猪瘟PPA-ELISA和Dot-ELISA检测猪瘟抗体的比较及其应用

随着论断技术的快速发展,猪瘟的抗体检测方法也不断增多.血清中和试验、免疫琼脂扩散试验、对流免疫电泳、荧光抗体技术、聚合梅链式瓜等方法都已用于猪瘟的抗体检测,这些方法特异性强、敏感性高,但操作烦琐、费时,而且有些方法的技术和设备条件要求较高,在基层难以推广使用.尤其对于模化猪场大批样品的快速检测,更需要快速和操作简便的论断检测方法.酶免疫技术中的酶联免疫吸附试验(ELISA)被认为是目前检测猪瘟抗体较好的一种方法,该法简便、快速、敏感、特异快,并且试剂盒已商品化.因此我们选用了葡萄球菌A蛋白酶联免疫吸附试验(PPA-FLISA)和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)技术在规模化猪场进行了抗体检测的比较试验和实际应用.现将试验情况报告如下.     

纳米抗体在真菌毒素检测中的应用

真菌毒素是由真菌产生的次生代谢产物,给人类和禽畜健康造成严重危害,且其对农产品的污染 给全球经济造成重大损失。因此,控制毒素污染、毒素检测和降解的相关技术研发尤为迫切。目前农产品中真 菌毒素检测和大规模筛查的常用手段是以抗体为核心材料的免疫分析技术,相比于传统的单克隆 抗体和多克隆 抗体,新兴的纳米抗体具有体积小、易于体外表达、稳定性高等天然优势,因此其在真菌毒素检测技术研发中 广受重视。系统总结了黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇等常见真菌 毒素检测相关纳米抗体的研发进展,重点综述抗真菌毒素纳米抗体和抗独特型纳米抗体在酶联免疫吸附测定、 生物发光酶联免疫分析、电化学免疫传感器和荧光共振能量转移免疫测定等不同免疫分析方法中的应用。通过 比较不同检测方法中纳米抗体的半数抑制率、检测限和线性范围等性能参数,分析基于不同类型纳米抗体的检 测技术的优缺点。探讨新抗体研发难度大、检测毒素种类少等亟待解决的关键问题,指出纳米抗体和真菌毒素 结合机制分析、理性设计、定向进化、结合多肽的筛选和设计等前沿技术在纳米抗体设计研究中的重要方向, 以期 为进一步开发基于纳米抗体的真菌毒素检测技术提供思路。     

偏远农村散养户未免疫鸡新城疫抗体水平调查报告

通过对偏远农村及交通不便地区散养的固原鸡新城疫抗体水平的检测,发现其血清中含有一定量的鸡新城疫抗体,其中抗体阳性鸡180只,占检测鸡总数的62.5%。经过鸡新城疫疫苗加强免疫后,检测正常免疫鸡21只,平均抗体滴度为4.76log2,免疫保护率为61.9%,且抗体水平不整齐,达不到免疫保护作用。     

抗独特型抗体在小分子农药、真菌毒素免疫检测中的应用

小分子农药、真菌毒素免疫分析技术的发展,存在难以实现多残留检测、标准品昂贵且不易获得和检测灵敏度受限制等制约因素,而抗独特型抗体技术可以为这些问题的解决提供新的思路。文章阐述了抗独特型抗体的基本原理,该技术在小分子食品污染物免疫分析技术中的应用及优势,国内外在此领域的研究进展,以及该技术存在的制约因素与发展前景。     

动物疫病免疫试纸快速检测技术概述

概述了免疫试纸检测技术的原理,并分别从抗原和抗体2个方面简述免疫试纸检测技术的应用及在此方面取得的成就。     

纳米抗体技术及其在食品安全检测中的应用

骆驼科动物自然产生的仅由重链组成的抗体称为重链抗体,其中由单个可变结构域组成的称为重链抗体可变区(VHH),也被称为纳米抗体(Nb)。从生物学、免疫遗传学再到医学各个领域的潜在应用来说,纳米抗体具有常规抗体无可比拟的优点,可识别常规抗体不能识别的结构以及隐蔽表位。此外,它还具有高稳定性(耐高温、耐酸碱)、易表达等优点。这些优良特性可使其达到常规抗体无法实现的分析或诊断。因而,纳米抗体成为检测食品中非法添加剂、农药残留及农产品污染的理想抗体。主要论述纳米抗体技术以及在食品安全检测方面应用的最新进展和目前所面临挑战,为纳米抗体更好的应用于食品里的细菌和真菌毒素以及农药残留和农产品污染检测提供借鉴。     

