柿果实采后软化中PG酶活性及其基因DkPG1的表达

为了进一步探索多聚半乳糖醛酸酶（PG）在柿（Diospyros kaki L.）采后软化中的分子调控机制,应用实时荧光定量PCR技术和DNS比色法检测常温下丙烯和1–甲基环丙烯（1-MCP）处理‘富平尖柿’果实中PG基因DkPG1的表达量和PG酶活性的变化。结果显示,随着柿果实成熟软化,DkPG1基因转录水平呈先上升后下降的趋势,其中丙烯处理4 d出现表达高峰,比对照提前12 d且峰值极显著高于对照,而1-MCP处理的果实中的表达高峰出现在处理后28 d,比对照推迟12 d峰值极显著低于对照。丙烯处理果实PG酶活性迅速增加,活性峰与DkPG1表达高峰出现在同一天,1-MCP处理的果实PG酶活性明显降低,活性峰出现在DkPG1表达高峰前4 d。此外,对不同处理下乙烯释放量和果胶组分变化分析的结果显示DkPG1基因的表达受乙烯调控,进而影响果胶组分代谢。     

1-MCP对‘磨盘柿’采后成熟软化的调控效应

为了探讨1-MCP抑制柿果成熟软化的关键酶,以‘磨盘柿’为试材,研究1-MCP处理对常温柿果的生理指标以及软化酶系的影响。结果表明,1-MCP处理均有效的延缓了柿果硬度和可溶性单宁的下降,抑制了果实的呼吸强度和乙烯生成量的增加,并推迟了呼吸高峰和乙烯高峰出现的时间,有效抑制贮藏后期果实MDA和膜相对电导率的增加,延缓了果实成熟衰老进程;抑制了PG活性、Cx活性、淀粉酶活性的增加,延缓果实软化进程;但对果实PE活性没有抑制作用。导致果实软化的影响因素次序为:PG>Cx>淀粉酶>PE。1-MCP能够有效抑制柿果的成熟软化,与果实中PG、Cx和淀粉酶活性密切相关。     

1-甲基环丙烯处理对软枣猕猴桃果实软化的影响

以软枣猕猴桃为试材,研究了果实采后不同浓度1-甲基环丙烯(1-MCP)处理对软枣猕猴桃果实软化中果实品质、乙烯释放量和呼吸强度、细胞壁成分含量和果胶分解酶活性的影响。结果表明:1-MCP处理明显延缓了软枣猕猴桃果实可溶性固形物含量的上升、可滴定酸含量的下降和果实硬度下降速度;1-MCP处理抑制了软枣猕猴桃果实的呼吸峰值,推迟了软枣猕猴桃果实乙烯发生高峰出现的时间;抑制了软枣猕猴桃果实中果胶、纤维素和半纤维素的降解;降低了软枣猕猴桃果实多聚半乳糖醛酸酶活性峰值,而且推迟了软枣猕猴桃果实β?半乳糖醛酸酶活性峰值的出现。可见,1-MCP处理显著延缓了软枣猕猴桃果实的软化。     

柿采后丙烯和1–甲基环丙烯处理对两个扩展蛋白基因表达的影响

为进一步了解扩展蛋白（Expansin,EXP）在柿果实采后软化过程中的作用,以丙烯和1–甲基环丙烯（1-methylcyclopropene,1-MCP）处理‘富平尖柿’采后果实,采用实时荧光定量PCR技术检测果实中EXP基因表达量的变化。结果显示,丙烯促进柿果实成熟软化,使乙烯释放高峰升高并提前到来,提高ACC合成酶（ACS）、ACC氧化酶（ACO）活性;1-MCP减缓柿果实的成熟软化,推迟并降低乙烯释放高峰,抑制ACS和ACO活性。随着贮藏时间的延长,柿果实逐渐软化,对照果实DkEXP3和DkEXP4的相对表达量均表现为先上升后下降的趋势。丙烯处理促进了DkEXP3和DkEXP4的表达,使表达高峰升高且提早到来;1-MCP处理抑制了DkEXP3和DkEXP4的表达,推迟且降低了表达高峰。对照和1-MCP处理的果实的DkEXP3和DkEXP4的相对表达量高峰均较乙烯释放高峰早。DkEXP3和DkEXP4在果皮、果肉、果心中表达水平不同。本结果说明EXP可能在采后柿果实成熟软化前期起作用,其表达有组织特异性,且受到乙烯的调控。     

丙烯和1–甲基环丙烯处理对采后柿果实XTH基因表达的影响

 为了进一步探索木葡聚糖内糖基转移/水解酶（XTH）在柿（Diospyros kaki L.）采后软化中的分子调控机制,应用实时荧光定量PCR 技术检测常温下丙烯和1–甲基环丙烯（1-MCP）处理的‘富平尖柿’果实中XTH 基因表达量的变化。结果显示,丙烯处理能够促进柿果实成熟软化,增加乙烯释放并使高峰提前到来,而1-MCP 处理能够延缓果实软化,抑制乙烯释放。随着柿果实成熟软化推进,4 个XTH 基因呈现不同的表达方式,且丙烯处理促进了4 个XTH 基因的表达,而1-MCP 处理则抑制它们的表达。其中,DkXTH1 和DkXTH2 在柿果实成熟软化过程中表达量较高,且二者表达高峰分别在果实成熟的初期和中期,说明DkXTH1 和DkXTH2 分别与采后柿果实初期和中后期的软化关系密切。结合乙烯释放量结果分析显示,柿果实XTH 基因的表达受乙烯调控,对柿果实的成熟软化中具有一定的促进作用。     

