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山羊皮肤组织细胞分离与培养的研究 总被引:11,自引:0,他引:11
本实验研究了山羊皮肤组织细胞的分离,培养,纯化方法和生长特征,获得了传统代培养的山羊皮肤上皮细胞与成纤维细胞,组织块贴附培养和分散单细胞接种培养均能获得原代山羊皮肤细胞。用150IU/mL胶原酶ITCM199液37℃下培养消化10h,可较好地分解组织块,产生接种浓度的分散单细胞。 相似文献
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分别用不同条件的电脉冲、酒精浓度刺激不同卵龄的小鼠卵母细胞,进行体外培养并观察卵母细胞的活化和体外发育情况。结果表明,①以场强55V/mm,脉宽160μs的电脉冲刺激卵龄为17h的卵母细胞,活化卵形成二原核率为90%;以场强55V/mm,脉宽640μs的电脉冲刺激卵龄为15h的卵母细胞,激活卵的桑椹胚最高发育率为69%.②用7%酒精刺激卵龄为15h的卵母细胞2min,活化率最高为72%,激活卵的桑椹胚发育率为22.2%. 相似文献
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以小尾寒羊、同羊、内蒙细毛羊作受体,根据季节设计不同的同期发情处理方法,繁殖季节设计三个组,(Ⅰ)栓+PG组,(Ⅱ)栓组,(Ⅲ)PG组。非繁殖季节设计四个组(Ⅰ)栓+PG组,(Ⅱ)栓+PMSG组,(Ⅲ)栓组,(Ⅳ)PG+PMSG组。结果表明:(1)在繁殖季节,同一处理品种间同期发情率及受体利用率之间差异不显著。但非繁殖季节,同羊和内蒙细毛羊同期发情率和受体利用率很低。选用小尾寒羊作受体比较理想。(2)单独使用阴道海绵栓或与其它激素配合诱导母羊发情效果优于用PG组或PG+PMSG组,在非繁殖季节使用孕激素诱导 相似文献
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牛卵母细胞的去核与激活 总被引:5,自引:0,他引:5
比较了Ionomycin(离子霉素)和乙醇及其与其他物质的组合激活牛卵母细胞的效果,并研究了去核时间、细胞松弛素B、末期去核等对去核效率的影响。结果表明,配合使用6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)或放线菌酮(CHX)可显著提高Ionomycin或乙醇激活牛卵母细胞的效率,Ionomycin+6-DMAP激活的牛孤雌胚在8/16细胞之后的发育率明显高于乙醇+6-DMAP(或CHX)。牛卵母细胞的去核在成熟培养20h或之前进行效果较好,此时有较高比率的卵母细胞中第一极体与染色体位置靠近。牛卵母细胞在不含细胞松弛素B的操作液中可进行去核,但所得核移植胚胎的卵裂率明显下降,而对8/16细胞胚之后的发育没有明显影响。牛卵母细胞的末期去核率显著高于中期,二者核移植胚胎的早期发育率基本相同。 相似文献
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以2~8细胞期鼠胚细胞为供体核,选用注射hCG后15h、17h的兔卵母细胞为受体胞质,施加1.6 kv/cm、160、两次脉冲的电场条件,间隔20min,融合液为含Ca、Mg的0.3mol/L甘露醇,适于鼠、兔种间EOBC的融合激活。小鼠2—细胞、4—细胞期胚细胞与兔去核卵母细胞融合率高于8—细胞期胚细胞,分别为83%、80%及62.5%,桑囊胚发育率差异不显著。体细胞共同培养系统和Taurine能显著提高鼠、兔核质杂交胚的体外发育能力。 相似文献
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山羊腔前卵泡的分离 总被引:9,自引:0,他引:9
采用两种方法分离山羊卵巢腔前卵泡。方法1(M-1):将卵巢剪成碎块(<3mm),用01%胶原酶消化处理,吸管吹打,离心洗去胶原酶并置入网筛内过筛后检卵。方法2(M-2):用组织切碎机将卵巢切成碎块,经吸管吹打制成的组织悬液置入网筛内过筛后检卵。将不同年龄山羊对称分成两组,M-1和M-2分离的腔前卵泡头均数分别为1164和1383个,其中正常卵泡比例分别为296%和274%,差异不显著(p>005)。采用M-1分离初情期前山羊腔前卵泡效果最佳,平均每只羊可获得16082个腔前卵泡,其中正常卵泡数平均为4936个;而在成年山羊则分别为3500和667个(p<001)。采用M-2分离成年山羊腔前卵泡头,其效果明显优于M-1(p<005)。 相似文献
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动物克隆的理论与实践 总被引:6,自引:0,他引:6
动物机体的大部分分化细胞具备全能性、成熟卵母细胞胞质中mRNA、蛋白质等母型信息能使注入其中的细胞基因发生再程序化,从而启动新个体的发育。供体细胞和受体卵母细胞的周期和功能状态的同步协调是实现重构胚正常发育的关键。克隆动物的成功受供体细胞、受体卵母细胞以及二者之间的相互作用等多个因素的影响,其中的许多规律还未被掌握,动物克隆的研究必将揭示这些生物学规律,显示其巨大的科学意义。 相似文献
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用Ⅰ型、Ⅳ型胶原酶消化分离兔皮肤细胞,Ⅰ型胶原酶消化皮肤块获得的细胞数显著高于Ⅳ型胶原酶。用组织块直接培养法,也可以得到皮肤的原代培养细胞。2.5g/L胰酶消化胎儿组织,可获得足够原代培养的细胞量。结合使用酶消化法和反复贴壁法,经2~3代后,可获得纯化的成纤维细胞。分离纯化的胎儿和皮肤成纤维细胞的生长曲线都正常且相似。胎儿和皮肤成纤维细胞可分别传至第13代与第11代,传代后染色体数目不变。 相似文献
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用FSH(以4种程序注射)配合LH和前列腺素对安哥拉山羊和奶山羊进行超排处理。结果表明:FSH各给予方式的超排效果间没有显著差异(P>0.05);安哥拉山羊对超排的反应弱于奶山羊(P<0.05);超排后回收的可用卵母细胞数显著高于可用胚胎数(P<0.01)。15-甲基PGF2α和氯前列烯醇对奶山羊的同期发情率基本一致;但二者从注射到发情的间期具有显著差异(P<0.05)。注射前列腺素的时间显著影响诱导发情效率,对奶山羊而言,在情期的8~16d内使用,效果确切 相似文献