葡萄球菌蛋白A(SPA)的性质与应用

葡萄球菌蛋白 A(StaphylococcalProtein A,简称 SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁所特有的一种成分。它具有能与人及多种哺乳动物血清中 IgG 的 Fc 段发生非特异性结合,且不影响抗体与抗原相互反应的特性。由于 SPA 的此种特性,近年来,国内外在细菌、病毒等病原的快速诊断与分型和肿瘤的研究以及免疫学基础理论研究方面,均有广泛应用。一是以 SPA 作载     

特异抗体标记金黄色葡萄球菌No.1800株在猪丹毒猪肺疫猪副伤寒及猪败血性链球菌病区别诊断上的初步应用

金黄色葡萄球菌 A 蛋白(简称 SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分。早在1940年 Verwey 首先描述了金黄色葡萄球菌的某些菌株的一种抗原成分,能与人的正常血清在双相琼脂扩散试验中出现沉淀线。1958年 Jensen 也报导了类似结果,并发现葡萄球菌的这种抗原成分是细胞壁的组成部分。1964年,Grov 等称葡萄球菌的这种细胞壁成分为 A 蛋白。1966年,Forsgren 等发现 SPA 能与人正常血清的 IgG 的 Fc 段发     

葡萄球菌A蛋白及其在免疫学上的应用

葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A,SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种抗原成分。虽然早在1940年Verwey研究金黄色葡萄球菌型特异性抗原时就接触到这种抗原,但真正对A蛋白有所认识还是十多年以后的事。1959年Jensen发现正常动物血清能和A蛋白发生反应,并将这种蛋白称为A抗原。1963年Lfkvist等分离到了这种抗原。后来Grov(1964)等为了将这种抗原物质与A多糖区     

基因工程产品SPAG简介

葡萄球菌A蛋白(SPA)发现于1940年,70年代后得以广泛应用。尽管一些金黄色葡萄球菌可以分泌丰富的SPA,但其应用范围远不及链球菌G蛋白(SPG)。SPG发现于70年代,但G组链球菌难以培养,SPG的分泌量也少,而且纯化步骤复杂;此     

应用葡萄球菌A蛋白协同凝集试验在多杀性巴氏杆菌分型上的研究

近年来,国内外对金黄色葡萄球菌A蛋白(简称SPA)及其在免疫学和血清学方面的应用已进行了广泛研究。SPA与IgG的Fc段结合后,有抗体活性的Fab段暴露于SPA的表面,当有特异抗原存在时,则可发生协同凝集反应。根据这一原理,在国外,已广泛应用SPA菌制剂进行细菌的分群(型)和鉴定。如Kronvall(1973)的肺炎球菌快     

鸭出血症葡萄球菌A蛋白的协同凝集试验的建立

用富含A蛋白的金黄色葡萄球菌国际标准菌株Cowan Ⅰ致敏兔抗鸭出血症高免血清,建立检测鸭出血症病毒的葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验。试验表明,该方法简单、快速、特异、敏感,2 min内可判定结果,对病毒抗原的最低检出量为0.014 mg/mL,比血凝及血凝抑制试验敏感性高12倍。该方法能检出攻毒鸭,适用于临床诊断。     

SPA与鸭IgG的结合性研究

金黄色葡萄球菌细胞壁中的A蛋白(staphylo-coccal protein A,SPA)能与多种动物的γ-球蛋白发生非特异性结合反应,而且IgG的Fc片段与SPA结合后并不影响Fab片段的免疫活性,因此在酶联免疫吸附试验(ELISA)中,常用SPA与辣根过氧化酶(HRP)交联而成SPA-HRP结合物,用于抗原、抗体的定量测定及组织切片中抗原或抗体的定位、免疫复合物的检测等[1].     

