鄂西红豆离体培养及植株再生研究

【目的】对外植体采用特殊处理方法,并对不同培养时期的基本培养基进行调整,以建立高效、快速、繁殖系数高的鄂西红豆再生技术体系。【方法】以成熟度为80%的鄂西红豆种子为外植体,通过向培养基中添加不同质量浓度和配比的植物生长调节物质,筛选适宜的芽诱导培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基,并对诱导生根培养的试管苗进行炼苗移栽,观察其成活率。【结果】最适芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+KT0.5mg/L+NAA 0.5mg/L+维生素B10.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L,诱导率达85%;最适芽继代增殖培养基为WPM+6-BA 1.5 mg/L+KT 0.3 mg/L+TDZ 0.02 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L;无根苗壮苗培养基为WPM+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+IAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L。当无根苗生长到4~5cm时形成完整植株并转接到生根培养基上诱导生根,最适生根培养基为1/2WPM+IBA 0.5mg/L+NAA 1.5mg/L+新型基因诱导生根剂0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L。【结论】建立的鄂西红豆再生技术体系可获得75%~85%的正常萌芽,生根率达85%以上,瓶苗移栽成活率达90%。     

哈路比葡萄柚茎段的组培快速繁殖

以成年态葡萄柚的茎段为材料,研究不同激素组合、基本培养基对丛生芽增殖的影响,以及再生苗生根、炼苗与移栽技术。结果表明:(1)WPM+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1)为初代培养的最佳培养基,腋芽诱导率达78.33%;(2)继代增殖的最适培养基为WPM+6-BA 0.75mg·L~(-1)+NAA0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1),增殖系数达4.93,芽长达2.62cm;(3)培养基1/2WPM+NAA 0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖40g·L-1+AC 0.1%的生根效果最好,生根率达63.33%,株高3.03cm,根粗壮;(4)生根苗移栽成活率达78%以上。     

山月桂‘奥运圣火’的组织培养与高效生根

生根困难一直是影响山月桂应用的主要问题,本研究以山月桂‘奥运圣火’带芽茎段为外植体,研究基本培养基、植物生长调节剂,以及珍珠岩对其腋芽萌发、组培苗的增殖、伸长和生根的影响。结果表明:最适合茎段腋芽萌发的培养基为WPM+1.0 mg/L 2-ip,萌发率可达72.5%;组培苗增殖的最佳培养基为WPM+1.0 mg/L 2-ip+0.05 mg/L NAA,增殖系数可达5.42,平均苗高达3.42 cm;最适合的生根培养基为:1/2 WPM+1.0 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+珍珠岩,生根率80.03%。将已经生根的组培苗炼苗后移栽到泥炭土和珍珠岩(1∶1,体积比)的混合基质中,成活率在60%左右。     

贵州酥李离体快繁技术研究

以酥李带芽茎段为外植体进行组织培养,研究了植物生长调节剂组合对腋芽诱导、增殖及生根的影响,初步建立酥李离体快繁技术体系。结果表明,外植体消毒采用1 g/LHgCl2浸泡8 min的效果较好,适宜腋芽诱导培养基为WPM+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA,适宜芽增殖培养基为WPM+1.0 mg/LKT+0.1 mg/L IBA+1.0 mg/L GA3,适宜生根培养基为1/2MS+0.4 mg/L IBA+15 g/L蔗糖,其生根率达95%,移栽成活率在90%以上。     

葡萄柚的组织培养与植株再生技术

以葡萄柚无菌实生苗的上胚轴、下胚轴和叶片为外植体,研究其组织培养和植株再生技术。结果表明,葡萄柚上胚轴分化不定芽的能力最强;诱导不定芽的最佳培养基为WPM+TDZ 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+Ag NO32 mg/L+蔗糖40 g/L,培养40 d后不定芽分化率为78.33%,不定芽数为3.66个;最适生根培养基为l/2 WPM+NAA1.5 mg/L+AC 0.1%+蔗糖40 g/L,生根率达73.33%,生根数为1.91条/株;生根苗移栽30 d后成活率达70%以上。     