1-MCP对大果水晶梨冷藏效果的影响

通过对1-甲基环丙烯(1-MCP)处理大果水晶梨冷藏期间主要生理指标变化规律的分析,研究了1-MCP处理对大果水晶梨果实冷藏保鲜效果的影响。结果表明:浓度为2.5μL/L的1-MCP处理能明显减缓大果水晶梨的可溶性固形物的升高和硬度、可滴定酸含量的下降,延缓呼吸和乙烯高峰,降低峰值;其中5μL/L 1-MCP的处理对推迟大果水晶梨乙烯释放高峰和降低峰值尤为明显;不同浓度的1-MCP处理对大果水晶梨VC的保护效果不明显,贮藏后期果实腐烂率明显增加。     

1-MCP对‘玉金香’甜瓜品质和生理代谢的影响

以宁夏中部干旱带生产的‘玉金香’甜瓜为试材,采用0、0.5、1μL/L的1-MCP,研究不同浓度1-MCP处理对甜瓜果实贮藏期间品质、生理代谢的影响,以期筛选最适宜的1-MCP处理浓度.结果表明:1-MCP处理可以显著延缓贮藏期间甜瓜果实硬度的下降,以1 μL/L 1-MCP处理的效果最好,延长果实的贮藏期;延缓了甜瓜贮藏期可溶性固形物含量下降的趋势,一定程度上保持了甜瓜贮藏期的风味;抑制甜瓜果实贮藏期间呼吸强度、延缓呼吸高峰的出现;显著抑制了贮藏期果实乙烯的释放量,并推迟了乙烯高峰出现的时间.说明1-MCP是通过抑制甜瓜贮藏期乙烯的释放量达到抑制乙烯的生理效应.     

柿果实内切-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆与定量表达分析

以成熟期‘富平尖柿’（Diospyros kaki L．‘Fuping Jianshi’）为材料,采用RT-PCR和RACE相结合的方法,克隆柿果实中内切-1,4-β-葡聚糖酶基因（EG）cDNA,并在此基础上采用实时荧光PCR定量技术检测采后常温下柿果及GA,、ABA和1-MCP处理柿果软化过程中该EG基因转录水平的表达特点。试验结果：获得了一个内切-1,4-β-葡聚糖酶基因eDNA,命名为DKEG1（GenBank accession number：HQ222561）,长2叭1b口,编码545个氨基酸,末端含有CBD区域。实时荧光PCR定量技术检测发现常温下对照组柿果采后3d时出现DKEGl基因表达高峰,下降后又逐渐上升,并在12d时出现第2个高峰;赤霉素明显抑制了柿果实在整个后熟过程中DKEGl基因的表达,尽管在6d时也有升高,但与对照相比全程表达量均极低;ABA处理大大提高了DKEGl基因的表达量,没有出现采后3d的表达高峰,但在6～18d期间其表达量均高于对照的最高峰值,其表达高峰出现采后9d;1-MCP处理的柿果表达高峰比对照推迟9d,且前期表达量显著降低,但后期又上升。据此推断柿果实DKEGl的表达受乙烯生成和乙烯信号转导的调控,进而参与果实的后熟软化过程。     

1-MCP对‘冰脆李’冷藏期间褐变与软化的影响

为探明1-甲基环丙烯（1-Methylcyclopropene,1-MCP）对李冷藏期间褐变与软化的影响。本文以‘冰脆李’为试材，采用0.5μL/L 1-MCP熏蒸处理12 h，分析其对‘冰脆李’采后冷藏期间生理、生化及果胶代谢的影响。结果显示，0.5μL/L 1-MCP处理能显著延缓‘冰脆李’果实的腐烂速率，抑制呼吸速率和多酚氧化酶活性，延缓酚类物质氧化，抑制多聚半乳糖醛酸酶和果胶甲酯酶活性，延缓水溶性果胶和共价结合果胶的增加，从而抑制果实硬度的下降。综上所述，0.5μL/L 1-MCP处理可有效延缓‘冰脆李’冷藏期间软化与褐变，延长贮藏期。     