不同鸭坦布苏病毒病疫苗免疫效果的比较

本研究选取鸭坦布苏病毒病弱毒疫苗(ZJ407-168株、WF100株)、灭活疫苗(ZJ407株、HB株)共4种疫苗,在实验室和鸭场对不同日龄的鸭进行免疫试验,并用间接ELISA法检测免疫后不同时期的抗体。抗体检测结果发现:弱毒疫苗免疫组在免疫后2周抗体阳性率就可达到100%,而灭活疫苗免疫组在免疫后4周抗体阳性率才达90%以上。但灭活疫苗免疫组抗体持续时间长,免疫后6个月抗体阳性率还能维持在90%以上,弱毒疫苗免疫组免疫后3个月抗体阳性率已下降至60%~70%。此外,灭活疫苗免疫组检测到的抗体D值离散差异小,而弱毒疫苗免疫组检测到的抗体D值参差不齐。本研究的结果表明,弱毒疫苗免疫组产生抗体比灭活疫苗免疫组要早14 d,但灭活疫苗免疫组检测到的抗体D值整齐,持续时间较长。上述结果可为临床防疫根据不同疫苗产生抗体的特点,合理使用疫苗,制定有效的免疫程序提供依据。     

谈抗体检测技术在动物疫病防控中的应用

从疫苗诊断、动物疫病监测、免疫质量评估、动物重大疫情预警、动物重大疫痛防控成效认证方面介绍了抗体检测技术在动物疫病防控中的应用,以期推广抗体检测技术,为动物疫病防控提供强有力的帮助。     

高母源抗体下仔猪猪瘟初免效果检测报告

在仔猪断奶时进行猪瘟的初次免疫是许多养猪场的习惯性做法.为了研究这一做法的实际效果,在某大型种猪场选择112头在3周龄断奶的仔猪,抽取血清,用猪瘟抗体ELISA试剂盒检测抗体,之后分为2组进行对比试验.免疫组按照常规做法在3周龄时初免猪瘟疫苗,对照组不进行猪瘟免疫,在随后的4、5、7周分别测定猪瘟抗体.结果表明,仔猪在3周龄时进行猪瘟初免并没有起到提高机体猪瘟免疫水平的作用;同时,发现高水平的猪瘟母源抗体在仔猪体内能维持较长时间.因此,可以适当推迟仔猪猪瘟的初免时间,以提高免疫效率,降低仔猪应激反应.     

H5亚型禽流感疫苗免疫效果研究

对大庆地区H5亚型禽流感油乳剂灭活疫苗免疫的两个蛋鸡场进行抗体消长情况的调查,了解生产实践中禽流感疫苗免疫工作方面存在的问题。应用血凝抑制(HI)试验跟踪检测免疫后鸡群的抗体水平。初次免疫后15d抗体达到保护临界值,28d抗体水平达到峰值,再次免疫后,抗体水平在一周上升到最高峰,二免有效期可达180d。两个鸡场的免疫效果比较理想,但存在着初免时间不确定和两次免疫间隔时间较长等问题。     

IBV抗体的银加强金标免疫技术检测

【研究目的】建立可在临床上检测鸡传染性支气管炎抗体的银加强金标免疫技术(SECGA);【方法】将胶体金标记纯化的兔抗鸡IgG,然后将IBV纯化抗原包被于NCM上(0.4ug/片),封闭后在膜片上滴加不同稀释度(10×2X)的血清,作用10分钟,洗涤后浸于1:4金标兔抗鸡IgG液中作用60分钟,再银染10分钟观察结果;【结果】SECGA能检出IB阳性血清的抗体>10×27,而不与ND、EDS76、IBD阳性血清发生有意义的交叉反应(抗体滴度<10×22)。对鸡IgG的最小检测量为0.88ng。用SECGA、气管环中和试验、ELISA试验检测IB抗体有明显的相关性;【结论】银加强金标免疫技术(SECGA)可用于IB抗体的检测,具有敏感、特异、简单、快速、适于现场诊断等优点,适宜于广大基层单位使用。     

