鸡产蛋下降综合症（EDS_（－76））Z_（16）毒株的分离和鉴定

从５个爆发产蛋下降综合症的鸡场收集８０个样品中，分离到５株具血凝性的病毒，命名为ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）、Ｚ＿２、Ｗ＿４、Ｔ＿１和Ｔ＿３株。病毒大小７０～８０ｎｍ，无囊膜，二十面体对称；对氯仿不敏感，ｐＨ３～５下稳定，５０～６０℃１小时不被完全灭活；在ＤＥＦ细胞上繁殖能被ＩＵＤＲ抑制；经血凝抑制试验、琼扩试验和微量中和试验证实与ＡＶ—１２７株属同一血清型，鉴定为ＥＤＳ＿（－７６）病毒。ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）株能在鸭胚上繁殖，致死鸭胚，ＨＡ效价达２￣（１３）～２￣（１７），也能在鸭胚成纤维细胞上繁殖，产生ＣＰＥ，但ＨＡ效价仅有２￣７～２￣（１０）。初次分离ＥＤＳ＿（－７６）病毒选用鸭胚较佳，从生殖道分离成功率较高。     

鸭源新城疫病毒和减蛋综合征病毒在同一鸭胚中增殖的观察

用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体皮肤出血、淤血，绒毛尿囊膜水肿、增厚，尿囊液能凝集人和鸡红细胞．（２）尿囊液感染鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞，致细胞病变（ＣＰＥ），证实尿囊液中存在ＮＤＶ．用间接法Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ—７６病毒抗原，结果为阳性．（３）电镜观察经提纯浓缩后的尿囊液，可见到两种病毒粒子：ＮＤＶ形态不一，多数直径约１２０～１３０ｎｍ或更大．有囊膜；ＥＤＳ—７６病毒呈圆形，直径约７０ｎｍ，有囊膜．（４）用血凝试验（ＨＡ）测定两种病毒．其生长规律与单独接种时一致．（５）接种灭活的含毒尿囊液的雏鸡，在血清中出现抗两种病毒的ＨＩ抗体及抗ＥＤＳ－７６病毒的中和抗体，对ＮＤＶ强毒攻击有坚强的免疫力。     

减蛋综合征病毒单克隆抗体的生物学特性鉴定

该研究在建立分泌减蛋综合征病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的基础上，鉴定了１０株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体（４Ｂ１，１Ｄ４，２Ｄ６，３Ｄ６，２Ａ１，３Ａ５，３Ｃ６，３Ｃ１，１Ｂ３和２Ｃ５）和生物学活性，这１０株杂交瘤细胞分泌的抗体有高度的特异性，只特异地作用于减蛋综合征病毒，微量血凝抑制试验（ＨＩ）发现４Ｂ１，３Ｃ１，２Ｃ５和３Ｃ６有血凝抑制活性，腹水效价分别为２４（ｌｏｇ２），４（ｌｏｇ２），７（ｌ     

兔出血症病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析

通过ＥＬＩＳＡ迭加试验对５株抗兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的抗原表位进行了分析。抗体反应增值结果表明，６株单抗分别针对３类不同的抗原决定簇。ＣＧ４－１、ＣＨ３－１和ＡＡ８－１针对病毒结构多肽上的同一决定簇，ＣＦ２－１和ＲＭ－１７针对另一决定族，而ＲＭ－１４针对第３种决定簇；其识别表位可能与ＡＡ８－１非常接近。单抗的识别表位与其生物学活性密切相关。     

EDS_（76）病毒株生物学特性的研究

本试验对２株ＥＤＳ７６病毒进行了培养特性，理化特性，感染性和血清学相关性研究。结果表明，Ｂ４株和Ｎ３株在鸭胚中生长最佳，可使鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ），鸡胚肝细胞（ＣＥＬ）产生细胞病变。在理化特性和感染性方面，Ｂ４株可抵抗５６℃６０ｍｉｎ、６０℃２０ｍｉｎ，ｐＨ３、ｐＨ１０作用和０．０２５％甲醛溶液灭活，对ＤＥＦ、ＣＥＬ的感染滴度ＴＣＤ５０为１０６．５０，１０５．７８；Ｎ３株可抵抗５６℃１５０ｍｉｎ、６０℃６０ｍｉｎ，ｐＨ２、ｐＨ１１作用和０．１％甲醛灭活，对ＤＥＦ、ＣＥＬ的ＴＣＤ５０为１０７．５６、１０６．３０。Ｂ４株和Ｎ３株的血清学关系相同，并与标准毒株ＡＶ１２７一致。本研究发现，Ｂ４株和Ｎ３株之间在理化特性和感染性方面存在差异。     