柿果实内切–1,4–β–葡聚糖酶基因克隆与定量表达分析

 以成熟期‘富平尖柿’（Diospyros kaki L.‘Fuping Jianshi’）为材料,采用RT-PCR和RACE相结合的方法,克隆柿果实中内切–1,4–β–葡聚糖酶基因（EG）cDNA,并在此基础上采用实时荧光PCR定量技术检测采后常温下柿果及GA₃、ABA和1-MCP处理柿果软化过程中该EG基因转录水平的表达特点。试验结果：获得了一个内切–1,4–β–葡聚糖酶基因cDNA,命名为DKEG1（GenBank accession number：HQ222561）,长2 011 bp,编码545个氨基酸,末端含有CBD区域。实时荧光PCR定量技术检测发现常温下对照组柿果采后3 d时出现DKEG1基因表达高峰,下降后又逐渐上升,并在12 d时出现第2个高峰;赤霉素明显抑制了柿果实在整个后熟过程中DKEG1基因的表达,尽管在6 d时也有升高,但与对照相比全程表达量均极低;ABA处理大大提高了DKEG1基因的表达量,没有出现采后3 d的表达高峰,但在6 ~ 18 d期间其表达量均高于对照的最高峰值,其表达高峰出现采后9 d;1-MCP处理的柿果表达高峰比对照推迟9 d,且前期表达量显著降低,但后期又上升。据此推断柿果实DKEG1的表达受乙烯生成和乙烯信号转导的调控,进而参与果实的后熟软化过程。     

柿果实1 - 甲基环丙烯处理对成熟软化的影响

 研究了乙烯受体抑制剂1 - 甲基环丙烯(1-MCP) 处理对火柿果实成熟的影响。结果表明: 1-MCP 处理能显著抑制果实乙烯释放, 延缓其跃变出现时间, 推迟ACO (ACC 氧化酶) 活性峰及呼吸跃变,抑制采后初期ACO 的活性及呼吸速率的上升, 并能阻止硬度的下降, 推迟其成熟软化, 延长贮藏期。     

采后1-MCP和热处理对红富士苹果生理变化和贮藏品质的影响

采用1-MCP(浓度为1μL/L,18h)、热空气(HA)38℃-96h及2者结合对富士苹果进行处理,处理后的果实置于(0±0.5)℃条件冷藏4个月,然后置于20℃条件下7d(模拟货架期)。试验发现在整个贮藏过程中所有处理组均能抑制果实的乙烯释放速率和呼吸强度,减缓果实硬度的降低。热处理组对固酸比的上升有显著作用,保持了较高的非水溶性果胶含量和较低的水溶性果胶含量。热处理在贮藏过程中对于果实硬度的保持与对照组相比起到一定的作用,但加速了果皮中叶绿素含量的降解。1-MCP处理组能够较好地抑制果实果皮的褪绿,保持果皮中较高的叶绿素含量,初期抑制细胞膜透性的上升,延缓果实的后熟衰老。结合处理组较好地保持果实膜的完整性,减缓了由热处理所引起的果皮叶绿素的降解,并保持较高的含酸量,保持了较好的风味品质。     

1–甲基环丙烯在柿贮藏保鲜中的应用研究进展

 柿是呼吸跃变型果实,乙烯的作用对其成熟过程影响很大,乙烯竞争抑制剂1–甲基环丙烯（1-MCP）处理柿果实可延缓其软化,保持品质,延长贮藏期。综述了1-MCP的作用机理并阐述了其在柿果实贮藏保鲜中的应用现状以及脱涩保脆的最新进展。     

1-MCP处理对不同采收期鸭梨货架期保鲜效果的影响

利用1-MCP(1-methylcyclopropene)对不同采收期鸭梨进行采后处理,冷藏6个月后观察室温条件下的货架保鲜效果.结果表明:1-MCP处理可有效抑制不同采收期鸭梨果实乙烯的释放,推迟呼吸高峰,保持果实硬度及感官品质,减缓可溶性固形物含量、果皮电导率及果肉中丙二醛含量的上升,延缓了果实的后熟衰老进程.     

1-甲基环丙烯对‘富有’甜柿采后主要生理指标及细胞超微结构的影响

 以完全甜柿‘富有’ (Diospyros kaki L.‘Fuyu’) 为试材, 研究了在室温(20 ±2) ℃贮藏条件下1 - 甲基环丙烯(1-MCP) 0.50 μL·L^-1处理对果实的影响。结果表明: 1-MCP处理可显著抑制其呼吸速率、乙烯释放速率和衰老软化进程; 12MCP处理通过抑制果实中LOX活性的升高和MDA含量的积累,一定程度上维持了果肉细胞器和膜系统的完整性, 延缓甜柿果实的软化衰老进程。     

1–甲基环丙烯对甜柿贮藏中冷害的控制作用

研究了0.25、0.50、1.00 μL · L-1 浓度的1–甲基环丙烯（1-MCP）对4 ℃冷藏条件下‘阳丰’甜柿果实成熟生理和冷害发生的影响。结果表明：1-MCP处理推迟了冷害症状的出现,降低了果实细胞膜透性和丙二醛（MDA）含量;延缓了乙烯释放高峰出现的时间并降低了峰值;对呼吸速率没有明显影响;提高了超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性;对多酚氧化酶（PPO）和过氧化物酶（POD）活性变化有一定的抑制作用。1.00 μL · L-1　1-MCP对冷害的控制作用比其他两个浓度更显著。