猪蓝耳病和猪瘟疫苗免疫后抗体检测分析

[目的]仔猪在14日龄接种蓝耳病毒疫苗,25日龄接种猪瘟疫苗,检测接种蓝耳病疫苗和猪瘟疫苗后的免疫合格率。[方法]采用猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒检测抗体表达量。[结果]猪蓝耳病疫苗免疫3 d后,6.7%免疫个体为抗体阳性,免疫7 d后,26.7%免疫个体为抗体阳性,免疫14 d后,85%免疫个体为抗体阳性,免疫后30 d 100%免疫个体为抗体阳性;猪瘟疫苗免疫3 d后,13%免疫个体为抗体阳性,免疫7 d后,40%免疫个体为抗体阳性,免疫14 d后,58.3%免疫个体为抗体阳性,免疫30 d后,83.3%免疫个体为抗体阳性。[结论]仔猪在蓝耳病疫苗免疫3 d后抗体效价最低,30 d后免疫效果很好,接种猪瘟疫苗3 d后抗体效价最低,仔猪不足以抵抗病毒侵袭,虽然蓝耳病疫苗和猪瘟疫苗接种后30 d,抗体水平都达到了农业部规定的70%的标准,但是猪瘟疫苗免疫效果不能达到100%理想效果。     

不同来源PRRS灭活疫苗(NVCD-JXA1株)对仔猪免疫效果比较

[目的]研究PRRSV灭活疫苗(NVDC-JXA1株)的免疫效果。[方法]选择3个厂家生产的猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(NVDC-JXA1株),对28~90日龄仔猪进行免疫,观察免疫应激反应,监测抗体变化。[结果]不同厂家生产的疫苗免疫仔猪后,免疫副反应均较小,无过敏症状出现。南京天邦、内蒙金宇疫苗分别在免疫后14、90d检测到抗体,浙江易邦疫苗在免疫后14、60d检测到抗体。抗体维持时间为15~30d。同一厂家生产的疫苗免疫相同日龄仔猪,正常剂量、加倍剂量处理的抗体阳性率差异不明显。不同免疫日龄仔猪,抗体检出阳性率不同,55日龄以上仔猪的抗体产生早,抗体阳性率高。[结论]该研究为安徽地区猪蓝耳病疫苗的选择提供了参考。     

猪O型口蹄疫母源抗体消长规律及疫苗免疫的干扰作用

[目的]制定科学合理的免疫程序,从根本上控制仔猪O型口蹄疫的发生。[方法]采用ELISA抗体检测试剂盒对涪陵某规模化养殖场母猪和仔猪进行了母源抗体和免疫抗体检测。[结果]仔猪在10日龄左右抗体效价最高,平均效价为2.62。随着日龄的增长,仔猪母源抗体水平迅速下降至不完全保护水平。不同日龄首免仔猪口蹄疫疫苗免疫抗体检测结果表明母源抗体效价对试验猪的免疫应答有较大的影响。[结论]30～45日龄是仔猪接种FMD疫苗的最佳时间,这与母源抗体的消长规律相一致。     