鸡传染性支气管炎（IB）诊断方法的研究

本试验用鸡胚大量繁殖鸡传染性支气管炎病毒,收集尿囊液,用１％胰蛋白酶处理制备ＩＵＢＶ血凝抗原,建立了血凝－血凝抑制检测ＩＢＶ抗体的方法,其特异性强,操作简便。另外,本试验建立Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法用于检测ＨＢＶ,病料经处理后,点样于硝酸纤维素膜,加兔抗ＩＢＶ抗体,经ＰＰＡ－ＤＡＢ－Ｈ２Ｏ２显色,其检测结果与双抗体夹心ＥＬＩＳＡ的检测结果一致。     

新疆棉铃虫性信息素的电生理研究

以新疆喀什和库尔勒的棉铃虫为研究对象,利用触角电位记录技术,测定棉铃虫对标准化合物Ｚ１１－１６：ＡＬＤ、Ｚ９－１６：ＡＬＤ、Ｚ１１－１６：ＡＬＤ、１６：ＯＨ、Ｚ１１－１６;ＡＣ的ＥＡＧ反应,发现这些标准化合物均能引起ＥＡＧ反应,其中Ｚ１１－１６;ＡＬＤ能引起最强的ＥＡＧ反应;Ｚ９－１６：ＡＬＤ引起的ＥＡＧ反应次之,由此认为Ｚ１１－１６,ＡＬＤ,Ｚ９－１６：ＡＬＤ反应中,发现在羽化后的前３ｄ棉铃虫对     

陕西关中地区EDS－76病毒的分离与初步鉴定

采用鸭胚传代的方法，首次从陕西省关中地区ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体阳性鸡群的卵巢和输卵管中分离到１株病毒，经血凝与血凝抑制试验、电镜现实、乙醚和氯仿的敏感性试验、核酸型鉴定试验及回归动物试验等，鉴定该分离物为ＥＤＳ－７６病毒。从病原学上证实陕西省已有该病的发生与流行     

兔出血症病毒主要结构多肽的纯化及免疫保护性试验

人工感染ＲＨＤＶ－ＮＪ株病死兔肝经－５０℃反复冻融,氯仿处理,ＰＥＧ沉淀、差速离心,Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ柱层析得纯化病毒,纯化ＲＨＤＶ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＣｕＣｌ２负染色后,切取主要结构多肽ＶＰ１（６４．５ＫＤ）凝胶带,除去ＣｕＣｌ２和ＳＤＳ获得ＶＰ１,高效液相色谱鉴定只有一个蛋白峰,Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔｔｉｎｇ,ＨＡ和ＨＩ结果显示纯化ＶＰ１具有良好的抗原表位稳定性。无母源抗体的３月龄兔１     

侵染绿花椰菜的黄瓜花叶病毒（CMV）研究

从杭州市郊菜园表现严重花叶、矮化症状的绿花椰菜病株上获得一病毒分离物Ｃ－９３１。汁液摩擦接种６科２１种植物，Ｃ－９３１可侵染其中的６科１９种；体外抗性测定表明Ｃ－９３１的稀释限点（ＤＥＰ）为１０￣（－２），致死温度（ＴＩＰ）为５５－６０℃，２５℃体外存活期（ＬＩＶ）为４ｄ；提纯病毒粒体球形，平均直径２８ｎｍ；在琼脂双扩散反应中Ｃ－９３１能与ＣＭＶ抗血清呈阳性反应；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其衣壳蛋白亚基分子量为２９ｋＤ；用ＣＦ－１１纤维素柱提取受侵植物组织中ｄｓＲＮＡ，电泳鉴定表明共有５个核酸组分，长度（ｋｂ）分别为３．３，３．０，２．２，０．９和０．３５．根据上述性状，Ｃ９３１被鉴定为黄瓜花叶病毒，且该分离物含卫星ＲＮＡ。     