SPA/SPG融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达

葡萄球菌A蛋白（SPA）和链球菌G蛋白（SPG）的IgG结合区编码基因融合后，克隆到大肠杆菌表达载体PGEX，SPA／SPG融合蛋白（SPAG）得到高效表达。可溶性SPAG～GST产物可被谷胱甘肽亲和柱一次性纯化。用琼扩和ELISA试验测定了表达产物与不同种属动物血清反应的性能。SPAG—GST与所有SPA、SPG各自反应的动物IgG结合，对小鼠IgG的反应优于SPA或SPG。在所测试的23种动物血清中，融合蛋白与大部分哺乳动物Ig反应。     

HRP—SPA在兽医临床诊断上的应用

葡萄球菌A蛋白(SPA)具有与人和多种哺乳动物血清中IgG分子Fc段高度亲和的特异性。可用同位素、荧光素、铁蛋白、过氧化物酶标记SPA,而不影响天然蛋白质的生物学特性。国外自1977年开始将辣根过氧化物酶(HRP)标记的SPA(简称HRP—SPA)用于间接免疫酶染色以来,引起了许多医学工作者的极大兴趣。他们把抗原抗体的免疫反应和酶的高效催化     

协同凝结试验快速检测轮状病毒抗原

某些金色葡萄球菌具有A蛋白(SPA),能与多种动物的IgG的Fc端结合而不影响Fab端与相应抗原结合的特异性。结合有SPA的IgG与相应抗原结合形成肉眼可见的凝结块,这种试验称为协同疑结试验。我们用该法检测动物及人的轮状病毒抗原,并与     

特异抗体标记金黄色葡萄球菌No.1800株在炭疽病诊断上的应用

自从Forsgren等发现金黄色葡萄球菌的细胞壁成分A蛋白(简称SPA)能和人及某些哺乳动物的IgG的Fc段发生非特异性结合以来,在国內外对SPA及其在免疫学和血清学方面的应用已进行了广泛的研究,但多限于医学方面,在兽医学领域尚少报道。家畜炭疽病的诊断一直应用细菌学检验、动物接种及沉淀反应等方法。这些方法     

金黄色葡萄球菌蛋白A的提取、纯化及鉴定

为了获得纯度高、活性好的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA),取改良营养肉汤培养基上生长18h的金黄色葡萄球菌培养物,采用溶菌酶裂解细胞壁释放蛋白质,用磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶解后转入透析袋透析,透析物用小鼠IgG-sephrose4FF亲和层析柱纯化,采用二喹啉甲酸(BCA)法测蛋白质浓度。结果表明:SPA浓度为0.933mg/mL;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果在42ku处有明显的电泳条带,蛋白免疫印迹(Western-blot)进一步证实小鼠IgG与SPA在42ku处发生较强的反应;以SPA为抗原,提纯的小鼠IgG为样品进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,结果小鼠IgG稀释到1∶25600时仍能与SPA结合,说明提取的SPA活性较高。     

葡萄球菌A蛋白协同凝集试验在检测病原性大肠杆菌热敏肠毒素中的应用

<正> 近年来,葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验在医学界应用于疫免学和血清学的研究越来越广泛。在国内人医和兽医当中,应用于检测细菌、病毒和寄生虫等方面已有不少报道,     

DOt—ELISA对水牛体内布氏杆菌特异蛋白A反应性抗体的检测

葡萄球菌蛋白A通过与不同类及不同亚类的抗体Fc受体相结合,而非特异地与哺乳动物γ-球蛋白起作用(Kronvall等1974)。尽管在反刍动物抗体的Fc分子和蛋白A之间显示了不同的联结亲和力(Outteridge1985),但业已证明,在生理状态的离子强度和pH条件下,SPA与反刍动物IgG_2的作用会达到一个显著的水平(Langone1982)。最近,Lanman等(1984)描述     

应用SPA—ELISA法检测猪血清弓形体抗体的报告

1979年 Madore 开始把葡萄球菌 A 蛋白用于酶联免疫吸附试验(SPA—ELISA),现已广泛应用于血清学诊断,由于 SPA 具有与人及多种哺乳动物血清 IgG 的 Fc 段非特异相结合的特性,在 ELISA 中代替第二抗体,但它与多种哺乳动物各种属的亲和力不同,其中与猪的 IgG 亲和力最强,我们应用 SPA-ELISA 检测猪血清弓形体抗体,并与间接血凝法(IHA)进行比较结果满意,现报道如下。     