宽叶武竹的组培快繁技术研究

以宽叶武竹新发嫩枝上茎尖、茎段为材料,研究了不同的激素配比对其芽诱导、增殖和生根的影响。结果表明:芽诱导适宜培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+KT 0.1mg/L,芽增殖适宜培养基为MS+6-BA0.3mg/L+KT 0.1mg/L,生根适宜培养基为1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L。在生根培养中采用5mm长的茎尖进行生根培养,生根率最高可达91.0%,生根苗的炼苗成活率达90.0%以上。     

96-Ⅱ喜树叶片高频率植株再生体系建立

用96-Ⅱ喜树无菌苗叶片为外植体,筛选出了96-Ⅱ喜树最佳愈伤组织诱导培养基为WPM+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+2,4-D0.1 mg/L,愈伤组织诱导率95％以上;愈伤组织分化培养基为WPM+6-BA0.5 mg/L,分化率达90％;最佳生根培养基为WPM+IBA0.8 mg/L,生根率为94％以上,平均根数为4～8条;移栽成活率达到95％以上.     

夏蜡梅腋芽微繁殖及叶片不定芽再生

夏蜡梅(Sinocalycanthus chinensis)是中国特有的一种落叶观赏花木,为国家二级保护珍稀濒危植物.以夏蜡梅当年生枝条的茎段为供试材料,进行腋芽微繁殖和叶片不定芽再生的研究.结果表明:茎段在附加2.00mg/L ZT和0.05 ms/L IBA的WPM培养基上快繁,萌发迅速、芽体粗壮、叶色淡绿,月繁殖系数超过10.0,可以连续继代10次以上;以无菌苗的叶片为外植体在附加2.0 me/L TDZ、0.1 me/L IBA和1.0 me/L KT的WPM培养基上,不定芽再生频率达40%.在3/5MS大量元素+WPM微量元素+WPM有机成分+0.20 mg/L IBA+0.05%活性炭的生根培养基上,试管苗的根系和地上部发育良好,盆钵移栽成活率达100%.该体系的建立为夏蜡梅工厂化育苗以及运用生物技术手段对夏蜡梅进行改良奠定了基础. ms/L IBA的WPM培养基上快繁,萌发迅速、芽体粗壮、叶色淡绿,月繁殖系数超过10.0,可以连续继代10次以上;以无菌苗的叶片为外植体在附加2.0 me/L TDZ、0.1 me/L IBA和1.0 me/L KT的WPM培养基上,不定芽再生频率达40%.在3/ MS大量元素+WPM微量元素+WPM有机成分+0.20 mg/L IBA+0.05%活性炭的生根培养基上,试管苗的根系和地上部发育良好,盆钵移栽成活率达100%.该体系的建立为     

紫花山柰的组培快繁研究

以紫花山柰无菌苗的芽基部为外植体,对芽基部进行继代增殖、丛生芽诱导以及生根培养基的筛选,建立了紫花山柰无菌苗芽基部的组培快繁体系。结果表明:紫花山柰无菌苗芽基部继代增殖比较合适的培养基为MS+6-BA 8~12 mg/L+NAA 0~0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;丛生芽诱导较合适的培养基为MS+6-BA 3~5 mg/L+NAA 0.05~0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳的丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;生根较佳的培养基为MS+NAA0.1 mg/L+香蕉泥10~15%+活性炭0.5~1.0 g/L+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉9.5 g/L。     

紫花山奈的组培快繁研究

以紫花山柰无菌苗的芽基部为外植体,对芽基部进行继代增殖、丛生芽诱导以及生根培养基的筛选,建立了紫花山柰无菌苗芽基部的组培快繁体系。结果表明:紫花山柰无菌苗芽基部继代增殖比较合适的培养基为MS+6-BA 8~12 mg/L+NAA 0~0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;丛生芽诱导较合适的培养基为MS+6-BA 3~5 mg/L+NAA 0.05~0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳的丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;生根较佳的培养基为MS+NAA0.1 mg/L+香蕉泥10~15%+活性炭0.5~1.0 g/L+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉9.5 g/L。     

