蝴蝶兰花梗组织培养技术研究

对蝴蝶兰组织培养快繁技术的优化进行了较系统的研究,建立了蝴蝶兰花梗组织培养技术体系。主要包括：用腋芽启动的幼嫩花梗,以MS＋3．0mg／L6-BA培养出芽率最高,达90％以上;MS＋5．0mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA诱导茎尖原球茎状体,诱导率最高,达100％;原球茎状体增殖的最佳培养基为MS＋3．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋1．5％o活性炭,增殖系数达2。3;添加6-BA和NAA的1／2MS培养基有利于生根,平均根数达到3．2条;过渡培养能够提高蝴蝶兰组培苗移栽成活率。     

蝴蝶兰快速繁殖关键技术研究

以蝴蝶兰嫩叶、茎尖、花梗侧芽、花梗节间为外植体,进行原球茎诱导,探求蝴蝶兰组织培养的最适外植体;通过不同培养基及各种激素配比组合进行原球茎诱导、增值及试管苗生根试验,探索各阶段最优培养基配方。结果表明：茎尖和花梗腋芽是蝴蝶兰形成原球茎的较佳外植体;MS＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L 6-BA＋100ml/L椰乳是蝴蝶兰原球茎增殖的最佳培养基,增殖系数达8.98;1/2 MS培养基最利于侧芽萌发形成丛生芽;生根最适培养基为1/2MS＋1.0mg/LIBA＋0.5 mg/LNAA。     

甘蔗茎尖胚状体脱毒苗快繁技术研究

以茎尖为供体诱导胚状体分化成苗,完善与改进甘蔗脱毒健康种苗生产技术.以甘蔗新台糖22号为材料,比较茎尖胚状体、茎尖与腋芽3种分化成苗繁育方法在不同时期接种、不同激素水平下的组培苗增殖速度、苗素质及脱毒效果.结果表明,组培苗繁殖速度以茎尖胚状体分化苗最快,增殖5代后扩繁2 589倍,茎尖297倍,腋芽104倍,培养基以6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.01～0.1mg/L增殖效果最好;组培苗质量与繁殖速度相反.本试验中出现不正常生长的苗有白化苗、细弱小苗、玻璃化苗、疯长苗等4种,茎尖胚状体苗发生率1.77%,茎尖苗1.56%,腋芽苗0.31%;不同处理间组培苗生根及移栽成活率差异不显著,生根率茎尖胚状体苗75.3%、茎尖苗76.9%、腋芽苗76.6%,移栽成活率茎尖胚状体苗94.8%、茎尖苗95.4%、腋芽苗95.1%,生根培养基以NAA 7.5 mg/L+ABA2.5mg/L最好;去除甘蕉宿根矮化病(RSD)、花叶病方面,以茎尖胚状体苗最好,RSD去除率95%、花叶病去除率100%,茎尖苗RSD去除率70%、花叶病去除率75%,腋芽苗未能去除RSD、花叶病.说明应用茎尖胚性细胞再生植株,脱毒效果好,繁殖速度快,可克服门前脱毒苗生产中试管苗扩繁量小、成本高的难题.     

香蕉无束顶病毒种苗快速繁殖的工艺流程

 采用抗香蕉束顶病毒(BBTV)单克隆抗体(McAb)和抗血清,用酶联免疫吸附技术(ELISA)双抗体夹心法(DAS)测定获得无病毒香蕉茎尖.以该茎尖作外植体,接种在改良的MS培养基,从茎尖环状腋芽处诱导出不定芽.分切继代培养诱导新丛芽.丛生小植株分切成单株转入附加活性碳的MS基本培养基促根壮苗,生根试管苗移栽沙土或垤石基质的营养钵内,保湿成活.采用该工艺污染控制在10%以下,繁殖系数3～4倍/月,生根率90%以上,移栽成活率90%以上.种苗在生产上应用无病健壮.建立了香蕉无毒种苗规模化生产技术.     

绿玉菊离体培养与快速繁殖

用绿玉菊叶片、不带腋芽茎段、带腋芽茎段和茎尖为外植体进行离体培养研究,分析了影响愈伤组织形成的因素及分化困难的原因.研究结果表明:在愈伤组织诱导时,不带腋芽茎段较嫩叶易产生愈伤组织,是首选外植体;6-BA1. 0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1的激素配比对茎段愈伤组织诱导有利,诱导率高达100%;在MS基本培养基中,pH值为5.4较适宜愈伤组织的分化,且6-BA3.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1对愈伤组织分化不定芽的效果较好,分化不定芽均数达11.10个.茎尖及带腋芽茎段在MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.01mg·L-1的培养基上,能直接诱导出大量生长健壮的丛生芽,生根在MS+NAA0.05mg·L-1的培养基上进行,生根率高达100%,根多而壮,植株长势好.     

