检测动物组织中金刚烷胺残留的酶联免疫试剂盒的研制

通过对金刚烷胺分子结构进行改造,制备得到了金刚烷胺半抗原及人工抗原,免疫动物,制备特异性单克隆抗体。在筛选金刚烷胺单克隆抗体的基础上,建立酶联免疫检测方法,并研制出检测动物组织中金刚烷胺残留的试剂盒。该试剂盒工作范围为0.5~40.5μg/L,线性回归方程为y=-2.069x+0.493,IC_(50)为2.1μg/L,相关系数R2为0.998;试剂盒检测限为0.25μg/kg,金刚烷胺回收率在82.5%~91.0%,批内、批间变异系数均小于10%;与阿莫西林、苯唑西林、头孢噻呋三种类似结构药物均无交叉反应。该试剂盒灵敏度高、检测限低、特异性强、操作简便,可广泛用于动物组织中金刚烷胺残留量的测定。     

猪、牛、鱼组织中四环素类药物残留的测定

以本实验室研制的四环素类药物多残留检测试剂盒为基础，建立了猪、牛、鱼组织中四环素、土霉素、金霉素和多西环素4种药物残留的酶联免疫检测方法。该方法在猪、牛、鱼组织中的检测限均低于13μg/kg，4种四环素类药物最高残留限量浓度添加回收率范围为47．5％～119．4％，批内、批间变异系数在25％以内。检测各种组织中四环素类药物的临界值分别为猪肉49．2μg／kg、猪肝138．7μg／kg、牛肉52．1μg／kg、牛肝124．4μg／kg、鱼肉44．1μg／kg。     

饲料中地西泮残留的酶联免疫检测试剂盒研制

为快速、简便地检测饲料中地西泮的残留,应用间接竞争酶联免疫原理研制出饲料中地西泮残留检测试剂盒,并对其性能进行评价。结果:试剂盒的灵敏度为0.1μg/L,对配合料、浓缩料、预混料的检测限分别为10、20、20μg/kg;平均添加回收率为71.5%～94.2%,批内、批间相对标准偏差均小于15%;与地西泮结构类似物无交叉反应。结果表明:研制的试剂盒检测快速、灵敏度高、特异性强,适用于从源头上对动物性食品中的地西泮残留进行检测监管。     

各类农兽药多残留检测的酶免疫分析法

1原理农兽药多残留酶免疫分析法的基本原理是根据待测药物的共性结构或共有结构特征,设计并合成突出其结构特征的半抗原,半抗原偶联大分子蛋白质作为全抗原并免疫动物,通过细胞融合获得杂交瘤细胞,收集并纯化杂交瘤细胞分泌的类特异性抗体,利用抗体建立酶免疫吸附测定（ELISA）、免疫胶体金（GICA）等免疫分析法。     

鸡肉中硝基咪唑类药物残留ELISA检测试剂盒的研制

分别利用戊二酸酐法和碳化二亚胺法合成半抗原和免疫抗原免疫动物,制备特异性强的单克隆抗体.在筛选硝基咪唑类单克隆抗体的基础上,建立ELISA检测方法,并研制出对鸡肉中硝基咪唑类药物残留检测试剂盒.试剂盒最低检测限为0.04μg/kg,样本添加回收率为69.4%～107.5%,批内变异系数为7.8%～14.6%,批间变异系数为10.90%～16.5%.该方法的建立为硝基咪唑类药物残留的检测提供了便捷、准确的分析检测手段.     

酶联免疫法测定猪肉中磺胺类药物的残留

利用酶联免疫法对猪肉中的磺胺类药物残留进行检测,结果表明:该方法的灵敏度为1μg/L,最低检测限为1.5μg/kg;向空白样本中添加浓度为100、200μg/kg磺胺标准品时,平均回收率范围为76.1%～101.7%,变异系数为4.6%～11.9%;利用该方法与液相色谱-串联质谱法检测实际样本,其阴、阳性判断结果一致。该法灵敏准确、重复性好、特异性高,适用于对猪肉中15种磺胺类药物进行多残留检测。     

