体外棕榈酸诱导自噬调节奶牛淋巴细胞炎症通路

为探讨体外棕榈酸(Palmitic acid,PA)是否可以通过自噬调节奶牛淋巴细胞炎症信号通路的激活,分离健康奶牛淋巴细胞,采用3-MA(3-Methyladenin,细胞自噬抑制剂)和不同质量浓度PA作用于淋巴细胞,收集细胞及上清,利用qRT-PCR检测淋巴细胞LC3B、Beclin1、mTOR、UKL1、SQSTM1、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达情况;利用CCK-8和酶联免疫吸附法分别测定细胞活性和促炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的释放量。CCK-8结果表明:PA显著抑制淋巴细胞活性(P0.01),添加自噬抑制剂3-MA后细胞活性显著增强(P0.01);qRT-PCR结果表明:与对照组(PA=0μg/mL)相比,PA处理组(不含3-MA)ULK1和LC3B mRNA表达极显著增加(P0.01),mTOR、Beclin1和SQSTM1 mRNA表达极显著降低(P0.01);IL-1β和IL-6 mRNA表达显著增强(P0.01),而TNF-α未表达;添加3-MA后,与1μg/mL PA处理组相比较,SQSTM1和Beclin1极显著增加,而LC3B mRNA表达极显著降低(P0.01);IL-1β和IL-6 mRNA表达显著下调(P0.01);PA增加促炎因子IL-6和IL-1β的释放(P0.01),显著抑制TNF-α释放(P0.01),而含有3-MA的PA混合处理组则显著降低(P0.01)。综上,PA可通过自噬调节奶牛淋巴细胞炎症信号通路的激活。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5、M蛋白基因的克隆及其基因疫苗构建

参照GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型代表株VR2332 GP5和M蛋白基因序列,设计并合成2对引物,用RT-PCR方法分别扩增出PRRSV野毒株GP5和M蛋白基因603,525bp片段,并将其分别克隆到pMD18-T载体。测序正确后,将GP5和M蛋白基因分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1上,成功构建基因疫苗表达载体pEGP5-C1和pEM-C1。小鼠免疫试验证实,这些基因疫苗质粒可以诱导小鼠产生特异性抗体,并在二免后1周开始检测到特异性淋巴细胞增殖反应。     

PRRSV 2b蛋白与LGALS1相互作用的验证研究

旨在研究猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)2b蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用。本研究利用酵母回返试验、GST-pull down试验、免疫共沉淀试验3种方法对LGALS1与PRRSV 2b蛋白间是否相互作用进行验证。结果表明:在酵母回返试验中,含有LGALS1与2b基因的杂交酵母菌株在SD/-Trp-Leu-His-Ade/AbA/X-α-gal的平板上生长出蓝色菌落;在GST-pull down试验中,LGALS1与2b蛋白反应的样品经Western blot可检测到融合蛋白带;在免疫共沉淀试验中,LGALS1与2b蛋白反应的样品经HA单抗沉淀后,经Western blot可检测到相应蛋白带。该研究证明了LGALS1与PRRSV 2b蛋白间发生相互作用,为研究PRRSV感染途径和增殖过程提供了理论基础。     

谨防掠夺养殖财富的"黑手"--直面猪禽继发性免疫缺陷病及其危害

继发性IDD常无特征性临床症状和病理变化,临床上仅表现猪禽发育不良、抵抗力低下、对特定疫苗无免疫反应,易反复感染、多重感染且治疗效果不佳,但其威胁是存在着机会性感染而引起严重后果。猪禽继发性IDD的原因非常复杂,包括感染性因素和非感染性因素,其中感染、淋巴组织来源的恶性肿瘤、细胞毒药物、某些抗茵药物及应激则是重要因素。而感染尤其是病毒性感染又是最重要、最常见、最严重的因素。专家指出,一些病毒感染猪或禽后,虽然有些耐过不死,但却对免疫系统造成了程度不同的损伤,引起暂时性或永久性的免疫缺陷。病毒对肌体的免疫损伤主要表现在干扰免疫系统对抗原的提呈;抑制自然杀伤细胞（NK）的功能及吞噬细胞吞噬功能和灭菌能力;通过干扰淋巴因子的生成、淋巴介导信号和淋巴因子效应功能而抑制淋巴因子的作用,通过干扰抗体反应功能和补体反应功能而逃避体液免疫反应对其作用,从而使接种疫苗效果甚微或无效,导致免疫防疫无法实现,例如患猪因免疫缺陷可继发其他疾病,猪瘟的继发感染是造成乳猪和保育猪高死亡率的主要原因;继发Ⅱ型环状病毒感染是造成保育后期猪至生长前期猪（7周龄～13周龄）死亡率升高的原因。Ⅱ型环状病毒也是中大猪呼吸道疾病综合征的重要病原之一;猪副嗜血杆菌的继发感染,是造成10周龄以前的小猪死亡率升高最重要的细菌性致病因子,而猪副嗜血杆菌的严重感染又成为蓝耳病存在的“指示病”。进而加重病情,使死亡率明显上升,因此,猪继发性IDD可造成养殖企业（户）损失惨重。及时、准确首诊和防制猪、禽病毒性传染病,以防止继发性免疫缺陷病已显得十分重要。 本文中就猪、禽继发性免疫缺陷病（IDD）降低猪禽免疫功能,抑制特定疫?     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）引起的猪的一种急性热性接触性传染病,该病主要特征是厌食、发热,怀孕母猪中后期发生流产,产死胎,木乃伊胎;幼龄仔猪发生呼吸道症状和大量死亡。     