SPA在免疫学上的研究

SPA(葡萄球菌A蛋白)是多数金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分，它能与正常人和多种哺乳动物IgG(免疫球蛋白G)呈非特异性(先天遗传比较初级的识别功能)结合出现沉淀“假免疫反应”。与之结合的IgG仍保持抗体。SPA生物学活性十分广泛，包括与IgG的FC(可结晶片段)结合，固定补体激活B(囊依赖淋巴)细胞，抑制K(荚膜抗原)细胞的ADCC(抗体依赖性细胞介异细胞毒)。     

应用“协同凝集试验”检验盐湿皮张炭疽病皮的实验报告

我所与遵义医学院微生物教研室合作,采用国内外比较先进的金黄色葡萄球菌A蛋白免疫技术的协同凝集试验法,检验炭疽病皮张。此方法具有特异性商、敏感性强、反应显现快、操作简便、不受器械、场地的限制、快速、易于推广等优点。经我所结合进口皮张和少量其他畜产品(山羊尾、马皮、马身毛)的检疫进行小批量试验,获得了满意的结果。国内开展金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)的研究始于1979年。几年来应用SPA的免疫学特性,根据抗原抗体的特异性,以高度免疫的相应抗血清进行协同凝集试验(CoA),已被广泛应用于细菌、病毒、螺旋体、立克次氏体等病原的鉴定和某些传染病的早期快速诊断,但在兽医方面报道甚少。近来我所闲CoA法检验盐湿皮张和一些畜产品的炭疽病皮,还是初步尝试。     

SPA诊断鸡传染性喉气管炎

葡萄球菌A蛋白(SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁所特有的一种成份,它能与多种哺乳动物IgG分子Fe段发生非特异性结合,而不影响该抗体与抗原的反应性。应用这一特性,我们对标准毒株,分离毒株分别作试验,其结果标准毒株、分离毒株均为阳性,对照组均为阴性。这种方法比常规的病毒学诊断方法具有快速、简易、敏感、特异、省料、成本低优点。一、材料与方法1.标准毒株来源:ILT/B A株由北京农业部兽医药物督察所提供。2.ILT抗血清:教研组制备。3.标准菌株来源:Cowon 1株,由长春兽大提供。4.分离毒株:U_1、S_1、S_2、S_3。5.SPA试剂制备:用Cowan 1株金黄色葡萄球菌,先于琼脂斜面和肉汤各传一代。     

赤芍水提物对金黄色葡萄球菌肠毒素及蛋白A表达的影响

探讨了赤芍水提物在体外对金黄色葡萄球菌肠毒素A、B及蛋白A分泌及mRNA转录的影响。试验中采用微量倍比稀释法测定赤芍对金黄色葡萄球菌ATCC29213的最小抑菌浓度(MIC);采用Western blot和实时荧光定量PCR检测亚抑菌浓度下赤芍水提物对金黄色葡萄球菌肠毒素A、B及蛋白A在mRNA转录和毒素蛋白分泌表达的影响。结果表明,赤芍水提物对金黄色葡萄球菌ATCC29213的MIC值为6.3mg/mL;在亚抑菌浓度下,赤芍水提物可以明显抑制肠毒素A、B及蛋白A在蛋白水平和转录水平的表达,且呈现明显的浓度依赖性。     

金黄色葡萄球菌A蛋白的原核表达及其功能研究

金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)是细胞壁抗原的成分,占整个细胞壁蛋白的6.7%,通过胞壁肽聚糖以共价键与之结合.该蛋白常被作为一种免疫学工具广泛应用,可用于单克隆抗体或多克隆抗体的纯化;检测和提纯IgM;与多种报告分子(荧光染料、酶标记、生物素、胶体金、放射性标记等)偶联后用于组织化学、Western、ELISA等的抗体检测;去除肿瘤患者和带瘤动物血清中的封闭抗体,从而降低血清对淋巴细胞介导的细胞毒的封闭作用.