饲料中黄曲霉毒素B_1酶联免疫测试法

无锡市生物技术公司生产的黄曲霉毒素B_1酶联免疫测试盒(ELISA Kit For AFB_1),采用固相酶联免疫吸附ELISA原理,通过抗黄曲霉毒素B_1抗体与酶标抗原、待测抗原的竞争免疫反应以及酶的催化显色反应相结合,来检测AFB_1,特点是灵敏度高,特异性好,操作简便,结果易判读。 1 试剂盒组成 包被抗体反应板:48孔 A试剂:稀释液1瓶 B试剂:允许量对照1瓶 C试剂:酶标抗原2瓶 D试剂:酶标抗原稀释液1瓶 E、F、G、H试剂:各1瓶 反应板支架1个     

用酶联免疫吸附法测定鸡肉、鸭肉中金刚烷胺药物残留

本实验用酶联免疫吸附法测定鸡肉、鸭肉中金刚烷胺药物残留量。实验结果表明,试剂盒灵敏度为0.27μg/L;方法最低检测限为0.5μg/kg;在添加浓度为0.5μg/kg、1.0μg/kg、1.5μg/kg的空白鸡肉、鸭肉中的回收率均在84%～112%之间;各添加浓度的批内、批间变异系数均小于12%,该方法具有较好的准确度和精密度。因此可用酶联免疫吸附法对鸡肉、鸭肉中金刚烷胺药物残留先进行初步筛选,对疑似阳性样品再用仪器法确认。     

“瘦肉精”检测原理及操作步骤

1测定原理 ＂瘦肉精＂（克仑特罗）竞争酶标免疫检测的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体（第2抗体）。加入兔抗克仑特罗特异性抗体（第1抗体）与第2抗体结合而被固定,洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物（酶标记抗原）,     

检测动物组织中金刚烷胺残留的酶联免疫试剂盒的研制

通过对金刚烷胺分子结构进行改造,制备得到了金刚烷胺半抗原及人工抗原,免疫动物,制备特异性单克隆抗体。在筛选金刚烷胺单克隆抗体的基础上,建立酶联免疫检测方法,并研制出检测动物组织中金刚烷胺残留的试剂盒。该试剂盒工作范围为0.5~40.5μg/L,线性回归方程为y=-2.069x+0.493,IC_(50)为2.1μg/L,相关系数R2为0.998;试剂盒检测限为0.25μg/kg,金刚烷胺回收率在82.5%~91.0%,批内、批间变异系数均小于10%;与阿莫西林、苯唑西林、头孢噻呋三种类似结构药物均无交叉反应。该试剂盒灵敏度高、检测限低、特异性强、操作简便,可广泛用于动物组织中金刚烷胺残留量的测定。     

来自饲料厂和养殖场生产第一线的若干问答(十二)

<正>1酶联免疫吸附法和免疫亲和柱-荧光法对测试结果差异有多大?怎么确定两者测定结果是可靠的(重庆市蜀达饲料有限公司,唐明)?答:酶联免疫吸附法是一种固相免瘦测定技术,先将抗体或抗原包被到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。测定时,将待检样本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相我体表面吸附的抗体或抗原发生反应,后加入酶标抗体与免疫复合物结合,     

重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体的ELISA研制——Ⅲ.ELISA试剂盒保存条件

对应用重组N蛋白抗原检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的ELISA诊断方法的主要成分（抗原包被板、酶标二抗、阳性血清、阴性血清）及组装成的试剂盒的保存条件进行了摸索。分别用5种方法时抗原包被板处理，结果表明用真空包装机抽真空后充入氮气法处理效果最好；酶标二抗在酶标抗体保存液中保存，能很好地保持ELISA测定结果的稳定性。时其他试剂盒组成成分的保存期分别测定后，组装成试剂盒，测定试剂盒的保存期为12个月。     

禽肉和禽蛋中金刚烷胺风险评估调查研究

采用金刚烷胺酶联免疫吸附试剂盒和液相色谱串联质谱法测定禽肉和禽蛋中金刚烷胺药物残留,随机抽取禽蛋606批次,禽肉278批次,经过金刚烷胺酶联免疫吸附试剂盒筛选后,通过LC-MS/MS确证,共检出3批阳性样品。结论:快速筛选法是大批量样本药物残留检测的有效手段,可以大大提高工作效率。金刚烷胺作为禁用药物,依然在畜禽养殖使用,从阳性溯源结果来看,具有明显的渠道分布规律,规模养殖户明显好于一般养殖户,超市渠道要好于农贸市场的样品。     

