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1.
沙冬青GATA型锌指蛋白基因序列及表达分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据沙冬青低温干旱诱导cDNA文库表达序列标签中锌指蛋白基因序列设计特异引物,采用PCR技术扩增锌指蛋白基因AmZFPG的cDNA全长.序列分析表明,cDNA全长669 bp,推测编码223个氨基酸残基、分子量约25 kD的蛋白质.氨基酸保守性分析及同类锌指结构比对表明AmZFPG属于GATA结合蛋白家族,且具有高度的...  相似文献   
2.
冷休克结构域蛋白(CSPs)是含有不同数量冷休克结构域(cold shock domain,CSD)的低温响应蛋白,在低温胁迫中发挥重要作用。以沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)为材料,克隆得到了冷休克结构域蛋白基因AmCSDP。生物信息学分析显示AmCSDP(Gen Bank登录号:KX756575)全长540bp,编码180个氨基酸,二级结构由8.9%的α–螺旋、47.8%的β–折叠和43.3%的无规则卷曲组成,其N端含有冷休克结构域。进化分析表明沙冬青与花生同源性最高。构建了AmCSDP真核表达载体Pcambia2300-35S-AmCSDP-OCS,经农杆菌介导转入本氏烟中。对转基因T1代和野生型烟草进行4℃低温胁迫处理,结果证实转基因本氏烟比野生型的耐冷能力强。  相似文献   
3.
A20/AN1锌指蛋白普遍存在于真核生物中,在胁迫响应引起的信号传导过程中发挥着重要作用。本文利用生物信息学和RT-PCR方法从低温干旱胁迫的沙冬青叶片组织中分离锌指蛋白基因AmSTZF,该基因编码一条含172个氨基酸残基的多肽,含A20和AN1两个锌指蛋白保守结构域,属A20/AN1锌指蛋白。生物信息学分析显示该蛋白定位于细胞质中,具有磷酸化位点,参与细胞转录调控。RT PCR分析表明:低温和干旱胁迫处理的沙冬青叶片中,AmSTZF的表达增强,初步推测该基因与沙冬青低温、干旱胁迫响应相关。   相似文献   
4.
以北京颐和园古桑树为外植体进行组织培养,取桑树当年新生嫩茎切段为外植体进行,其中不定芽启动培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+PVP 0.2 g/L;将无菌苗接到最适分化培养基MS+ 6-BA 0.8 mg/L +NAA 0.1 mg/L +PVP 0.2 g/L上,组培苗分化率高;不定根最适诱导培养基为:1/2MS+NAA 0.5 mg/L +PVP 0.2 g/L,生根率达100%。组培苗移栽成活率达95%。  相似文献   
5.
颐和园古西府海棠的组织培养与快速繁殖   总被引:1,自引:0,他引:1  
以北京颐和园古西府海棠嫩枝为外植体进行组织培养研究,结果表明:取西府海棠当年新生嫩茎务切段为外植体进行组织培养,其中最适不定芽启动培养基为1/2MS+IBA0.3mg/L+NAA0.05mg/L;将无菌苗接种到分化培养基MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.4mg/L上,组培苗生长健壮且分化率高,增殖系数可达4.16;不定根最适诱导培养基为1/2MS+IBA0.6mg/L和1/2MS+NAA1.0mg/L,生根率分别达100%、98%。炼苗基质为蛭石:珍珠岩体积比:1:1。试管苗移栽成活率达92%。  相似文献   
6.
转沙冬青锌指蛋白基因AmZFPG 烟草非生物胁迫抗性分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
 分析了沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)锌指蛋白基因AmZFPG 在非生物胁迫下的表达 特性,结果显示AmZFPG 受低温、干旱、高盐胁迫诱导表达,表明该蛋白参与多种胁迫相关的信号转导 和应答反应。为进一步探索AmZFPG 的功能,构建了真核表达载体AmZFPG-pCAMBIA2300,将该基因 转入烟草(Nicotiana tabacum L.),对转基因烟草T1 代进行非生物胁迫分析,结果显示,转基因烟草的耐 寒性、耐旱性、耐盐性均获得了提高。  相似文献   
7.
一种改进的固相扣除杂交法直接克隆全长差异表达基因   总被引:1,自引:0,他引:1  
该文集多种分离差异表达基因方法的优点于一体,自行优化了一种基于固相扣除杂交和聚合酶链式反应(PCR)技术直接克隆全长差异表达基因的策略.该策略中的所有操作步骤,包括poly (A)+mRNA的分离,cDNA的合成和扣除杂交都是在磁珠上进行的,操作简单易行.扣除杂交是用结合在磁珠上的以oligo(dT)为引物合成的对照材料(Driver)的cDNA第一链,直接扣除加有接头的处理材料(Tester)cDNA第二链中的共有序列.多次反复使用Driver一链与Tester二链进行杂交,能有效去除Tester二链中的共有序列.磁珠的分离能最小限度地减少每次杂交造成的损失.最后一轮扣除后的Tester二链中,含有大量差异表达序列,用Tester二链特有的接头引物进行扩增,能进一步提高扣除效率.该文选用此扣除方法,成功分离到了低温驯化沙冬青幼苗和对照苗2个群体的18个差异表达克隆,其中有4个克隆是全长cDNA序列.经序列分析发现,这些基因都与低温相关,进一步说明,该方法可用于克隆未知差异表达基因.   相似文献   
8.
为探究端粒酶活性与树龄以及叶位是否存在一定的关系,应用TRAP法对不同年龄的油松、银杏、楸树、国槐叶片及油松和银杏同一棵树不同叶位的叶片进行端粒酶活性的测定。结果表明,油松端粒酶活性同树龄无明确的相关性,而楸树、国槐的端粒酶活性随着树龄增加而表现为增加的趋势。端粒酶活性与叶位相关,越靠近顶端的叶片端粒酶活性较高,而靠近下端的叶片端粒酶活性较低。  相似文献   
9.
以牛皮杜鹃嫩茎段为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基。结果表明,最适合嫩茎段腋芽丛生芽苗的诱导培养基为1/2 MS+2-ip 3.50mg/L+IAA 0.02mg/L+GA3 1.00mg/L,诱导率可达96%;生根培养基为MS(改良)+IAA 0.10mg/L+NAA 0.07mg/L,生根率可达98%。以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在30d的一个培养周期内,增殖倍数平均达60以上。通过试验,建立了牛皮杜鹃腋芽丛生芽苗及高频植株的再生体系。  相似文献   
10.
研究了冷敏感植物甜玉米和番茄在生长临界温度锻炼下抗冷性的提高以及某些生理指标的适应性变化。结果表明,番茄幼苗经12℃锻炼7 d,甜玉米种苗经11℃锻炼8 d或15 d后,番茄幼苗和甜玉米种苗对2℃低温胁迫的抗性明显提高。经过低温锻炼的番茄幼苗和甜玉米种苗脯氨酸含量较常温下(26℃/21℃)生长的显著增加。电镜细胞化学观  相似文献   
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