化学发光免疫试剂盒检测猪肉中呋喃西林代谢物的残留

为了快速检测猪肉中呋喃西林代谢物残留量,试验采用自主研发的以磁性微球为固定相的化学发光免疫试剂盒,并对其方法学进行评价及与高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS法)检测结果进行比较分析。结果表明:采用化学发光免疫试剂盒测定猪肉中呋喃西林代谢物的灵敏度为0.331μg/kg,精密度较好,最低检测限为0.077μg/kg,与呋喃西林原药的交叉反应率为8.9%,与其他类似物的交叉反应率均0.1%,平均回收率为92.7%~104.8%,与HPLC-MS/MS法检测样本的阴性和阳性结果一致。说明该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、检测速度快等特点,适用于现场快速检测猪肉中呋喃西林代谢物的残留。     

酶联免疫法测定鸡肉中尼卡巴嗪残留

为了建立鸡肉中尼卡巴嗪残留标志物4,4’-二硝基均二苯脲（DNC）残留酶联免疫（ELISA）检测方法。将N-琥珀酰-L-丙氨酰-L-丙氨酰-L-丙氨酸4-硝基苯胺（SAN）与载体蛋白偶联作为抗原免疫动物,获得抗DNC抗体,在此基础上建立了鸡肉中尼卡巴嗪残留的检测方法。人工抗原中SAN与载体蛋白的结合比约为12：1,血清效价1：2000倍,鸡肉中检测限为9．2μg／kg,添加回收率在49．4％～118％之间,批内、批间变异系数均小于20％。该方法在灵敏度、精密度和准确度方面均能满足兽药残留筛选检测要求。     

酶联免疫法检测动物源性食品中甲羟孕酮的残留

本试验旨在利用酶联免疫技术对鸡肉和鱼肉中的甲羟孕酮药物残留进行检测。经过测试,该试剂盒对鸡肉和鱼肉样本的检测限均为ug／kg;当药物添加浓度为1、2、4ug／kg时,其平均回收率范围是65．5％～94．6％,批内、批间相对标准偏差均小于10％;交叉反应率试验表明该试剂盒的特异性良好：酶联免疫法与仪器法的验证结果一致。     

用酶联免疫吸附法测定鸡肉、鸭肉中金刚烷胺药物残留

本实验用酶联免疫吸附法测定鸡肉、鸭肉中金刚烷胺药物残留量。实验结果表明,试剂盒灵敏度为0.27μg/L;方法最低检测限为0.5μg/kg;在添加浓度为0.5μg/kg、1.0μg/kg、1.5μg/kg的空白鸡肉、鸭肉中的回收率均在84%～112%之间;各添加浓度的批内、批间变异系数均小于12%,该方法具有较好的准确度和精密度。因此可用酶联免疫吸附法对鸡肉、鸭肉中金刚烷胺药物残留先进行初步筛选,对疑似阳性样品再用仪器法确认。     

抗球虫药尼卡巴嗪的残留检测方法进展

尼卡巴嗪是一种广谱、高效、性能稳定的饲料添加剂,用于防治鸡、火鸡等禽类球虫病,对已产生耐药性的球虫,仍有显著疗效。然而,尼卡巴嗪残留对人体存在潜在的威胁,需对其进行残留监控。目前,尼卡巴嗪残留检测方法很多,包括高效液相色谱法,差示脉冲极谱法,分光光度法,气相色谱法,高效液相色谱串联质谱法以及免疫色谱法。本文对这些方法加以综述。     

尼卡巴嗪的残留检测方法进展

尼卡巴嗪是一种广谱、高效、性能稳定的饲料添加剂,用于防治鸡、火鸡等禽类球虫病,对已产生耐药性的球虫,仍有显著疗效。然而,尼卡巴嗪残留对人体存在潜在的威胁,需对其进行残留监控。综述了尼卡巴嗪残留检测方法,包括高效液相色谱法,差示脉冲极谱法,分光光度法,气相色谱法,高效液相色谱串联质谱法以及免疫色谱法。     

