不同处理对丰水梨离体叶片不定芽再生的影响

采用多因素组合试验设计,研究了噻重氮苯基腺(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)浓度组合、外植体类型、叶片放置方式、暗培养时间以及乙烯抑制剂AgNO3处理等因素对丰水梨离体叶片再生体系建立的影响.结果表明,NN69 TDZ 2.0 mg·L-1 IBA 0.1 mg·L-1处理的叶片再生频率和再生芽数分别达到86.7%和2.92,为丰水梨最佳培养基与植物生长物质组合.同一叶片的基部和中部比顶端更容易产生愈伤并再生形成不定芽.叶片远轴面向下接触培养基比近轴面向下利于叶片不定芽再生.AgNO3质量浓度在0.1～1.5 mg·L-1范围内对离体叶片再生有显著促进作用, NN69 TDZ 2.0 mg·L-1 IBA 0.2 mg·L-1 AgNO3 1.0 mg·L-1以及NN69 TDZ 1.5 mg·L-1 IBA 0.3 mg·L-1 AgNO3 0.1 mg·L-1使丰水梨叶片再生频率均达到100%.     

结球白菜高效离体子叶不定芽再生的研究

以2个日本优质结球白菜爱知结球白菜(C1)和新理想白菜(C2)的子叶为外植体,研究了不同激素配比、AgNO3浓度和苗龄对不定芽再生的影响.结果表明,与6-BA相比,TDZ对子叶不定芽再生的效果更好.在MS+0.5 mg·L-1 NAA+1 mg·L-1 TDZ培养基中,2个品种的子叶不定芽再生率分别达到75.0%和55.0%.在此基础上,添加5 mg·L-1 AgNO3时,C1和C2子叶不定芽再生率分别达到96.7%和80.0%,并以5～8 d为子叶不定芽再生的最佳苗龄.     

明水梨叶片不定芽再生体系的建立

以‘明水’梨(Akemizu)叶片为外植体,研究了不同基本培养基,不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)的组合,不同暗培养时间以及不同浓度的硝酸银(AgNO3)对梨叶片不定芽再生的影响。试验结果表明,在NN69+TDZ 1.5mg/L+IBA0.2 mg/L+AgNO31.0 mg/L中暗培养25 d后,叶片不定芽再生率最高,达到71.8%。     

哈密大枣叶片不定芽再生体系研究

建立哈密大枣叶片离体再生体系,为遗传转化奠定基础.采用哈密大枣叶片为外植体,研究基本培养基、激素浓度、暗培养时间、AgNO3等因素对离体叶片不定芽诱导的影响,并获得再生植株.MS、NN69、WPM三种培养基相比较,NN69更适合做为诱导愈伤组织的基本培养基;TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于 BA;再生培养基中添加1 mg/L AgNO3对不定芽的形成有显著的影响（P ＜0．05）;培养初期经过2周避光培养更有利于提高再生效率;采用10 mg/L维生素 C浸泡15 min可以防止褐化,并能提高不定芽再生率;培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或者维生素C,不定芽再生率无显著提高（P ＞0．05）;培养基添加活性炭（AC）会抑制外植体的分化.叶片在 NN69＋1．0 mg/L TDZ＋0．20 mg/L IBA＋AgNO31．0 mg/L培养基上,暗培养2周后转入光照培养,出芽外植体转入 MS＋1 mg/L 6GBA＋0．20 mg/L IBA 不定芽再生效果最好.不定芽生长至3 cm 以上时,转至0．40 mg/L IBA的1/2MS培养基上进行诱导生根.     

现代月季离体再生植株影响因素研究

以14个现代月季(Rosa hybrida)品种为试验材料,研究基因型、外植体、激素、暗培养及AgNO3对植株再生的影响。结果表明,基因型是影响植株再生的最重要因素,14个现代月季品种中10个品种再生出不定芽,其中Ambiance不定芽分化率最高,叶片为21.05%,叶柄为45.59%;TDZ与IBA激素配合对月季再生的影响比6-BA与NAA激素配合明显;适宜Ambiance叶片再的生最佳培养基为MS+IBA 0.1 mg.L-1+TDZ 1.5 mg.L-1;适宜Ambiance叶柄再生的最佳培养基为MS+IBA 0.05 mg.L-1+TDZ 1.5 mg.L-1;暗培养对提高诱导再生影响效果不明显,但暗培养时间太长将降低诱导率。低浓度AgNO3可提高月季叶片和叶柄不定芽的再生,AgNO3浓度为5 mg.L-1时最利于再生,随着浓度的增加,则会严重抑制月季不定芽分化。     

