黄酒用脲酶产生菌9043C12发酵条件和酶学特性的研究

通过对９０４３Ｃ１２菌株培养条件的研究，使其产脲酶活力达２．４Ｕ／ｍｌ，较原活性０．３４Ｕ／ｍｌ，提高７．１倍，对该酶的酶学特性进行初步研究表明，尿素对该菌脲的生物合成具有显著促进作用，其最适ＰＨ为５．０ 最适温度为４２℃，但在含２０％（ｖ／ｖ）乙醇下最适ＰＨ为４．５，最适温度为４６℃３５℃以下较稳定，酶经６５℃１５ｍｉｎ巴氏消毒完全失活，模拟试验结果表明，２５℃ＰＨ５．０条件下，在含乙醇１６％或     

黄酒用脲酶产生菌的分离与选育

从２２批土样中分离到２７０余株能以尿素为唯一氮源的细菌，经变色圈法初筛，摇瓶复筛，获得产脲酶水平较高的菌株９０４３，初步鉴定为肠杆菌属菌。采用紫外线和亚硝基腺进行诱变育种，得到产酶水平为０．３４Ｕ／ｍｌ的脲酶产生菌株９０４３Ｃ１２，模拟酒中应用试验表明，该菌所产脲酶在２５℃，ｐＨ５．０条件下，只需向含乙醇２０％（ｖ／ｖ）和尿素３０ｍｇ／Ｌ的模拟酒中添加６．０Ｕ／Ｌ就可在３６ｈ内使尿素的去除率达９０     

黄酒用脲酶产生菌的分离与选育

从２２批土样中分离到２７０余株能以尿素为唯一氮源的细菌，经变色圈法初筛，摇瓶复筛，获得产眠酶水平较高的菌株９０４３，初步鉴定为肠杆菌属菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｓｐ．）．采用紫外线和亚硝基胍进行诱变育种，得到产酶水平为０．３４Ｕ／ｍｌ的脲酶产生菌株９０４３Ｃ１２．模拟黄酒中应用试验表明，该菌所产豚酶在２５℃，ｐＨ５．０条件下，只需向含乙醇２０％（ｖ／ｖ）和尿素３０ｍｇ／Ｌ的模拟酒中添加６．０Ｕ／Ｌ就可在３６ｈ内使尿素的去除率达９０％以上．     

碳氮比及金属离子对9043C12菌株产脲酶的影响

用正交试验方法研究了９０４３Ｃ１２菌株在发酵过程中,以葡萄糖作为碳源时,不同的氮源对产脲酶的影响,以及添加金属离子后脲酶产量的变化．结果表明,尿素对产脲酶的影响最大．最佳的碳氮比例可使酶活提高２倍,达到０．６９Ｕ／ｍＬ．ＭｎＳＯ４Ｈ２Ｏ,ＮｉＳＯ４６Ｈ２Ｏ浓度分别为０．０５ｇ／Ｌ和０．０１ｇ／Ｌ,并于发酵１０小时加入时,对９０４３Ｃ１２菌株产脲酶具有较明显的促进作用,其酶活达到０．３６４Ｕ／ｍＬ,为对照的５．２倍．当ＭｎＳＯ４Ｈ２Ｏ浓度为０．１ｇ／Ｌ,ＮｉＳＯ４６Ｈ２Ｏ浓度提高到０．１ｇ／Ｌ时,则对产脲酶有抑制作用．     

碳氮比及金属离子对9043C12菌株产脲酶的影响

用正交试验方法研究了９０４３Ｃ１２菌株在发酵过程中,以葡萄糖作为碳源时,不同的氮源对产脲酶的影响,以及添加金属离子后脲酶产量的变化,结果表明,尿素对产脲酶的影响最大。最佳的碳氮比例可使酶活提高２倍,达到０．６９Ｕ／ｍＬ。ＭｎＳ４．Ｈ２Ｏ,ＮｉＳＯ４．６Ｈ２Ｏ浓度分别为０．０５ｇ／Ｌ和０．０１ｇ／Ｌ,并地发酵１０小时加入时,对９０４３Ｃ１２菌株产脲酶具有较明显的促进作用,其酶活达到０．３６４／ｍＬdi     

