两例犊牛慢性腹泻病的诊治

笔者采用白头翁散进行治疗犊牛慢性腹泻，例举了两个病例，分别治疗3天，2天后痊愈。证明白头翁散对治疗犊牛慢性腹泻具有较好作用。     

一起猪流行性腹泻病毒与博卡病毒混合感染病例分析

陕西渭南某猪场发生了一起仔猪腹泻病例,通过临床症状观察、病理解剖、细菌分离以及病原RT-PCR检测,确诊为一起流行性腹泻病毒混感博卡病毒病例。针对发病原因提出了防治措施,为防控仔猪腹泻提供参考。     

三维子宫组织的构建及形态学观察

本研究旨在体外构建含有3种细胞的三维子宫组织。体外成功分离和培养兔子宫内膜细胞和平滑肌细胞,将3代以内的平滑肌细胞以1×10^7/mL与3 mg/mLⅠ型鼠尾胶原和Matrigel（4∶1）的混合物混合,迅速接种在自制的模具中,置于37℃、体积分数5%CO2培养箱中待其凝固,以同样的方法接种1×10^7/mL子宫内膜基质细胞,待其凝固后接种上皮细胞悬液,将其置于37℃,体积分数5%CO2培养箱中培养。采用HE染色和免疫组织化学染色方法观察和鉴定三维子宫组织。结果表明,在体外成功地构建了含有3种细胞结构的类似于在体子宫组织的三维子宫组织;HE染色观察,在静态外力作用下,培养10 d的子宫组织细胞呈明显的按拉伸方向排列;细胞在细胞外基质中自由移动,上皮层呈弯曲状;免疫组织化学染色可以观察到具有3层细胞结构的子宫组织,弯曲的上皮层细胞呈柱状。可见子宫内膜细胞和平滑肌细胞能在细胞外基质中生长;建立了一套由3种细胞组成的类似于在体子宫组织结构的三维子宫培养体系;为胚胎植入机理的研究提供良好的体外模型。     

中西医结合治疗仔猪秋冬季腹泻

目的：观察中西医结合治疗仔猪秋冬季腹泻的疗效。方法：对照组肌注病毒唑和庆大霉素;治疗组在对照组基础上加用中药治疗。结果治疗组总有效率90％,高于对照组的72．5％,组间比较有非常显著性差异（P〈O．01）。结论：中西医结合治疗仔猪秋冬季腹泻疗效明显缩短病程,且安全有效。     

高职畜牧兽医专业“1234”人才培养模式探索--以咸阳职业技术学院畜牧兽医专业人才培养模式为例

为了适应咸阳当地畜牧业经济发展和市场需求，咸阳职业技术学院畜牧兽医专业作为陕西省的重点建设专业，近年来，在人才培养模式的构建方面进行了探索，在以定岗实习为突出特征的工学结合人才培养模式的大框架下[1]，初步形成了“一条主线，两本证书，三个系统，四业融合”的人才培养模式（简称“1234”人才培养模式）。     

陕西部分规模化猪场仔猪病毒性腹泻感染情况调查

为分析2018年陕西猪场猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒病的流行情况,研究采用RT-PCR对部分规模化猪场送检的162份腹泻样品进行检测。结果表明,PEDV、TGEV和PRV的阳性检出率分别为16.04%、10.49%和9.48%,总检出率占45.68%。其中1～5日龄哺乳仔猪阳性检出率最高,全年中冬季检出率最高27.78%。因此,陕西规模化猪场仔猪病毒性腹泻疾病的流行虽有所缓,但仍应加强全面防控防。     

