鸡端粒酶反转录酶启动子区克隆及序列分析

根据GenBank(AY505015)报道的鸡端粒酶反转录酶序列设计了1对特异性引物,以鸡淋巴瘤细胞(MDCC-MSB1)总核酸为模板进行PCR。PCR产物连接到pMD19-T载体进行测序,通过BLAST对GenBank进行同源性搜索,并用DNAMAN分子生物学软件进行分析。结果测得MDCC-MSB1启动子区全长为997 bp,其中G C占50.78%。与国外报道的端粒酶反转录酶(AY505015)启动子区序列同源性为99.22%。与人端粒酶反转录酶启动子区相比:二者在起始密码子之前约250 bp均有1个E-box,但在chTERT启动子区新增加了4个c-Myb位点,而3个c-Ets2和WT1位点缺失,其他基序二者的分布基本相似。二者启动子区富含CpG岛,延伸到编码区。     

酵母端粒酶RNA的制备及其构型影响因素分析

【目的】体外转录并纯化酵母端粒酶RNA,明确缓冲液中组分对其构型的影响,初步研究四膜虫端粒酶相关蛋白p65与酵母端粒酶RNA的结合情况,为酵母端粒酶活性鉴定及构型功能研究奠定基础。【方法】利用核酶的自剪切功能,通过在3′端引入HDV核酶序列获得完整的酵母端粒酶RNA;并用分子筛SuperDeX-200/16/60凝胶过滤纯化酵母端粒酶RNA;琼脂糖凝胶电泳检测RNA Buffer组分中NaCl和MgCl2浓度对酵母端粒酶RNA构型的影响;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测四膜虫端粒酶相关蛋白p65与酵母端粒酶RNA的结合情况。【结果】通过基因序列合成,结合PCR扩增方法获得了酵母端粒酶RNA基因,并将其构建到体外转录载体上;体外转录获得大量的酵母端粒酶RNA(Yeast-RNA-239);使用SuperDeX-200/16/60成功分离得到了纯净的Yeast-RNA-239。NaCl、MgCl2浓度对酵母端粒酶RNA构型有一定的影响,表现为没有NaCl或MgCl2时,RNA的构型均一且致密;随NaCl、MgCl2浓度的增大,RNA构型逐渐变得松散;而四膜虫端粒酶相关蛋白p65能与酵母端粒酶RNA有效结合。【结论】在体外成功制备了高纯度的酵母端粒酶RNA,NaCl、MgCl2浓度对其构型有影响,四膜虫端粒酶相关蛋白p65能够帮助端粒酶RNA正确折叠。     

哺乳动物体细胞克隆胚胎端粒酶活性的研究进展

端粒酶(telom erase)是一种蛋白质与RNA组成的核糖核蛋白,是目前发现的唯一能够延长端粒的一种RNA依赖性DNA聚合酶。在DNA复制过程中丢失的端粒可以被有活性的端粒酶修复回来。哺乳动物端粒酶在发育中受调控,端粒的重编程可能是由于早期胚胎不同时期的端粒酶活性而造成的,因此,研究端粒和端粒酶重编程将为哺乳动物体细胞克隆技术奠定重要的理论基础。本文综述了端粒和端粒酶的结构和功能,及其与哺乳动物体细胞克隆早期胚胎发育的关系,并在此基础上探讨了端粒酶在体细胞克隆动物胚胎发育中的重要作用。     

嗜热毛壳菌端粒酶的表达纯化及酶学特性分析

为进一步探究端粒酶的酶学特性,以嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilum, Thermo)端粒酶为研究对象,通过生物化学、生物信息学等方法得到4种不同长度的Thermo端粒酶蛋白,分别与体外转录得到的Thermo端粒酶RNA进行组装。通过端粒酶体外延伸试验检测组装体的反转录活性,进一步分析影响其反转录活性的各种因素。结果表明,4种不同长度的Thermo端粒酶蛋白重组质粒经大肠杆菌表达系统诱导表达后均可得到相应的Thermo端粒酶蛋白,且纯度均在90%以上;体外孵育试验表明,在10 mmol/L HEPES-KOH(pH 8.0)、1 mmol/L MgCl₂、100 mmol/L NaCl、3 mmol/L KCl、体积分数25%Glycerol、10units/μL Rnasin的条件下,端粒酶蛋白与RNA的摩尔浓度比达到1∶1及以上时,两者能有效复合;端粒酶体外延伸试验发现,结构完整的Thermo端粒酶组装体具有很强的反转录活性,可使18nt-DNA引物反复延伸。TEN结构域不完整并未减弱Thermo端粒酶组装体的反转录活性,说明其在反转录过...     