赛庚啶ELISA检测试剂盒的研制及其性能评价

基于直接竞争法原理酶联免疫技术研制了一种测定动物尿液中赛庚啶(CHP)残留量的检测试剂盒,并对试剂盒的检测限、特异性和稳定性等参数进行确定。通过在CHP分子上引入活性羧基,在EDC作用下分别偶联到KLH、BSA上形成CHP-KLH和CHP-BSA抗原,CHP-KLH抗原免疫BALB/C小鼠制得抗CHP单克隆抗体,经辣根过氧化物酶HRP标记抗CHP抗体,采用CHPBSA抗原包被酶标板,最终成功构建动物尿样中CHP残留量的竞争酶联免疫法检测体系,并进行性能测试评价。结果表明,吸光度百分比值与CHP质量浓度的对数在0.1~1.6μg/L呈线性关系,相关系数R~2为0.986,半数抑制浓度(IC_(50))为0.316μg/L,检测限为0.158μg/L,回收率在80%~110%,变异系数为2.0%~10.0%。方法具备良好的特异性,可用于动物尿样、血清及组织中CHP残留的快速检测。     

酶联免疫法检测动物源性食品中甲羟孕酮的残留

本试验旨在利用酶联免疫技术对鸡肉和鱼肉中的甲羟孕酮药物残留进行检测。经过测试,该试剂盒对鸡肉和鱼肉样本的检测限均为ug／kg;当药物添加浓度为1、2、4ug／kg时,其平均回收率范围是65．5％～94．6％,批内、批间相对标准偏差均小于10％;交叉反应率试验表明该试剂盒的特异性良好：酶联免疫法与仪器法的验证结果一致。     

磺胺二甲嘧啶快速直接竞争ELISA试剂盒的研制及应用

在多克隆抗体的基础上研制一种用于检测动物源性食品中磺胺二甲嘧啶(SMZ)残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒,并与高效液相色谱(HPLC)分析方法比较和验证.将磺胺二甲嘧啶添加到猪肝、猪肉和鸡肉样品中,用所制备的试剂盒和HPLC分析方法检测样品中的磺胺二甲嘧啶残留,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定.研究结果表明,磺胺二甲嘧啶浓度在0.5～50 ng·mL-1,方法的检测灵敏度IC10 =0.47 ng·mL-1,板内平均变异系数为7.4％,板间平均变异系数为9.27％.猪肝、猪肉与鸡肉组织样品中SMZ最低检测限分别为3.91、4.81与1.59 μg·kg1.在添加10.0～50.0 μg·kg-1时,平均回收率在85％～110％.试剂盒的检测时间为12.6 min,在4℃至少可以保存6个月.研制的试剂盒可以满足猪肝、猪肉和鸡肉中磺胺二甲嘧啶残留的现场快速检测.     

酶联免疫快速检测技术应用的研究

<正>近几年,随着人民生活水平的提高,畜产品作为食品在人民的生活中所占的比例越来越大,其质量安全也越来越受到人们的关注。为了确保可食性畜产品的质量安全,需要一种快速、简便、灵敏度高的检测技术,酶联免疫吸附试验具备这些优点。酶联免疫吸附试验3个基本构成条件为:1)抗原抗体的固相化,即使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。2)抗原抗体的酶标记,即使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗     

检测鸡肉中甲羟孕酮酶联免疫试剂盒的研制

试验旨在利用酶联免疫技术研制一种快速检测鸡肉中甲羟孕酮的试剂盒。经测试,该试剂盒对鸡肉样本的检测限为1 μg/kg,批内、批间相对标准偏差均小于10%;稳定性测试结果表明,试剂盒能在4℃保存12个月;交叉反应率结果表明,单克隆抗体特异性良好。该试剂盒的操作时间仅需45 min,适合现场大量样本的快速检测。     

囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展

由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。     

新型喹乙醇残留标志物人工半抗原的设计及其在动物组织残留检测中的应用

为提高酶联免疫方法测定喹乙醇残留标志物(MQCA)的检测性能,设计了一种新型MQCA人工半抗原,该半抗原既完整保留MQCA分子特征性基团和结构,又具有便于和蛋白质载体偶联的基团-NH2。通过三步化学反应合成该半抗原,将其与蛋白质载体偶联成为免疫抗原后,进一步制备特异性抗体,研制了MQCA酶联免疫试剂盒,灵敏度高,特异性好,IC50为1.94μg/L。建立了测定动物性产品中MQCA残留量的直接竞争酶联免疫法,测定猪肝、猪肉、鸡肉、鸡蛋中MQCA的检测限分别为0.42、0.23、0.28、0.28μg/kg。猪肉中不同添加浓度MQCA(1,2,4μg/kg)的回收率为70%~97%;批内、批间变异系数均低于12%。本试剂盒可同时快速检测大批样品,有望在MQCA残留检测中发挥重要作用。研究有助于指导小分子药物半抗原的合理设计,为现有的半抗原设计方法提供新的理念和思路。     

褪黑激素ELISA方法的建立

将褪黑激素（MLT）与牛血清白蛋白（BSA）连结的复合物（MLT：BSA＝12：1）免疫5只雄性新西兰大耳兔，收集高效价血清，并提纯抗体。在96孔微量反应板上，以1：10000的抗体包被，将MLT与酶标MLT先后加入到板中竞争结合抗体，制定标准曲线，建立了MLT酶联免疫测定法（MLT－ELISA）。此方法灵敏度为17．31pg,板内变异系数8．1％，板间变异系数15．4％，用建立的此法测定夏至时考力代羊昼夜血样，测定结果跟国外报道的基本一致；用放射免疫法检测同一批血样，也获得类似结果，从而表明此方法可信。     

酶联免疫吸附法测定牛奶中庆大霉素的残留量

本文采用ELISA检测试剂盒,测定牛奶中庆大霉素的残留量,牛奶样本经离心后,取上清液,采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被偶联抗原,样本中残留的庆大霉素将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗庆大霉素抗体,加入酶标二抗后,用TMB底物显色,结果表明样本吸光值与残留物庆大霉素的含量成负相关。     

高灵敏度酶联免疫法快速检测动物源性产品中氯霉素残留的研究

本试验旨在应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测动物组织中氯霉素的残留。根据试剂盒操作说明对样本进行前处理,样品中的氯霉素与氯霉素酶结合物竞争结合酶标板微孔中固相化的氯霉素特异性抗体,根据酶催化显色剂显色的深浅来判断样品中氯霉素含量。试验结果显示,该方法对样品的检测限在0.1 μg/kg以下;以20~300 ng/kg浓度的氯霉素添加到动物源性产品中,其回收率范围74.4%~105.4%;变异系数在15%以下。结果表明建立的ELISA试剂盒能满足检测动物源性产品中氯霉素残留的需要。     

鸡血清中磺胺二甲嘧啶残留的酶免疫法测定

用直接竞争酶免疫测定法测定磺胺二甲嘧啶（ＳＭ２）在鸡血清中的残留,血清中的ＳＭ２与酶标ＳＭ２竞争酶联板上的抗ＳＭ２抗体的结合位点,最低检出限为５０μｇ／Ｌ。在１００μｇ／Ｌ处,回收率为９１％。对１１种磺胺类和非磺胺类药物进行测定,最大交叉反应只有０．５％。     

某规模化养猪场猪瘟、蓝耳病及伪狂犬抗体检测与分析

应用IDEXX酶联免疫分析(ELISA)试剂盒,分别对某规模化养猪场送检的100份血清进行猪瘟病毒抗体、猪蓝耳病病毒抗体、猪伪狂犬病毒gB抗体检测。结果显示,上述3种试剂盒检测,阳性率分别为79.0%、91.0%、83.0%。据此对该猪场免疫状况进行了分析。     

犬狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用

用狂犬病毒单克隆抗体预包被酶标板,将纯化的狂犬病毒作为检测用抗原,利用捕获包被法建立了间接ELISA法用于犬狂犬病病毒抗体的检测。通过优化ELISA条件,研制试剂盒并应用于犬狂犬疫苗的免疫效果检验。利用研制的试剂盒与RFFIT、商品化同类试剂盒对30份犬血清进行平行检测,总符合率分别为90%和93.33%,与其它几种常见犬病毒抗体阳性血清无交叉反应。试剂盒批内、批间变异系数分别为1.45%～5.79%和2.35%～7.21%,2～8℃保存12个月稳定。基于用单抗预包被后再包被检测抗原,本试剂盒检测样品抗体的灵敏度和稳定性得以显著提高,因此适合于不同来源狂犬疫苗人工免疫犬血清的RV抗体水平监测。