猪流行性腹泻病毒通过miR-133c-3p/BCL2L2轴调控细胞凋亡

旨在探讨miR-133c-3p在猪流行腹泻病毒（PEDV）引起的细胞凋亡过程中所起的作用,并探讨其发挥作用的机制。以PEDV感染MARC-145细胞为模型,检测PEDV感染过程中细胞的凋亡情况以及6个与凋亡相关microRNAs的表达差异,RT-qPCR检测PEDV感染过程中与凋亡相关microRNAs的表达差异,合成miR-133c-3p的模拟物和抑制剂,转染MARC-145细胞,采用流式细胞术检测PEDV感染MARC-145细胞的凋亡情况,流式细胞术检测过表达和敲低miR-133c-3p后细胞的凋亡情况,采用生物信息学方法预测miR-133c-3p的靶基因,荧光素酶报告基因检测了miR-133c-3p和靶基因的结合情况,Western blot检测了过表达miR-133c-3p对BCL-w和PEDV蛋白表达水平的调控,用siRNA敲低BCL-w蛋白检测细胞凋亡情况。结果显示,PEDV的感染可以诱导MARC-145细胞凋亡（P<0.05）,与凋亡相关的microRNAs,如miR-133c-3p和miR-149-5p的表达上调（P<0.05;P<0.001）,miR-138-3p的表达下调（P<0.05）。其中,miR-133c-3p在病毒感染后升高了约5倍（P<0.01）。过表达miR-133c-3p后,细胞凋亡率显著升高（P<0.01）;敲低miR-133c-3p后,细胞凋亡率降低（P<0.05）。用生物信息学方法预测miR-133c-3p与BCL2L2的3'UTR区域有结合位点,荧光素酶报告基因试验显示miR-133c-3p可以和BCL2L2基因靶向结合（P<0.01）,过表达miR-133c-3p后细胞内BCL-w蛋白的表达明显下调,且病毒的感染可以降低BCL-w的表达水平,敲低BCL-w后细胞凋亡率显著升高（P<0.01）。PEDV感染后可以通过上调miR-133c-3p的表达来下调BCL2L2的表达,从而促进细胞的凋亡。     

兔关节软骨细胞的获取及培养

试验采用组织块法和酶消化法获取兔关节软骨细胞,并对这两种方法取得的效果进行对比分析。在酶消化方法上,运用Ham-F12培养液和无Ca2 、Mg2 的PBS液配制2g/L的Ⅱ型胶原酶进行消化,同时结合酶阶段性消化法收获软骨细胞,对细胞成活率进行测定。对最终收获的细胞进行培养观察,测定软骨细胞的分泌活性。结果表明:在获取细胞的数量上,酶消化法明显优于组织块法;在成活率比较试验中,Ham-F12配制组明显高于常规的PBS液(无Ca2 、Mg2 )配制组,两组之间存在显著差异(P<0.05);对体外培养的软骨细胞进行鉴定,结果显示软骨细胞仍具有较强的分泌基质能力。在此试验消化分离体系下,可得到大量的、高活性的软骨细胞,且在体外能维持良好的生长特性。     

猪博卡病毒1型nPCR检测方法的建立与\=SXWN20株基因序列分析

建立了检测猪博卡病毒1型（PBoV）的nPCR方法,对陕西省部分猪群PBoV1型感染情况进行流行病学调查。通过优化反应体系与条件,测试了方法的灵敏性和特异性,建立了PBoV1型nPCR检测方法,并对阳性样品进行测序分析。结果表明,建立nPCR方法检测PBoV1型单链DNA的极限为4.742×10^-2 ng/μL,该方法与PCV2、PCV3、PPV、猪链球菌和猪大肠杆菌DNA均无交叉反应,特异性良好。检测了陕西省猪场60份样品,PBoV1型阳性率为3.33%（2/60）。测序获得的SXWN20株VP1/VP2基因序列比对发现,SXWN20株与参比的PBoV1型毒株核苷酸同源性为96.6%~97.5%,与PBoV2/3/4/5型[JP]同源性仅为53.8%~59.7%。进化树分析显示,所有参比毒株分为3个大分支,SXWN20株与PBoV1型毒株处在一个进化分支,PBoV2型处在一个进化分支,PBoV3/4/5型处在一个进化分支。