几种离子对豇豆根瘤腺苷酸琥珀酸裂解酶活性和最适PH值的影响

在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ８．０的１００ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｃｉｎｅ缓冲液中，当离子浓度＜１５０ｍｍｏｌ／Ｌ时，Ｋ＋和Ｎａ＋离子是豇豆根瘤腺苷酸琥珀酸裂解酶（ＡＳＡＬ）的激活剂，其最适浓度约为７５ｍｍｏｌ／Ｌ，可分别提高酶活性４０％和３５％。Ｍｇ２＋离子是ＡＳＡＬ的抑制剂，能拮抗Ｋ＋和Ｎａ＋离子的激活效应。ＨＰＯ二４离子可显著降低酶活性，抑制效应与ＨＰＯ二４离子浓度呈正相关。在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ６．６～８．０的１００ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液中，ＡＳＡＬ的最适ｐＨ值约为７．４，而在含１５％（ｖ／ｖ）甘油和ｐＨ７．４～８．６的Ｔｒｉｃｉｎｅ缓冲液中，ＡＳＡＬ的最适ｐＨ值约为８．２。     

黑曲霉M89菊粉酶的产生与性质

研究了菊粉酶高产菌株－黑曲霉Ｍ８９的产酶条件，产酶的最适碳源是菊粉，最适氮源是草酸胺、硫酸铵和磷酸二氢铵；２５０ｍＬ摇瓶装５０ｍＬ培养基，在培养基起始ｐＨ７．０，３２℃，２１０ｒ／ｍｉｎ条件下摇振培养产酶活力最高。黑曲霉Ｍ８９菊粉酶的最适反应温度为５５￣６０℃，最适ｐＨ４．５，在６０℃热处理３ｈ，仅失活１７％，在ｐＨ４．０￣９．０范围内室温处理１２ｈ，无活力丧失。     

核酸酶P1高产菌选育及酶学特性研究

采用紫外线诱变方法选育到一株高活力核酸酶Ｐ１产生菌，其酶活可达５００ｕ／ｍＬ，该菌株最适培养条件为２８￣３０℃下培养３￣４ｄ。粗酶液的贮存稳定性好，在４℃可贮存４个月仍保留８０％的活性，该酶在６０℃以下，ｐＨ５￣８条件下稳定。其最适作用条件为底物浓度１％，ｐＨ６．５￣７．０，反应温度７０℃下降解２ｈ，其ＲＮＡ降解率和５－核苷酸生成率分别可达９０％和８０％。     

啤酒麦糟诱导里氏木霉生产纤维素酶的研究

以里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）ＲｕｔＣ３０为产酶菌株，经适当预处理后的啤酒糟为碳源或诱导物，通过深层培养可获得较高浓度的纤维素酯液，当固体碳源浓度为２０ｇ／Ｌ，碳氮比为８．５时，于初始ｐＨ＝４．８温度２６～２８℃，转速１５０ｒ／ｍｉｎ下培养，其发酵时间为６ｄ酶液浓度可达３．８ＦＰＩＵ／ｍＬ，酶产率１７２ＦＰＩＵ／ｇ纤维素。     

花生幼苗内精氨酸脱羧酶的初步研究

花生体内控制多胺生物合成的主要酶是ＡＤＣ，主要定位于代谢活跃的分生组织内。部分纯化（１３倍）的酶最适底物是Ｌ－Ａｒｇ，Ｋｍ值和Ｖｍａｘ依次为０．５６ｍｍｏｌ／Ｌ、０．６６μｌＣＯ２／ｍｇ ｐｒｏｔｅｉｎ．ｍｉｎ。反应最适ｐＨ和温度为８￣８．５和４０￣４５℃。该酶对热、乙醇、脲稳定性差。０．８ｍｍｏｌ／Ｌ ＰＬＰ（磷酸吡哆醛）可提高酶活性２１％，ＤＴＴ（二硫苏糖醇）、ＭＥ（颈基乙醇）提高酶的稳定性，     