第二讲 MINITAB命令概述（续）

（指数）。（２）比较运算符：＝（或ＥＱ）、￣＝（或ＮＥ）、＜（或ＬＴ），＞（或ＧＴ）、＜＝（或ＬＥ）、＞＝（或ＧＥ）。（３）逻辑运算符：逻辑与＆（或ＡＮＤ）、逻辑或｜（或ＯＲ）、逻辑非￣（或ＮＯＴ）。（４）函数：在ＬＥＴ命令中可以使用的函数见表２－３所示。在ＬＥＴ命令中使用函数时，函数的参数必须用括号括住。（５）下标：可以在列变量后使用下标，如Ｃ１（３），代表Ｃ１的第三行的值。（６）在ＬＥＴ命令中运算符的优先级为：［下标］［函数］［］［！］［＊／］［＋－］［比较运算符］［＆］［｜］。例如：ＬＥＴＣ１（３）＝４＃将Ｃ１的第三个值改为４；ＬＥＴＣ４＝（Ｃ１－ＭＥＡＮ（Ｃ１））２；ＬＥＴＫ２＝ＳＵＭ（ＡＢＳＯ（Ｃ１－ＭＥＡＮ（Ｃ１）））：ＬＥＴＣ５＝（Ｃ１〈５）＋１；ＬＥＴＣ６＝（Ｃ１＜０｜（Ｃ２＝’＊’）；注意：在ＬＥＴ命令中不能用矩阵作参数。表２－３ＬＥＴ命令可以使用的函数２．加法由于ＭＩＮＩＴＡＢ的赋值运算命令不能以矩阵作为参数，所以ＭＩＮＩＴＡＢ还提供了专门用于加、减、乘、除运算的命令。加法命令为ＡＤＤ，可以对列变量、常数、存储常量或矩阵进行加法运算，其使用格式为：ＡＤＤＥ，．．．，ＥｐｕｔｉｎｔｏＥ其中     

鲍氏不动杆菌MF1株的粘附特性

取从患病鳜鱼体内分离到的鲍氏不动杆菌 Ｍ Ｆ１株和３株 Ａ Ｔ Ｃ Ｃ不动杆菌参考株做血凝试验（ Ｈ Ａ）,１３种不同动物的红细胞对４株不动杆菌的血凝特性分析结果表明,鲍氏不动杆菌（ Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍ ａｎｎｉｉ） Ｍ Ｆ１株能凝集人 Ｏ 型血以及鸡、鼠、绵羊、鲢、黄鳝等５种动物的红细胞, 不凝集鳜、罗非鱼、鲫、团头舫、鲤、欧洲鳗、鳙的红细胞, 且该种血凝不能被甘露糖抑制; 其它３株 Ａ Ｔ Ｃ Ｃ参考菌株对１３种红细胞均不能发生凝集。４株不动杆菌的粘附实验表明, Ｍ Ｆ１株可以粘附 Ｈ Ｅｐ２细胞, 每细胞粘附菌在２０个以上, 菌体粘附于细胞四周; ３株 Ａ Ｔ Ｃ Ｃ不动杆菌参考株对 Ｈ Ｅｐ２细胞不具粘附特性。以上４株不动杆菌对 Ｅ Ｐ Ｃ细胞 （鲤鱼乳头状上皮瘤细胞系） 均无粘附性。     

新型伪狂现病毒基因缺失株的构建

以伪狂犬病病毒Ｆａ株为起我建;的ｐｐ６３ＬａｃＺ转移载体质粒与ＰＲＶ Ｆａ ＤＡ经磷酸钙转染,在ＭＤＢＫ细胞内同源重组获得ＰＲＶ Ｆａ ｇＥ／ｇｉ＾－／ＬａｃＺ基因缺失株。以ＰＤＴＫ３－６,５－６ＴＫ缺失质粒与上述基因缺失株在ＴＫ＾－１４３细胞内同源重复且,获得ＰＲＶ－ＳＡ２１５等三基因缺失株。经核酸杂交证实构建是成功的。生物学特性观察显示,该基因缺失株对多种动物安全,具有良好的免疫原性,有望成为     

减蛋综合征贵州分离毒全基因组探针的制备及检测

为准确检测鸡群中减蛋综合征病毒感染情况,从减蛋综合征病毒（ＥＤＳ）贵州分离毒株ＨＳ－１中提纯病毒ＤＮＡ后,用地高辛标记制备了全基因组探针。在Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ中该探针不与正常鸭胚尿囊液核酸提取物及马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＤＮＡ发生反应,只与３株ＥＤＳ病毒（国际标准毒ＡＶ－１２７、贵州分离毒ＨＳ－１、南京分离毒（ＧＣ２）ＤＮＡ呈阳性反应,具有较高的特异性;可检测出３０ｐｇ的同源ＤＮＡ,具有较强的灵敏度     