绵毛银桦的组织培养与快速繁殖

以枝芽为外植体从诱导培养增殖培养、生根培养和再生植株移栽等方面,对绵毛银桦组织培养快繁 育苗技术进行试验结果表明使用两种浓度0.025%和0.1%升汞液进行二次消毒的处理方法可将外植体污染率控 制在28.1%以下适宜绵毛银桦不定芽诱导和增殖的培养基组分为WPM+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L 适宜的继代培养周期为20 d持续增殖培养的平均增殖倍数为1.65适宜诱导生根的培养基组分为1/2WPM+IBA 0.6 mg/L+蔗糖15 g/L生根率达91.7%移植的再生植株90%以上存活。     

不同基因型高山杜鹃茎段离体培养及工厂化繁育体系优化

为了优化高山杜鹃茎段离体组织培养体系及其工厂化繁育体系,对10份不同基因型高山杜鹃离体培养与植株再生差异进行了研究。结果表明,供试高山杜鹃茎段外植体在WPM培养基上均能诱导出芽、增殖和生根。在诱导萌发阶段,添加0.5～1.0 mg/L的ZT萌发效果较好,其中有7份材料在0.5 mg/L ZT时获得最佳萌发诱导。在增殖阶段,最佳增殖激素配比为ZT 0.5～0.7 mg/L+NAA 1.0 mg/L,其中6份材料在ZT 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L激素配比下增殖达6～9倍。生根阶段,培养基最佳激素配比则为NAA 0.25mg/L+IBA 0.25 mg/L。并且试管外生根效果好于试管内生根,平均成活率为80.95%,而试管内平均成活率仅为57.94%。在最佳激素配比下供试所有高山杜鹃采用试管外生根成活率均在98%以上,并且试管外生根成本低,操作简便快速,适用于工厂化生产。     

蓝莓芽诱导与再生研究

采用改良WPM为基本培养基,研究蓝莓的组培育苗技术。结果表明：以当年生绿枝茎段为外植体可有效获得无菌苗;蓝莓茎段的离体增殖率受到培养基中细胞分裂素的调控,ZT 1-2mg／Li和2ip 10～20mg／L的效果较好,初代培养增殖率3-6倍。继代培养时茎段和叶片也可分别再生无菌苗6-8周继代1次,增殖率可达10倍以上。蓝莓试管苗瓶内生根率不高,0．02～0．2mg／L IBA可诱导蓝莓生根,正常生根率30％～50％。     

紫叶加拿大紫荆组织培养研究

研究了外植体采集时间,不同质量浓度的6-BA、NAA、蔗糖以及不同部位茎段对紫叶加拿大紫荆增殖生长的影响,并初步研究了基本培养基I、BA、NAA对生根的影响。结果表明,紫叶加拿大紫荆外植体最佳的采集时期为5月;其增殖培养基为WPM+6-BA 1.5～2.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L,增殖系数最高达3.3;带愈伤组织的下部茎段的增殖效果好于不带愈伤组织上部茎段,上部茎段在高质量浓度的6-BA中增殖效果好;基本培养基、IBA质量浓度、NAA质量浓度对生根率有影响,最佳的配比是MS+IBA 5 mg/L+NAA 0.5 mg/L。     

芦荟试管苗增殖及壮苗定植体系的建立

对库拉索芦荟试管苗增殖技术体系改良及壮苗定植体系的建立进行了研究。结果表明,MB+KT1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L培养基中,用食糖代替蔗糖、自来水代替蒸馏水,库拉索试管苗芽增殖率有所下降,但与对照相比差异不显著;附加1.0mg/LNAA的1/2MB培养基是库拉索芦荟试管苗壮苗生根的最佳培养基;供试的3种移植介质中,库拉索芦荟试管苗的定植成活率均达到83%以上,沙土介质定植成活率最高,达到91.3%。     