陕西某规模化猪场主要疫病免疫抗体水平的评估与分析

为评估陕西某规模化猪场对当前主要疫病采取的疫苗免疫防控效果,应用ELSIA等方法对全场母猪群、公猪群及各年龄段商品猪进行了主要疫病抗体水平检测,对抗体阳性率、平均值等数据综合分析以期指导优化猪场防疫策略。检测结果发现：种猪群猪瘟、口蹄疫抗体阳性率均在80%以上,显示当前猪瘟和口蹄疫防疫措施和疫苗免疫效果良好。发现种公猪伪狂犬gE抗体阳性率高达67%,各阶段母猪伪狂犬gE抗体阳性率从60%～80%不等,显示猪群伪狂犬野毒抗体阳性率很高,野毒感染压力很大,是猪场安全运行重大风险。检测发现虽然免疫疫苗,但种猪蓝耳抗体阳性率在40%～80%之间,s/p在0.30～1.06之间,断奶后仔猪蓝耳抗体经历了全面转阴,100日龄又再次转阳现象。这种现象反映出母猪群蓝耳免疫保护率低,仔猪断奶后母源抗体消失归零后在育肥中期猪群又接触到了病毒发生转阳,这个过程也是影响猪场育肥平稳生产关键阶段,应该提前给与预防性措施或增加仔猪的疫苗免疫。     

两种检测猪伪狂犬病gB抗体方法比较

为评价化学发光免疫分析法在临床检测猪伪狂犬病gB抗体中的适用性,将其与IDEXX公司ELISA抗体检测方法进行比对试验.对110份猪血清进行猪伪狂犬病gB抗体化学发光免疫分析法与ELISA法的检测.结果显示,以ELISA法为标准,化学发光免疫分析法检测猪伪狂犬病gB抗体的灵敏度、特异性、符合率分别为98.31%、100%、99.10%,Kappa=0.96,说明化学发光免疫分析法与ELISA法的符合率较高,且其操作步骤更简便,更省时,可以用于临床猪血清样品的猪伪狂犬病gB抗体的检测.     

黑龙江地区某猪场抗体监测及免疫效果初步分析

为了解黑龙江地区某猪场疫苗的免疫效果,对黑龙江某猪场80份血清样品进行猪伪狂犬、猪瘟、猪蓝耳病抗体实验室检测。结果显示:伪狂犬gE抗体在6胎母猪50%,其他阶段抗体全部阴性。仔猪猪瘟抗体阳性率比较高,均为100%阳性。后备母猪、产过一胎到两胎的母猪,13周和16周仔猪蓝耳病抗体阳性率均较高,为100%。文章结合实际情况,提出了淘汰免疫缺陷种猪、准确注射、加强疫苗运输及保存冷链建设、购买优质疫苗、加强疫苗接种与免疫监测的有机结合等建议,以期为规模化猪场在选择疫苗及制定免疫程序时提供参考。     

抗体检测技术在猪疫病防控中的应用评价

随着我国经济的快速发展,人们生活质量水平随之不断提升,对猪肉制品的需求量也逐渐增加,生猪养殖面临着更大的市场需求和规模化发展条件。这一过程中做好猪疫病防控非常关键,直接关系着猪肉食品的安全保证和养猪业良好发展。随着抗体检测技术在中国的大力宣传和普及推广,猪疫病防控中抗体检测技术“用武之地”越来越广泛,不再局限于初步诊断疫病,也能够在疫病控制、免疫质量评估、疫情预警、疫病监测等诸多环节发挥重要作用。本文对如何在猪疫病防控中有效应用抗体检测技术展开应用评价。     

贵州省不同地区PRRS抗体监测及分析

采用繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒,运用ELISA试验,分别对贵州省贵阳、安顺、六盘水、兴义等市部分种猪场、规模场和散养户饲养的猪群604份血清样本进行PRRS抗体水平检测.免疫猪群中PRRS平均抗体阳性率为42.2%;非免疫猪群中PRRS平均感染抗体阳性率为34.0%.结果表明:不同地区血清PRRS抗体阳性率波动较大,在19.6%～81.8%;2008年比2007年存在PRRS的隐性感染的隐患更大.     

农药广谱特异性抗体制备技术研究进展

基于抗原-抗体特异性结合反应的农药免疫学检测技术的发展已经日趋成熟,能够帮助实现农药多残留免疫检测的广谱特异性抗体制备技术成为研究热点之一.本文介绍了农药广谱特异性抗体的原理及其常用的3种制备途径,包括选择共性结构半抗原制备抗体,独特型抗体和重组抗体.并对有机磷、拟除虫菊酯、氨基甲酸酯三大类农药的广谱特异性抗体制备及免疫多残留分析技术的研究现状作一综述.