端粒、端粒酶与干细胞

随着组织细胞工程学的兴起,干细胞已成为研究的焦点。干细胞有限分化增殖限制干细胞应用,端粒、端粒酶与干细胞增殖分化密切相关。本文就端粒、端粒酶与干细胞作用的分子机制及其研究进展作一综述。     

植物端粒与端粒酶研究进展

端粒是位于真核生物染色体末端的DNA序列,而端粒酶具有修复延伸端粒的功能,端粒和端粒酶对于维持真核生物染色体的完整性至关重要。在参阅了大量文献资料的基础上,结合课题组的研究工作,对国内外关于端粒、端粒酶的研究进展情况予以汇总,特别突出端粒、端粒酶在植物生长发育中的调控作用,为人类更好地了解和开展有关端粒和端粒酶的研究工作提供借鉴。     

端粒和端粒酶的结构与功能及其应用

端粒是构成真核生物线状染色体末端重要的DNA-蛋白质复合结构,DNA由简单的串联重复序列组成．它的合成由一个特殊的具有反转录活性的核糖核蛋白端粒酶完成．端粒对染色体、整个生物基因组,甚至对细胞的稳定都具有重要意义．端粒酶是由RNA模板和蛋白亚基组成的核蛋白颗粒．它解决染色体的末端问题,归属于逆转录酶家族又和逆转录酶有一定的差别．端粒酶的过度表达和细胞的永生化和癌变直接相关．端粒酶的结构和功能决定了它在肿瘤与癌症治疗等方面具有广泛的应用前景．     

端粒酶与体细胞重编程的最新研究进展

端粒酶与体细胞重编程是当今生物界最热门的研究领域之一。研究端粒酶能揭示生物体胚胎早期发育、衰老和癌症发生的机制;细胞重编程则有望从根本上解决体细胞克隆技术问题,从而开启生命再造新时代。文章通过对端粒酶与体细胞重编程及二者互作机制的最新研究进展进行详细阐述,发现细胞重编程面临的主要问题是效率低下,其根本原因是对其作用机制尚未完全了解;而最新研究证实,生殖细胞的端粒酶活性发生时序性变化可能在胚胎发育及细胞重编程过程中发挥重要调控作用。因此,揭示细胞重编程机制是今后研究工作的重心,尤其是揭示端粒酶在胚胎发育过程的分子调控机理及端粒酶调控细胞重编程可能开启的信号通路,对提高细胞重编程效率,推进克隆动物的生产实践并开启生命再造,以及为治疗癌症等人类重大疾病具有重要意义。     

接种不同毒力马立克氏病毒对鸡端粒酶活性和致病性的影响

以MDV京-1株和GA株诱发的MD为肿瘤模型,跟踪测定了鸡生长过程中脾脏组织的端粒酶活性变化。结果表明,端粒酶活性在没有临床症状和可视病变出现之前便可检测到。随着MDV感染日龄的增加逐渐升高,在其相对活力达到最高值后,总体水平略有下降,但依然存在端粒酶活性;而疫苗株CVI988接种后,整个生长过程其端粒酶均呈阴性。发生MD病变的鸡生长迟缓,中枢性免疫器官胸腺和法式囊严重萎缩,并出现体内肿瘤。无论是病变程度,还是死亡个数和时间,京-1株的致病性均高于GA株。     

TNF-α对下丘脑神经元的影响研究进展

介绍了肿瘤坏死因子TNF-α的发现、结构及其作用的信号通路,并从神经元的发育、生存、离子平衡和神经递质释放等方面综述了近年来TNF-α对下丘脑的影响研究进展.     

当代徽派服饰的发展战略探析

振兴安徽服装业是安徽省在中部崛起中的重要战略举措之一。在对中部崛起与振兴安徽服装业关系分析的基础上,探讨元素风格和文化张力与当代徽派服饰的发展问题,认为当代徽派服饰的发展要优化产业布局,形成产业集群优势;要借鉴徽派装饰艺术特点,形成地域品牌特色;要坚持产学研结合,提升核心竞争力,创造出一条既具地域特色又具时代气息的现代徽派服装产业发展之路。     

我国城市化进程中体育产业发展问题研究

用历史研究法以及相关的量化数据，通过对古今中外城市化发展基本规律的分析，探讨了当前我 国城市化发展的阶段性特点，进而阐述了城市化发展与体育产业发展的相互作用及其关系，指出我国体育 产业发展将呈现大众健身娱乐业蓬勃发展、高水平竞赛表演业发达、公共服务型体育产品有待开发、体育 产业结构优化升级等新趋势。     