关于提高《小动物疾病学》教学质量途径的探讨

小动物疾病学是一门对临床实践依赖性很强的兽医专业课程,随着宠物医疗行业的崛起,培养面向社会、面向大众和面向科技的全能型本科宠物医师具有一定挑战性。传统的教学模式已不适应现代教育体制需求,针对本科生教学方式逐渐显现出弊端,造成学生毕业无真才实学,丧失就业机遇；思想观念陈旧,实践能力较差；缺乏锐意创新精神,对现代科技医疗领域知之甚少,无法与社会所需型人才对接；因此,对高校小动物疾病学课程进行教学改革,增强学生创新意识和实践能力,紧贴社会需求,培养出专业型宠物医师至关重要。本文论述了小动物疾病学教育教学改革几点建议,以求提高教学质量。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒E蛋白在Marc-145细胞中的表达

针对PRRSV E基因设计1对带有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的引物,以PRRSV CC-1株为模版进行RT-PCR扩增,获得带有酶切位点的目的片段插入pMD18-T载体,对阳性重组质粒进行测序鉴定。将阳性质粒进行EcoRⅠ、SalⅠ双酶切,回收目的片段将其插入EcoRⅠ、SalⅠ双酶切的真核表达载体pEGFP-N1中构建重组质粒pEGFP-N1-E,将重组质粒用脂质体转染Marc-145细胞,通过荧光显微镜观察显示,在转染后24h出现荧光,48h出现荧光高峰,筛选阳性细胞株,进行目的基因转录、Western blot检测目的蛋白的表达鉴定。结果表明:成功构建真核表达载体pEGFP-N1-E,建立了稳定表达的细胞株。为研究E蛋白如何与宿主细胞结合形成通道,PRRSV吸附、穿入宿主细胞的作用机理以及筛选特效的粒子通道阻断剂奠定了基础。     

兽医学学科发展的现状、面临的问题及意义

我国兽医学由基础兽医学、预防兽医学和临床兽医学3个二级学科组成,现有200多个大、中专院校开设兽医学专业。但在人才培养与课程体系、人才队伍建设、学科方向、科研平台等方面存在问题。现从区域社会经济发展和建设教学研究型大学两个方面,探讨了我校兽医学的学科地位。     

羊源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及毒力基因检测

为了调查内蒙古通辽市某羊场发病羊死亡的原因,对疑似致病菌进行分离、鉴定及部分生物学特性研究。对病死羊进行剖检,无菌条件下采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏等组织脏器进行细菌分离培养;对分离菌进行小鼠致病性试验、细菌生化检测、16S rDNA基因扩增及同源性比对分析和药物纸片扩散法敏感性试验。结果显示,分离菌株符合肺炎克雷伯菌生化特性;16S rDNA序列与GenBank中已登录的肺炎克雷伯杆菌序列同源性为99.59%;小鼠致病性试验结果表明分离株有较强的致死性;分离株携带多种毒力基因致病性较强。药敏试验结果表明分离株对诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、多西环素等药物高度敏感,对复方新诺明、卡那霉素等中度敏感,对庆大霉素、头孢哌酮、头孢氨苄等耐药。结果表明,分离株为肺炎克雷伯菌,是该羊场发病羊死亡的致病菌。     

CD163分子的研究进展

CD163分子是一种清道夫受体蛋白,由吞噬细胞表达,它参与机体多种免疫活动,对正常生理具有重要作用,也与某些疾病的发生发展联系紧密。本文就CD163分子的结构及功能作一介绍,以期对某些疾病的研究提供思路。