莲藕中多酚氧化酶特性的研究

为解决带肉莲藕汁加工中褐变问题，采用分光光度法对莲藕组织中多酚氧化酶的特性进行了研究，分别求出该酶的最适温度为３０℃，最适ｐＨ为５．０和７．０，Ｖ＿（ｍａｘ）＝１．３２吸光度／ｍｉｎ，Ｋ＿ｍ＝２０ｍｍｏｌ／Ｌ。并探讨了该酶的热稳定性特征和抑制剂ＳＯ＿２。Ｖｃ对酶活力的影响，９５℃条件下１８ｓ可将酶灭活，抑制剂的有效抑制浓度分别为０．６％（ＮａＨＳＯ＿３计）和１．０ｍｏｌ／Ｌ（Ｖｃ）。     

无花果蛋白酶的分离纯化及其理化性质研究

以无花果良种布兰瑞克和紫果１号为材料，其匀浆滤汁经有机溶剂沉淀、超滤等方法处理，得到无花果蛋白酶粉。酶比活力为１５．３４ｕ／ｍｇ·ｐｒｏｔｅｉｎ，纯化倍数为１１．６８％，酶产率为１．５％，酶活力回收率为２７．４％，酶最适ｐＨ为８．０，在ｐＨ５￣１０范围内处理０．５ｈ活性稳定，酶最适温度为４０℃，在温度５０℃以内活性稳定。酶具有巯基蛋白酶特性，能被半胱氨酸和ＥＤＴＡ激活，而被ＨｇＣｌ２抑制。     

高寒草原放牧绵羊瘤胃液酸度、温度和游离氨浓度的动态变化

通过瘤胃瘘管采样测定了高寒草原放牧条件下绵羊瘤胃液ｐＨ、温度、游离氨浓度的变化动态，结果表明绵羊瘤胃液ｐＨ值、温度和游离氨浓度平均值在８：００时分别为６．７４、３９．０℃、１３．５８ｍｇ／１００ｍＬ，变化范围分别为５．４０～７．２７、３６．７～３９．７℃、４．６３～４１．０６ｍｇ／１００ｍＬ；在２０：００时分别为５．５７、３９．５℃、１０．９１ｍｇ／１００ｍＬ，变化范围分别为５．２３～７．７７、３８．０～４０．３℃、５．６６～１９．６４ｍｇ／１００ｍＬ。游离氨浓度日内变幅（４．６２～１０．８１）低于日间（８：００时５．６６～１９．６４，２０：００时１１．３２～４１．０６），波动较为强烈。温度和游离氨浓度的高峰值与ｐＨ值的低峰值对应出现。     

小麦5-氨基酮戊酸脱水酶的纯化及部分性质研究

以３０％ ～６０％ 硫酸铵饱和度分级沉淀、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００、Ｐｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－４Ｂ 和羟基磷灰石层析纯化了小麦５－氨基酮戊酸脱水酶（ＡＬＡＤ）,其在ｐＨ ８．５ 时比活为３１ Ｕ·ｍ ｇ－ １蛋白;酶纯化了９１ 倍,得率５％ ,酶亚基分子质量约５２ ｋｕ,全酶分子质量约３３０ ｋｕ,表明酶由６ 个亚基组成;酶的等电点为４．８,在４００ ｎｍ有吸收峰,最适反应温度４５℃,Ｍｇ２＋ 激活酶,Ｚｎ２＋ 和磷酸吡哆醛抑制酶。纯化的ＡＬＡＤ浓缩后,－ ２０℃下在０．１ ｍ ｏｌ·Ｌ－ １,ｐＨ ８．５ 的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ,内含５０％ 的甘油,５ ｍ ｍ ｏｌ·Ｌ－ １的巯基乙醇和ＭｇＣｌ２ 中黑暗贮藏３０ ｄ 酶活不损失     