梨矮化砧优系'青砧D1'叶片离体培养再生体系的建立

"青砧D1"是青岛农业大学选育的一个梨矮化砧优系.本试验研究了不同浓度的TDZ、6-BA、IBA及IAA配比对"青砧D1"叶片离体再生培养的影响,从而为该砧木的快速繁殖和应用推广奠定基础.结果表明:MS培养基中附加适宜浓度和配比的6-BA与IBA能提高初代培养外植体的成活率,以6-BA 1.0 mg·L-1与IBA 0.1 mg·L-1浓度配比的外植体成活率最高,达86.3%.NN69培养基中附加不同浓度的TDZ与IBA或IAA能有效地诱导叶片外植体不定芽再生,以TDZ和IBA配合诱导产生不定芽的外植体比例高,在TDZ 4.0 mg·L-1与IBA 0.3 mg·L-1配比组合下可达到100%,但平均外植体再生芽数为3个,低于TDZ与IAA配比组合(3.9个/外植体).在所试的不同浓度TDZ与IAA配比组合中,外植体不定芽诱导率最高仅为68%.MS培养基中附加6-BA 1.0 mg·L-1和IBA 0.2 mg·L-1时芽增殖系数最高,达4.42.在1/2 MS培养基中附加IBA 0.3 mg·L-1时生根率最高,达87.3%,移栽成活率达95%.     

海棠花离体繁殖技术研究

以海棠花组培苗和叶片为材料,应用正交试验法,以MS培养基为基础,分别加入不同浓度配比的6-BA/IBA组合和TDZ/IBA组合作为增殖培养基和叶盘不定芽再生培养基,研究了不同植物激素及其配比对组培苗增殖、叶片不定芽再生的影响。结果表明:在添加6-BA 1.0mg.L-1+IBA 0.1mg.L-1的MS培养基上最适宜海棠花组培苗的增殖及生长,增殖倍数高达8.11,海棠花组培苗平均高度达2.14cm;在添加TDZ 1.0mg.L-1+IBA 0.5mg.L-1的MS培养基上叶再生效率最高,再生效率为100%,每叶平均再生芽数为6.73。     

鄂梨2号叶片高效再生体系的建立

以早熟砂梨品种鄂梨2号组培苗叶片为外植体,建立叶片再生体系。结果表明,鄂梨2号叶片再生不定芽最佳培养基为NN69+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA,愈伤组织再生率达到100%,不定芽再生率为36.67%;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,增殖系数为2.19;不定芽在1 000mg/L ABT中浸蘸5 s后接种在添加500 mg/L活性炭的1/2MS培养基上,生根率最高,为66.67%;试管苗移栽成活率为84.44%。     

若光梨叶片诱导不定芽的研究

以NN69为基本培养基,附加TDZ 1.0 mg/L、IBA0.15 mg/L、AgNO30.1 mg/L,处理若光梨叶片,暗培养21 d,再于光照条件下培养30 d,获得不定芽和再生植株,再生频率为63.2%.     

不同培养条件对蝴蝶兰离体叶片不定芽发生的影响

以蝴蝶兰品系RSW1离体叶片为外植体,探讨了基本培养基、6-苄基腺嘌呤(6-BA)和噻重氮苯基脲(TDZ)、暗培养时间及叶片生育期对叶片不定芽发生的影响.结果表明,基本培养基以MS、1/2MS最为适宜,改良Knudson C(改良KC)不利于不定芽发生.TDZ诱导不定芽发生的效果好于6-BA,1.5 mg·L-1 TDZ对蝴蝶兰叶片不定芽诱导率最高,达到60.9%.适当时期的暗培养有利于不定芽的发生,以暗培养21 d效果最好,不定芽诱导率达到74.5%,分化系数达6.90.选择生育期45 d左右的叶片作外植体,可获得较高的不定芽诱导率和分化系数.     

罗汉果叶片离体再生快繁技术

以罗汉果叶片为外植体,探讨不同培养方式、不同激素组合对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,以期建立起稳定高效的罗汉果叶片离体再生快繁体系.结果表明:罗汉果叶片在培养基MS+BA 1.0 mg/L+IBA 0.7 mg/L上培养4周,愈伤组织的诱导率在90%以上;罗汉果愈伤组织在培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+TDZ 0.1 mg/L上不定芽的分化率可达70%,平均出芽指数达3.7;罗汉果试管苗在培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L上芽增殖比较稳定,在培养基MS+IBA 0.1 mg/L上培养2周开始分化不定根,生根率在90%以上.     

