JXA-1R疫苗可能引起猪群CSF抗体水平降低,PRRS抗体水平提高。     

抗磷酸酪氨酸抗体的制备

目的；制备抗磷酸酪氨酸抗体。方法：以EDC（碳化二亚胺）交联法合成磷酸酪氨酸牛血清白蛋白（P－Tyr－BSA）；以P－Tyr－BSA免疫新西兰免，抗血清经硫酸该盐析和DEAE纤维素柱层析纯化；以琼脂糖双扩法测定抗体效价。结果：得到抗血清效价为1：32，抗血清与牛血清蛋白（BSA）交叉反应的效价为1：2。纯化的抗体与磷酸酪氨酸牛血清白蛋白、磷酸酪氨酸卵清蛋白、磷酸丝氨酸牛血清白蛋白、磷酸苏氨酸牛血清白蛋白反应效价分别为1：32、1：16、1：2、1：2，所得抗体蛋白量为120mg。纯化的抗体在醋酸纤维素薄膜上电泳为单一区带。结论：用此法制备得的抗体专一性高，交叉反应低，抗体量大。     

抗肿瘤单克隆抗体药物的研究进展

通过淋巴细胞杂交瘤技术或基因工程技术制备单克隆抗体药物,已经成为生物制药领域的一个重要方面,特别是对抗肿瘤单克隆抗体药物的研究已获得了重要进展。多年来,许多研究证实了抗肿瘤单克隆抗体药物的作用,为其应用于肿瘤治疗提供了重要依据。文章就抗肿瘤单克隆抗体药物的种类、制备、应用及存在问题进行了综述,并对其应用前景进行了展望。