氟化钠对大豆酸性磷酸酯酶的抑制动力学研究

以对硝基苯磷酸二钠为底物，研究了大豆体外酸性磷酸酯酶的酶促反应动力学和氟化钠对该酶的抑制动力学特性，实验结果表明，大豆酸性磷酸酯酶的酶促反应初速度时间范围为０～２０ｍｉｎ，最适ｐＨ５．６，最适反应温度为３７℃，米氏常数（Ｋｍ）为２．７８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ，最适反应速度（Ｖｍ）为１．１５×１０－８ｍｏｌ／ｍｉｎ．ＮａＦ对大豆体外酸性磷酸酯酶有明显抑制作用，属于非竞争性可逆抑制类型，其抑制常数（Ｋｉ）为１．５３×１０－３ｍｏｌ／Ｌ．此外，还探讨了ＮａＦ的抑制机理．     

家蚕丝素固定化果胶酶的研究

家蚕茧丝经高浓度氯化钙或碱溶液处理后,可制成不同形状的丝素．将这些丝素分别与果胶酶通过吸附以及与戊二醛交联结合,制备了不同形状固定化酶．对固定化酶性质的研究表明：丝素能有效地固定果胶酶;其最适ｐＨ值为４．０,比游离酶提高了０．５个单位;最适温度为６０℃,比游离酶提高了１０℃,改善了果胶酶的适应范围．同时还发现：在制备固定化酶时,戊二醛的浓度以０．２５％为好;酶浓度以３ｍｇ／Ｌ为宜     

分解蔗渣的研究Ⅱ.特异青霉YB-7纤维素酶的性质研究

对特异青霉（Ｐ．ｎｏｔａｔｕｍ）ＹＢ－７纤维素酶的一般酶学性质进行了研究。其最适酶作用条件为：ｐＨ５．０，５０℃，且在小于７０℃和ｐＨ４．０～９．０的范围内具有稳定性，ＣＭＣ、ＦＰＡ和β－葡萄糖苷酶活力变化范围有一定差别。甘油、葡萄糖和纤维二糖的最低抑制浓度（ｍｍｏｌ／Ｌ）分别为３．２５、２．４５和１．７１，其抑制系数分别为１．０１，２．３１和２．８０。８０％饱和度的硫酸铵可较完全地沉淀纤维素酶的有效成份。     

莲藕中多酚氧化酶特性的研究

为解决带肉莲藕汁加工中褐变问题，采用分光光度法对莲藕组织中多酚化酶的特性进行了研究，分别求出该酶的最适温度为３０℃，最适ＰＨ为５．０为７．０，Ｖｍａｘ＝１．３２吸光度／ｍｉｎ，Ｋｍ＝２０ｍｍｏｌ／Ｌ。并探讨了该酶的热稳定性特征和抑制剂ＳＯ２，Ｖｃ对酶活力的影响。９５℃条件下１８ｓ可将酶灭活，抑制剂的有效抑制浓度分别为０．６％（ＮａＨＳＯ３计）和１．０ｍｏｌ／Ｌ（Ｖｃ）。     

黑曲霉产单宁酶发酵条件的研究

为探讨培养基组成及培养条件对黑曲霉产单宁酶的影响,进行了黑曲霉Ｎｏ．１菌株产单宁酶的试验。该菌株的发酵滤液,以没食子酸丙酯为底物的酶活力达３１６ｕ／ｍＬ,亲产适培养基为：１．５％单宁,３％豆饼粉,０．５％大米粉为主的液体培养基,较适培养条件：２５０ｍＬ三角瓶装液量１００ｍＬ,起始ｐＨ６,２８℃摇床上振荡培养７２ｈ。     

角蛋白酶的提取和理化性质的初步研究

用弗氏链霉菌Ｓ－２２１变种的羽毛粉发酵液离心后上清液经８０％浓度乙醇沉淀离心提取的角蛋白酶，酶比活力１２４．８ｕ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ，纯化倍数３．６，酶活力回收率５８．８％．酶解羽毛粉的最适ｐＨ值９．０，在ｐＨ６～９范围处理３０ｍｉｎ酶活性稳定；最适温度５０℃，在７０℃以内处理３０ｍｉｎ活性稳定．酶能被巯基乙醇激活，被ＭｇＳＯ４，ＣａＣｌ２，ＨｇＣｌ２抑制。