砀山酥梨叶片培养和植株再生

以砀山酥梨叶片为外植体,首次系统地研究了基本培养基、植物生长调节剂、碳源、暗培养时间和琼脂用量等对其再生不定芽的影响。结果表明,砀山酥梨叶片再生不定芽的适宜组合为NN69 6-BA 2.5 mg.L-1 IBA 0.3 mg.L-1 山梨醇20 g.L-1 琼脂8.0 g.L-1,暗培养20 d。叶片再生频率最高为83%,平均再生芽数2.17。叶片再生苗在生根培养基1/4 MS IBA 0.5 mg.L-1 NAA0.3 mg.L-1 蔗糖20 g.L-1 琼脂6.0 g.L-1上已经生根。     

五种菊花近缘植物组织培养研究

以紫花野菊变种、纪伊潮菊、龙脑菊、那贺川野菊和矶菊5个菊花近缘种属植物无菌苗为试材,进行了茎段离体快繁体系和离体叶片不定芽再生体系研究.结果表明:最佳茎段增殖培养基分别为:紫花野菊变种,MS+1.0 mg·L-1 6-BA+(0.05～0.10)mg·L-1 IBA;纪伊潮菊,MS+2.0 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;龙脑菊,MS+0.5 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;那贺川野菊,MS+1.0 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;矶菊,MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA.紫花野菊变种、纪伊潮菊、龙脑菊、那贺川野菊试管苗适宜生根培养基是1/2MS;矶菊试管苗适宜生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1 NAA.5个材料试管苗离体叶片愈伤组织诱导率均较高,但不定芽的诱导率则因基因型而异,仅那贺川野菊和矶菊能诱导出不定芽.那贺川野菊在MS+0.5 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA培养基上不定芽的再生率和增殖系数均最高,分别为75.0%和3.4;而矶菊在MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA培养基上的不定芽再生率和增殖系数最高,分别达80.0%和5.8.     

外源激素配比对樱桃叶片再生体系的影响

为解决樱桃大规模生产实践中扦插繁殖系数低的限制,建立樱桃组织培养快繁体系,基于正交实验设计研究3种外源激素配比(BA、TDZ和IBA)对樱桃叶片离体再生过程中出愈率、出芽率及组合愈伤组织中可溶性蛋白含量的影响。结果表明:BA 2.0 mg.L-1对樱桃叶片出愈率和出芽率有显著影响。TDZ和IBA对樱桃叶片再生体系建立影响不显著。不同激素之间对叶片出愈率的作用效应大小为:BA>IBA>TDZ;不同激素之间对叶片出芽率的作用效应大小为:BA>TDZ>IBA。诱导叶片高频再生体系最适培养基为组合13:MS+BA 2.0 mg.L-1+TDZ 1.0 mg.L-1+IBA 0.7 mg.L-1,其诱导叶片愈伤组织可溶性蛋白含量高达21.17 g.L-1。试验表明,组合13为樱桃叶片再生体系建立筛选出的最佳激素配比。     

葡萄砧木99R再生体系的建立

以99R葡萄无菌苗叶片、叶柄和茎段为外植体诱导不定芽再生,在MS培养基中附加不同浓度的6-BA与IBA、TDZ与IBA、6-BA与2,4-D组合。结果表明,叶片和叶柄较适宜的再生培养基为MS 5.0 mg/LBA 0.1 mg/L IBA,再生率分别为40.54%和50.00%,茎段适宜培养基为MS 2.0 mg/L BA 0.02 mg/L IBA,再生率达62.50%;一定时间的暗培养处理利于99R葡萄不定芽再生,3周为最适暗培养时间;不同节位外植体不定芽再生率随叶片节位下降而降低;卡那霉素浓度>3.0 mg/L时显著抑制叶片不定芽的发生,头孢霉素浓度<300 mg/L对叶片再生不定芽影响很小。     

酿酒葡萄“赤霞珠”叶片和叶柄离体再生系统建立的研究

以赤霞珠叶片、叶柄为材料,研究了细胞分裂素(TDZ)、不同基本培养基、叶柄砧有无对其不定芽再生的影响。结果表明:TDZ对赤霞珠离体叶片、叶柄不定芽再生有诱导作用,对叶片、叶柄的最高诱导率分别为18.06%和28.57%;叶片再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L,叶柄再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.01mg/L,叶片不定芽生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+20g/L蔗糖。     