新颖抗猪流行性腹泻免疫制剂

以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心纯化，获得结构较为完整的病毒颗粒，病毒ＥＬＩＳＡ效价为１：３×１０＾５，蛋白含量为３．９６ｍｇ／ｍＬ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ筛选并进行３次再克隆，阳性率达１００％，共获得１５株能稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。其染     

肉鸭预混料配方筛选试验报告

选８０只樱桃谷肉用仔鸭，对４种（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ）０～１４日龄和８种（Ａ１、Ａ２、Ｂ１、Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２）１５～４２日龄肉鸭预混料作对比试验。结果表明：（１）０～１４日龄，Ｂ料增重５８４．９±５６．９ｇ／只，优于Ｃ料（Ｐ＜０．０１）、Ａ料（Ｐ＜０．０５）和Ｄ料（对照组，Ｐ＞０．０５）；（２）１５～４２日龄，Ｂ１料增重２４３７．５±１８０．４ｇ／只，Ａ２料增重２４１０±３１２．７ｇ／只，优于对照组Ｄ１等其他６种供试料，但差异不显著（Ｐ＞０．０５）；（３）除去饲料成本每只鸭毛利，两阶段配方组合Ａ－Ａ２、Ｂ－Ｂ１比对照组Ｄ－Ｄ１分别高１．１６元／只和０．８７元／只，为本次试验筛选出肉鸭最佳预混料配方。     

禽网状内皮细胞增殖病病毒感染鸡的外周血白细胞动态变化

３２只１日龄ＳＰＦ鸡随机分为３个试验组和１个对照组。试验组分别腹腔拉种３株禽肉状内皮组织增殖病病毒（ＲＥＶ－Ｔ,ＲＥＶ－ＤＩＡ）和ＲＥＶ－Ｃ４５）,０．５ｍＬ／羽,对照组注射等量生理盐水。在不同时期检测感染鸡外周血白细胞数的动态变化。结果发现,各试验组鸡的白细胞总数和异嗜性白细胞百分率及总数均呈先升高后降低的趋势,淋巴细胞百分率先降低后升高,而淋巴细胞总数则在接种后第３天显著高于对照组,第１０天起     

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｖ４株的毒价、血凝（ＨＡ）稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶＶ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０－８．３～１０－１０．１／０．１ｍＬ，２５℃存放２８ｄ、３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种、６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００，ＭＤＴ＞１５０ｈ     

马传染性贫血病病毒L株前病毒全基因组核苷酸序列分析

 本实验所用的马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）Ｌ株（ＥＩＡＶ－Ｌ）是我国研制成功的ＥＩＡＶ弱毒疫苗的原始强毒株。以ＥＩＡＶ－Ｌ感染马外周血液白细胞中ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术，分４个片段扩增ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒ＤＮＡ，并分别克隆到载体质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ中，得到 ４个重组质粒ｐ２．８、ｐ２．４、ｐ３．１和 ｐ１．２，经酶切鉴定后测序。对测序结果分析、拼接，得到 ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全序列。ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全长 ８２３５ｂｐ，其中 Ｇ＋Ｃ含量为 ３８％。通过使用计算机软件ＤＮＡＳＩＳ分析，ＥＩＡＶ－Ｌ与马传贫驴强毒和马传贫驴白细胞疫苗毒序列同源性分别为９８．４％和９６．９％。同源性如此接近反映了它们之间的亲缘关系，另外 ＥＩＡＶ－Ｌ与驴强毒的同源性高于其与驴白细胞弱毒疫苗株的同源性，这符合驴白细胞弱毒疫苗株的衍生过程。基因组两端是长为３１６ｂｐ的ＬＴＲ，其中Ｕ３为１９７ｂｐ，Ｒ为８０ＢＰ，Ｕ５为３９ｂｐ。前病毒基因组有 ３个较大的开放阅读框架（ＯＲＦ），分别编码 ｇａｇ、ｐｏｌ和 ｅｎｖ基因。ｇａｇ基因位于 ７１３～１９１２位碱基之间，全长１２００ｂｐ；ｐｏｌ基因位于 １７０８～５１０９位碱基之间，全长     

抗小鹅瘟病毒中和性单克隆抗体研制及实验防治效果

用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗体。这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应。腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０－５～１０－７，琼扩沉淀效价达１∶２０～１∶５１２，鹅胚中和效价达１∶３０～１∶１２２，鹅体中和效价为１∶５４～１∶９６。ＧＰＡ１和ＧＰＣ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良好防治效果。