黄连木茎尖组培快繁技术研究

以黄连木(Pistacia chinesis Bunge)实生苗茎尖为外植体,研究了黄连木茎尖丛生芽诱导、生根以及试管苗移栽的培养基和培养条件,结果表明:1/2WPM+4.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA适合茎尖丛生芽的诱导,诱导率达82.1%,生根以1/2WPM+1.0 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA较佳,生根率达100%.黄连木实生苗茎尖是较适合的外植体材料,在短期内能获得大量组培苗,其试管苗适宜的移栽基质为营养土-蛭石(比例1 ∶1),移栽成活率达95.0%.     

‘阿里山’蝴蝶兰组织培养及其驯化移栽技术

以蝴蝶兰新品种‘阿里山’为试材进行组培快繁研究,包括花梗腋芽不定芽的诱导、丛生芽增殖、生根培养以及组培苗炼苗移栽技术。结果表明,1/4MS+4 mg·L-1BA+0.3 mg·L-1NAA最适合不定芽诱导,诱导率可达82.5%;利用1/2MS+7 mg·L-1BA+0.8 mg·L-1NAA培养基进行培养时,丛生芽增殖系数达到3;利用改良1/2KC+1 mg·L-1NAA+100 g·L-1香蕉泥培养基培养时,生根率高达100%;组培苗驯化28 d,移栽成活率达93.3%。     

三种花卉的组织培养和快繁

利用一品红的茎尖,丽格海棠和紫叶酢浆草的成熟叶片作为外植体进行了芽的诱导、增殖,根的诱导和出瓶移栽。结果表明,这三种植物试管苗,每30~40d,增殖3~6倍。生根率在90%~100%,移栽成活率在80%以上。     

不同激素水平对石斛兰组织培养的影响

选用石斛兰茎尖和根尖为外植体,以不同的激素浓度组合的MS培养基,研究植物激素对石斛兰组织培养中原球茎的诱导、增殖、生根的影响.结果表明,茎尖能够诱导出原球茎,而根尖几乎不能.最适宜的石斛兰原球茎诱导培养基是MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 2.0 mg/L,其原球茎出愈率达85%;适宜原球茎分化的培养基是Ms+6-BA 4 mg/L+NAA 1 mgL,其分化率达90%;最适宜石斛兰诱导根的培养基应为1/2MS+2.0～3.0 mg/L IBA,生根率达100%.     

大花蕙兰(Cymbidium hybridium)离体快速繁殖技术

以大花蕙兰茎尖和茎节段作外植体进行了离体快速繁殖技术研究。结果显示:茎尖诱导芽的效果优于茎节段;适宜诱导培养基为MS BA4.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.6g·L-1,茎尖在该培养基上芽的诱导率为71.4%;丛芽增殖适宜培养基为MS BA2.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC03.g·L-1,增殖率为3.79;原球茎增殖、分化的适宜培养基为MS BA1.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.3g·L-1,增殖率为6.1,分化率为71.1%;生根和壮苗的适宜培养基为MS NAA0.5mg·L-1 AC0.3g·L-1,试管苗生根率达100%。     

紫薇茎段离体培养体系的优化

以矮首领紫薇当年生半木质化带腋芽茎段、硬枝茎段以及叶片为外植体,从消毒时间、启动培养基、增殖培养基和生根培养基选择等方面进行离体培养体系的优化。结果表明,茎段为较好的外植体。最佳消毒时间:带腋芽茎段用0.1%升汞处理8 min,诱导率为66.67%;带水培芽茎段用0.1%升汞处理4 min,诱导率为65.55%;叶片用0.1%升汞处理4 min,诱导率为55.56%。带腋芽茎段最佳启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L,诱导率为83.33%。腋芽和水培芽的最佳增殖培养基均为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.30 mg/L。腋芽增殖系数为2.42,芽长为3.2 cm;水培芽增殖系数为3.21,芽长为2.1 cm。腋芽最佳生根基本培养基为1/2MS,最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L,生根率为96.67%;水培芽最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L+活性炭(AC)0.1 g/L,生根率为81.25%。     

均匀设计法优化牛皮杜鹃腋芽丛生芽苗及高频植株再生体系研究

以牛皮杜鹃嫩茎段为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基。结果表明,最适合嫩茎段腋芽丛生芽苗的诱导培养基为1/2 MS+2-ip 3.50mg/L+IAA 0.02mg/L+GA3 1.00mg/L,诱导率可达96%;生根培养基为MS(改良)+IAA 0.10mg/L+NAA 0.07mg/L,生根率可达98%。以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在30d的一个培养周期内,增殖倍数平均达60以上。通过试验,建立了牛皮杜鹃腋芽丛生芽苗及高频植株的再生体系。     

观果树种轮生冬青离体快繁技术

以轮生冬青幼嫩茎段为外植体,通过筛选启动培养基、比较不同增殖培养基及继代次数对增殖的影响,生根诱导培养基的筛选,建立了轮生冬青的离体快速繁殖技术体系。结果表明:最适腋芽诱导培养基为B5+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA0.05 mg·L~(-1);适宜增殖培养基为B5+6-BA1.5 mg·L~(-1)+IBA0.3 mg·L~(-1),第4次继代时增殖系数最大为6.3,丛生芽长势好;适宜的继代周期为35 d;最佳生根培养基为1/2B5+IBA0.2 mg·L~(-1)+NAA0.3 mg·L~(-1),生根率可达100%。移栽于V(珍珠岩)∶V(蛭石)∶V(腐殖土)=2∶1∶1的混合基质中,成活率达90%以上。     