酶联免疫吸附法检测磺胺对甲氧嘧啶残留

用戊二醛法将磺胺对甲氧嘧啶 (SMD)与载体蛋白牛血清白蛋白 (BSA)偶联制备合成抗原 SMD- BSA用作免疫原 ,同法合成包被抗原 SMD- OVA(卵清蛋白 ) ,免疫家兔获得抗血清 ,用双向琼脂扩散试验和 EL ISA法对抗血清进行了定性定量测定。结果表明 ,抗血清特异性地针对 SMD,其效价为 1∶ 2 5 6 0。用所制备的抗血清建立了间接竞争EL ISA法。优选的 EL ISA的工作条件 :包被抗原最佳包被质量浓度为 5 0 mg/ L ,抗血清最佳稀释度为 1∶ 10 0 ,酶标抗体的最适工作稀释度为 1∶ 5 0 0。标准工作曲线表明 ,抗血清检测在 10～ 2 0 0 0 μg/ L 范围内呈良好的线性关系 ,超过2 0 0 0μg/ L则线性关系较差 ;该法检测底限为 6 3μg/ L ,低于国际规定残留限量 (10 0μg/ kg)和国内规定残留限量 (30 0μg/ kg)的要求。按建立的 EL ISA法测定了方法的回收率 ,无基础本底的牛奶样品回收率为 94 .7%。按药典剂量给鸡肌肉注射 SMD,连续注射 3d,在第 0～ 7天分别采血 ,按建立的 EL ISA方法测定了血清中的 SMD残留含量     

氨苄青霉素残留检测方法研究进展

随着人民生活水平的提高,畜禽产品中药物残留日益受到重视。氨苄青霉素在兽医临床应用广泛,残留在畜禽产品中危害人体的健康。论文综述了氨苄青霉素的残留状况和氨苄青霉素残留检测方法的研究进展。     

氯苯胍在鸡组织中的残留消除规律研究

采用超高效液相色谱一串联质谱法（UPLC-MS／MS）研究了氯苯胍在鸡组织中的残留消除规律。白来杭鸡以含氯苯胍500mg／kg饲料饲喂7d,停药后的第0、1、3、5、7天取其肌肉、肝脏、肾脏、皮和脂肪五种组织,采用UPLC-MS／MS法测定其残留状况。结果表明,氯苯胍在肌肉中残留量较小,代谢消除比较快,2d后未检出;而在脂肪、皮和肝脏中残留量较大,代谢消除较慢。     

氟喹诺酮类药物残留检测方法研究进展

药物残留直接危害人体健康,近年来畜产品中药物残留问题倍受关注.氟喹诺酮类药物残留检测的方法较多,同时也获得了大量的试验数据.常用的方法有微生物法、免疫分析测定法、免疫亲和色谱-液相色谱法、高效液相色谱法、高效毛细管电泳法、液相色谱-质谱-质谱法、薄层色谱法、荧光分光光度法等.文章对这些检测方法从定性(筛选)和定量两个方面进行综述.     

纯牛奶中抗菌药物残留的检测

为了解山西省交城县各大超市销售纯牛奶中抗菌药物残留情况，随机采购此牛奶50份，分别用TTC法、微生物检测法和酶标免疫分析法进行抗生素残留检测。TTC法检测出阳性率为8％，可疑率为6％；微生物法检测出青霉素类残留阳性率为10％。酶标免疫分析法检测出四环素类阳性率为8％；链霉素残留阳性率为22％；磺胺二甲嘧啶检测全部为阴性。结果表明，交城县各大超市售纯牛奶中有部分存在抗菌药物残留。     

利用洋芋粉渣育肥八眉猪试验效果

用分组对比法测定育肥猪日粮中添加洋芋粉渣的育肥效果及洋芋粉渣的饲用价值。结果表明:用洋芋粉渣代替部分精料不影响育肥效果,两组体重差异不显著(P>0.05)。每公斤干粉渣可代替0.455玉米粉+1.03kg麸皮的猪饲料。同时还指出,气温22～27℃时,露天堆放洋芋粉渣第10d开始严重腐败。建议生产者将洋芋渣立即做饲料利用或妥善保藏。     

免疫分析法在兽药残留分析中的应用

免疫分析是利用抗原与抗体的特异性结合反应为基础的分析技术,以抗体为核心试剂,具有高选择性、高灵敏度等特点。免疫分析在兽药残留分析中有广泛的应用前景,已经渗透到兽药残留分析的各个环节。文章主要从分析原理出发,对免疫亲和色谱(IAC)、酶免疫分析(EIA)、发光免疫分析(LIA)、荧光免疫分析(FIA)和生物传感器(biosensor)的应用进行了综述,并展望了其前景。     

双烯雌酚残留检测方法研究进展

双烯雌酚是一种人工合成的雌激素,因其残留对人体有明显的毒害,故而其在相关动物性产品中的残留受到世界各国的共同关注。目前,双烯雌酚残留检测方法主为仪器分析法,但其繁琐的分析步骤不适合药物的及时监控,而免疫学分析方法以其耗费低、特异强、灵敏高等优点,可作为兽药残留的筛选方法,因而具有广阔的应用前景。