农业类上市公司资本结构与企业价值间关系的实证研究

对农业类上市公司资本结构与其企业价值间关系的研究能为该类企业资本结构的改进提供借鉴。在选择资本结构和企业价值度量指标的基础上建立了分析两者之间关系的时间序列模型,基于2000～2006年的数据对两者之间的关系进行了实证分析。研究结果表明,企业价值与资本结构之阃存在显著的线性关系,而且数据越新关系越显著,同时模型结果也表明不同企业之间资本结构与企业价值之间的关系差别较大。     

陕西省土地利用变化和社会经济发展的关系研究

以1997~2007年陕西省的土地利用数量、结构的变化以及主要社会经济指标的发展变化数据为基础,运用相关性分析、拟合回归和多元线形回归分析,对定量化分析区域土地利用和社会经济发展的关系进行了探索。结果表明,陕西省土地利用的变化促进了社会经济效益的提高,主要的社会经济指标分别呈指数和二项式形式增长;定量化分析结果显示,与其他土地利用类型比较,建设用地与各社会经济指标具有较强的关联性,说明其在社会经济发展中发挥着至关重要的作用。在此基础上,对如何实现社会经济发展对建设用地的需求并达到区域土地资源的合理配置提出了相应的对策和建议。     

河流与开放空间耦合的城市绿地生态网络构建

随着我国城市化进程的加快,城市生态环境面临着越来越严峻的考验,为了促进城市的可持续发展,构建城市绿地生态网络、维护城市生态系统的稳定性成为众多领域研究的重点。河流作为城市绿地生态网络的核心空间结构,开放空间作为绿地生态网络的基础,二者关系的研究对构建城市绿地生态网络具有重要意义。在研究河流与开放空间耦合关系的基础上,结合对城市绿地生态网络含义、功能机制、评价指标的分析,以南阳市为例,提出河流与开放空间耦合的城市绿地生态网络构建方法。     

橡胶树抗寒性研究现状与展望

概述了橡胶树抗寒育种的进展情况,结合当前对橡胶树结构,发育、水分、生物膜结构、呼吸作用、物质代谢与抗寒性的关系研究,慨括了寒害胁迫对橡胶树的伤害及橡胶树抗寒性的生物学机理.通过橡胶树多项生理生化指标,可以综合有效地评价橡胶树的抗寒性.要解决橡胶树的寒害问题,最有效的方法还是要通过分离多种植物的多种抗寒基因,深入研究植物的抗寒分子机理,利用基因工程培育抗寒品种.     

英国球迷群体认同多元化发展研究*

通过文献资料、访谈和数理统计等方法，对英国足球球迷群体多元化发展进行了研究。从足球球迷群体的发展历程看，英国足球球迷群体的形成最初基于鲜明地域认同，随着传统社区改变、媒体和消费文化的发展，球迷群体认同已经由最初单一的地域性认同发展为包含了液态社区认同在内的多元化认同。球迷群体的地域性和历史性不再是联系球迷的主要纽带，以兴趣性和消费性为认同基础形成的球迷文化逐渐成为球迷文化的重要内容。多元化的足球球迷群体意味着足球俱乐部经营策略的多元化。俱乐部需要更加清晰地把握球迷群体发展的阶段和特征，进而促使俱乐部和利益相关方提供更加有针对性的产品和服务，为足球俱乐部的发展提供更加有利的支持。     

景观生态空间异质性的研究进展

空间异质性是新兴的景观生态学研究的核心问题，已成为国内外景观生态学界研究的焦点。从空间异质性概念、空间结构特征与尺度关系和景观生态规划的实践研究等方面综述了空间异质性的研究进展，指明了景观空间格局与生态过程之间的影响与反馈研究应重视景观内在的生态流作用的发展方向，最后提出了将异质性理论运用于景观生态规划的发展目标。参41     

采伐对森林景观影响的研究进展

采伐既是影响森林景观结构特征的关键因子,又是森林经营和可持续发展的核心内容.通过控制采伐格局能构造理想的、可持续利用的、和谐的森林景观格局.采伐格局与森林景观的关系始终受到林学家和景观生态学家的特别关注.从采伐对森林景观影响的研究方法入手,总结了国内外在景观尺度上研究森林采伐影响的现状,针对国内外采伐对森林景观影响研究存在的问题,指出了我国今后森林采伐对森林景观影响的研究方向.