六月酥梨叶片培养和植株再生

以六月酥梨叶片为外植体,研究了基本培养基、不同质量浓度BA和IBA的组合、不同暗培养时间、不同碳源种类和质量浓度、叶片放置方式和乙烯抑制剂AgNO3处理等因素对六月酥梨叶片再生体系的影响。结果表明,六月酥梨叶片再生芽的适宜组合为NN69+BA 5.0 mg/L+IBA 0.3 mg/L+山梨醇40 g/L+琼脂7 g/L,远轴面向下,暗培养30 d。在适宜条件下,六月酥梨叶片再生频率高达83.3%,平均再生芽数为2.84。不同碳源种类和质量浓度对六月酥梨叶片再生有不同的影响,其中40 g/L山梨醇对叶片不定芽诱导效果显著。硝酸银质量浓度为0.1~1.0 mg/L时六月酥梨叶片再生频率高于对照,但无显著差异;当硝酸银质量浓度为2.0 mg/L时,显著降低了叶片再生频率。叶片再生苗在生根培养基1/2MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L,暗培养5 d,生根率为50%,平均生根数为3.33。     

TDZ与6-BA对魔芋不定芽诱导的效应研究

为了建立魔芋离体培养高效再生体系,研究了TDZ与6-BA对魔芋不定芽分化的效应。结果表明:(1)单独使用TDZ和6-BA或6-BA与TDZ、6-BA与NAA组合均能诱导魔芋愈伤组织分化形成不定芽,且TDZ与NAA组合有利于魔芋不定芽的分化,当培养基中激素配比为TDZ 1.0mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1时,不定芽分化率可高达96.15%;(2)TDZ或TDZ与NAA组合对魔芋不定芽数量的增加非常有效,增殖系数显著高于单独使用6-BA或6-BA与NAA组合,培养基中TDZ为1.0mg·L-1时增殖系数最高,可达15.78。(3)相比于激素6-BA,TDZ更易于导致不定芽的白化现象,最高白化率可达28.37%,而培养基中NAA的适当添加,可在很大程度上降低魔芋不定芽的白化。TDZ 1.0mg·L-1与NAA 0.1mg·L-1配比,不定芽白化率降至7.56%,6-BA 2.0mg·L-1与NAA 0.1mg·L-1配比不定芽白化率为0。(4)TDZ对魔芋不定芽的伸长生长表现出较强的抑制作用,而6-BA对不定芽的伸长生长则表现出较好的促进作用,可见在继代培养中使用6-BA更有利于魔芋不定芽的伸长生长。     

辣椒枣试管苗叶片再生植株研究

以辣椒枣(Ziziphus jujuba Mill.)组培苗叶片为试材,研究了不同培养方式、接种方式以及不同生长调节剂对离体叶片诱导不定芽再生的影响。结果表明,适当的暗处理有利于辣椒枣叶片愈伤组织的形成,并能促进愈伤组织尽快形成芽点,有利于缩短叶片再生培养时间;叶片反放便于愈伤组织及芽点的观察,褐化率低,最终的不定芽再生数高于叶片正放,是辣椒枣叶片再生培养的最佳放置方式。正交试验结果表明,基本培养基,TDZ,IBA和糖4个因子对辣椒枣叶片再生影响大小排序为:基本培养基>糖>TDZ>IBA;1/2 MS(大)为最优培养基,WPM不适合作为辣椒枣的叶片再生培养基;辣椒枣组培苗叶片再生的最优培养基为1/2 MS(大)+TDZ 0.3 mg/L+IBA 0.1 mg/L+糖20 g/L,平均每叶片再生不定芽能达到5.4个。     

虎耳兰的组织培养研究

以虎耳兰幼嫩叶片为外植体,接种于添加不同激素浓度配比的培养基上,筛选出适宜的不定芽诱导培养基、不定芽增殖培养基和不定根诱导培养基.不定芽诱导培养基为MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1;不定芽增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg·L-1 +NAA0.1 mg·L-1+0.2%活性炭(AC);不定根诱导培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L-1 +0.2%AC.试管苗先移入基质(4/7泥炭+2/7珍珠岩+1/7蛭石)中炼苗一周后,再移栽入基质(1/3泥炭+2/3沙壤土)中,成活率可达到100 %.