麝香石竹的组培脱毒技术研究

[目的]探索麝香石竹的组培脱毒技术。[方法]以麝香石竹0.3~0.4 mm长的茎尖为外植体,在分化培养基中诱导丛生芽,丛生芽进行继代培养后,将幼苗进行病毒检测,将无毒幼苗保留继续繁殖,然后将无毒的幼苗移植到生根培养基中诱导生根。[结果]不同大小的香石竹茎尖对丛生芽的诱导有较大影响,以0.3 mm茎尖为最佳。丛生芽的诱导以MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 2.0 mg/L、根的诱导以1/2MS+IAA 0.5 mg/L(或IBA 0.5 mg/L)为最佳培养基。田间比较试验表明,与未脱毒麝香石竹相比,脱毒麝香石竹花的颜色鲜艳,切花品质好,产花量高,花裂萼少。[结论]该研究为扩大麝香石竹的繁殖提供了技术保障。     

驼峰藤组织培养及快速繁殖

以驼峰藤(Merrillanthus hainanensis)带芽茎段为外植体,研究不同消毒方法及植物生长调节剂对其离体培养及植株再生的影响,建立了驼峰藤离体快繁技术体系。结果表明,带芽茎段的最佳消毒灭菌方法为75%乙醇浸泡20 s,0.1%HgCl_2浸泡10 min;腋芽诱导的最适宜培养基为MS+2.00 mg/L 6-BA+0.10mg/L NAA+0.10 mg/L GA_3,诱导率可达81.11%;适宜腋芽增殖的培养基为MS+3.50 mg/L 6-BA+0.15mg/L NAA,增殖系数可达6.24;最佳生根培养基为1/2MS+0.30 mg/L NAA,生根率为84.44%,该结果为驼峰藤的快繁提供了一条新途径。     

驱蚊香草快速繁殖研究

以驱蚊香草的茎尖和带叶腋茎段为外植体,研究探索MS附加不同激素组合对茎尖的萌发、不定芽增殖、生根的影响.结果表明:利用茎尖作为外植体进行起始培养获得无菌苗,KT8.0+IBA1.0组合为最佳;以无菌苗的带叶腋茎段为外植体进一步诱导形成愈伤组织,并分化不定芽,6-BA3.0-4.0+NAA2.0组合的不定芽增殖倍数(10倍)远远高于腋芽直接形成丛生芽的增殖倍数(2.1倍);使用IBA2-5 mg/L诱导生根,生根率达95;～100;.建立了驱蚊香草再生体系.     

黄灯笼辣椒子叶离体培养与植株再生

以黄灯笼辣椒无菌苗子叶为外植体,研究激素对不定芽分化及植株再生的影响。结果表明:6-BA对子叶不定芽的诱导效果最好;IAA与6-BA配合能明显提高子叶不定芽的分化率;在分化培养基中添加4mg/LGA3,有利于不定芽的伸长。不定芽分化的最适培养基为MS 6-BA5mg/L IAA1mg/L AgNO36mg/L,平均诱导率达75%;不定芽伸长的最适培养基为MS 6-BA3mg/L IAA1mg/L AgNO36mg/L GA34mg/L,平均伸长率可达90%;最佳生根培养基为MS IAA0.5mg/L,生根率达95%;建立了辣椒子叶植株再生体系。     

红肉苹果的组织培养快繁技术

[目的]建立红肉苹果的高效植株再生体系。【方法]以红肉苹果的茎尖和带腋芽的茎段为外植体，通过组织培养试验筛选出最佳的灭菌时间、基础培养基、增殖培养基和生根培养基。[结果]随着消毒时间的延长，外植体的污染率明显下降，但外植体受到的伤害显著增加。用0．1％HgCl2灭菌5rain的外植体生长正常，污染率仅为3．3％。在增殖培养基MS＋6一BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L、MS＋6．BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L和MS＋6一BA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L中。每个外植体平均增殖不定芽4．1、6．8和3．3个。在生根培养基1／2MS＋0．1mg／LIBA＋0．1mg／LNAA、1／2MS＋0．2mg／LIBA＋0．2mg／LN从和1／2MS＋0．5mg／LIBA＋0．5mg／LNAA上幼苗的生根率分别为56．7％、96．7％和83．3％。[结论]该研究为红肉苹果的快速离体扩繁和工厂化育苗以及园林应用奠定了良好的基础。     

白首乌的组织培养条件的优化

以白首乌茎段、叶片、茎尖和带腋芽茎段为外植体,进行离体培养植株再生研究,结果表明：适合初代诱导的培养基为：MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,诱导率可达100%;最佳外植体是带腋芽茎段;芽苗增殖的最佳培养基为：MS+KT 1.5 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,增殖系数为5.6;生根培养基为：1/2 MS+NAA 0.5 mg·L-1,生根率为93.3%。