中国樱桃泰小红樱的组培快繁研究

以中国樱桃＇泰小红樱＇的茎段为外植体,研究WPM和MS不同培养基以及6-BA和NAA不同激素浓度组合对外植体增殖的影响,建立其组织培养的快繁体系。结果表明：（1）泰小红樱茎段最佳的初代培养基为MS＋1.0 mg/L6-BA＋0.1 mg/L NAA,诱导分化率高,腋芽新梢生长健壮;（2）最佳继代培养基为WPM＋1.0 mg/L6-BA＋0.1 mg/L NAA,丛芽增殖与腋芽增殖并存,增殖倍数显著提高,高达8.0倍,且芽苗健壮,叶色浓绿;（3）最佳生根培养基为1/2MS＋0.5 mg/L IBA＋20 g/L蔗糖＋5 g/L琼脂,生根率高,根系长且数量多。     

河阴石榴茎尖脱毒快繁技术研究

以河阴石榴茎尖为材料,对其组织培养快繁体系进行了研究。结果表明,河阴石榴茎尖的最适增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.30mg/L NAA,其增殖系数达4.20。最适宜生根培养基为1/2MS+0.50mg/L NAA,其生根率可达90.0%,移栽成活率达95.0%。     

鳄梨组织培养繁殖体系优化研究

为满足市场需求,以鳄梨饱满茎段为外植体采用组织培养方法进行优质种苗繁育,对于该种的产业发展和应有具有重要意义。试验筛选了无菌株体系建立、诱导潜伏芽萌发、丛生芽继代增殖和生根培养较适培养基配方。结果表明：诱导鳄梨无菌株系建立较适培养基为WPM＋1.0 mg?L－16￣BA＋0.3 mg?L－1NAA＋0.5 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂;诱导潜伏芽萌发较适培养基为WPM＋2.0mg?L－16￣BA＋0.5mg?L－1NAA＋1.0 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,诱导出芽率达到54％;丛生芽继代增殖培养较适培养基为WPM＋3.0 mg?L－16￣BA＋0.3 mg?L－1NAA＋1.0 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,增殖率达到3.70;幼苗生根较适培养基为1/2WPM＋0.5 mg?L－1 IBA＋0.5 mg?L－1 NAA＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,生根率达到90％。炼苗移栽60 d后成活率为96％。该试验获得的培养基配方,可培养出完整植株,短期内获得大量优质种苗。     

薰衣草离体培养技术研究

以薰衣草(Lavandula angustifolia)带芽茎段或顶芽为外植体,探讨不同激素种类与水平等对其愈伤诱导、不定芽增殖与不定根形成的影响,并筛选了薰衣草试管苗过渡移栽的适宜基质。结果表明薰衣草离体培养适宜的培养基分别为,不定芽启动培养基,MS+BA 1.0～2.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;继代增殖培养基,MS+BA 1.0～2.0 mg/L+IBA 0.25 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;生根培养基,White+IBA0.4 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L或White+NAA 0.8 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。以等体积的泥炭与珍珠岩混合后作为基质驯苗,幼苗成活率可达96.9%。     

牛大力茎段组织培养技术研究

[目的]为牛大力的规模化生产提供依据,保护牛大力野生资源。[方法]以牛大力的幼嫩茎段作为外植体,研究其组织培养和离体快繁技术。[结果]用0.1%升汞处理外植体20 min,可获得无菌材料。以MS+6-BA1.0 mg/L+IBA0.1 mg/L为启动培养基,诱导率可达100%,接种后20 d,腋芽开始萌发,且生长正常。以MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.1 mg/L为增殖培养基,培养30 d后,增殖系数达7.0,有少量的愈伤组织产生,但不定芽生长发育正常。用1/2MS+IBA0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L培养基进行生根培养,生根效果最好,生根率达80%,根生长状态良好。将生根的小苗移栽到椰糠∶砂为3∶1的基质中,覆盖地膜保湿15 d,成活率达85%以上。[结论]牛大力茎段组织培养的最佳生根培养基为:1/2 MS+IBA0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L。