安徽部分地区鸡球虫种类及感染情况调查

为了解安徽省部分地区鸡球虫种类及感染情况,采用群体采样法分别从肥西县、长丰县和凤台县采集鸡新鲜粪样,用饱和盐水漂浮法检查。阳性粪样采用饱和盐水漂浮和离心沉淀法进行卵囊分离。显微镜下观察卵囊进行虫种鉴定,并统计各调查点的鸡球虫感染率和感染强度等。结果表明,鸡球虫感染率为93.3%(84/90);共检获7种球虫,即:柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、布氏艾美耳球虫(E.brunetti)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)、早熟艾美耳球虫(E.prae-cox)。     

乌鲁木齐地区鸡球虫种类调查

本文调查是采用饱和盐溶液浮集球虫卵囊的方法,检查了420只鸡粪样品。对未发育的卵囊和混合于2.5％重酪酸钾溶液中在25℃恒温箱中培养形成孢子的卵囊进行了形态学的观察和量度。发现乌鲁木齐地区有7种艾美耳球虫,它们是柔嫩艾美耳球虫(E.tenella),巨型艾美耳球虫(E.maxima),和缓艾美耳球虫(E.mitis),哈氏艾美耳球虫(E.haani),毒害艾美耳球虫(E.necatrix),基前艾美耳球虫(E.praecox)及堆型艾美耳球虫(E.acervulina)。除了堆型艾美耳球虫由于鸡的感染带虫率低,发现的卵囊较少,只作了一般观察外,其他六种都进行了较详细地观察,并分别描述了各种卵囊的形态。     

武汉地区鸡球虫种类的初步鉴定

从武汉郊区多个鸡场采回粪便 ,对艾维茵肉鸡进行感染 ,通过卵囊的实验室鉴定和鸡的病理剖检 ,初步鉴定出武汉地区鸡球虫有 :柔嫩艾美耳球虫 (Eimeriatenella)、毒害艾美耳球虫 (E necatrix)、堆形艾美耳球虫 (E acervulina)、巨型艾美耳球虫 (E maxima)、布氏艾美耳球虫 (E brunetti)、和缓艾美耳球虫 (E mitis)等 6种 ,主要致病虫株为柔嫩艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫     

杀球灵抗鸡球虫的药效研究

采有笼饲试验和围栏试验,研究了一种新的抗球虫药——杀球灵抗鸡球虫的药效。笼饲试验表明:杀球灵抗柔嫩艾美耳球虫的指数为195.6,属于高效抗球虫药.围栏试验表明:杀球灵以1ppm剂量添加于饲料,可有效地控制鸡的3种主要球虫——柔嫩、堆型和巨型艾美耳球虫的混合感染,可阻止死亡、抑制盲肠病变产生和卵囊形成,并能维持正常的增重和饲料转化率。     

新疆北疆部分地区鸡球虫病病原调查及分类鉴定

[目的]调查新疆北疆部分地区鸡球虫病病原分布情况,明确近年来新疆北疆地区鸡球虫病的致病种类情况.[方法]采用定点采样法,从沙湾、石河子、玛纳斯和昌吉等地采集病死禽的肠道直接进行粪便处理和病原学检查,收集新鲜粪样进行鸡球虫卵卵囊分离,进行孢子化卵囊培养和形态学观察,对鸡球虫进行虫种鉴定.[结果]鸡球虫的感染率为100;,共检出6种艾美耳球虫,分别为柔嫩艾美耳球虫(Etenella)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)、哈氏艾美耳球虫(E.hagani)、布氏艾美耳球虫(E.Brunetti).其中柔嫩艾美尔球虫、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫为新疆北疆地区鸡球虫病病原的优势虫种.[结论]研究对新疆部分北疆地区的鸡球虫原分布及其构成进行了初步确定,了解其病原水平,从而为该病防治中抗球虫药物的选择及代化用药方案提供必要数据,今后北疆地区预防和控制该病提供依据.     

鸡球虫混合苗的实验室免疫研究

采用柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫的弱毒虫株，按不同的配比制成混合苗，免疫７日龄雏鸡，分别于免疫后第２，４，６，８周用强毒卵囊攻击。与对照组相比，免疫鸡肠道病变轻微，增重明显，肠道内容物卵囊密度显著降低，取得了较好的免疫效果。     

鸡柔嫩艾美耳球虫西宁株的分离与鉴定

[目的]鉴定鸡柔嫩艾美耳球虫西宁株。[方法]采用单卵囊分离技术从西宁当地鸡粪便中获得1株纯种球虫,经鸡体传代增殖,对该虫体的寄生部位、潜伏期、孢子化时间、形态结构等指标进行观察和测定。[结果]该虫株寄生于鸡的盲肠,卵形指数为1．22,最短孢子化时间为18h,潜伏期为114h。卵囊为卵圆形,卵囊壁光滑,呈黄绿色,孢子化卵囊未见卵膜孔和卵囊残体;孢子化卵囊平均为20．08μm×16．55μm。孢子囊纺锤形,有一斯氏体,其平均大小为8．65μm×4．90μm。综合鉴定该球虫为柔嫩艾美耳球虫,并暂命名为柔嫩史美耳球虫西宁株。[结论]该研究为进一步研究球虫的致病性和药物效应奠定了基础。     

鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术的构建及致病性研究

构建了一种新的鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术 ,并对杨陵柔嫩艾美耳球虫地理株进行了分离 ,对继代增殖的纯种卵囊进行了致病性试验。结果表明 ,该单卵囊分离技术简单易行 ,单卵囊感染成功率可达4 0 % ;该虫株对雏鸡有很强的致病性 ,经口接种 1× 10 5个孢子化卵囊 ,致死率高达 80 %。     

一例土鸡球虫病的诊治

正鸡球虫病是养鸡生产中常见且危害较大的主要寄生虫性疾病之一,引起鸡球虫病的病原体较多,包括柔嫩艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、巨型艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、缓艾美尔球虫、哈氏艾美耳球虫、早熟艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、变位艾美耳球虫等[1.2]。鸡球虫多数寄生于鸡的肠道上皮细胞,鸡球虫卵有卵囊,对外界环境和消毒剂具有很强的抵抗力,所有日龄和品种的鸡对球虫都有易感性,以15~50日龄的鸡最易感,临床上以机体消瘦、贫血、下痢和便血为主要表现     

柔嫩艾美耳球虫SO7基因重组乳酸菌的构建及保护性效果

为了检测转鸡柔嫩艾美耳球虫保护性抗原SO7基因及白细胞介素2(IL-2)的功能乳酸菌对试验感染球虫攻击的保护性,用重组乳酸菌饲喂1日龄雏鸡,连喂7 d后,以5×10~4个/只剂量接种球虫卵囊,通过观察雏鸡的组织病理学变化来评价转球虫基因工程乳酸菌的效果。结果显示:饲喂乳酸菌组雏鸡受球虫攻击的组织病理学变化最轻微。从而证明含保护性抗原SO7基因和IL-2片段的功能乳酸菌对试验感染球虫攻击具有一定的保护性。     

海口市文昌鸡球虫病流行调查

为了解海南省海口市文昌鸡球虫病的流行情况,采用群体采样法分别从该市文昌鸡主要养殖地区采集新鲜鸡粪,检查粪样。对阳性粪样采用饱和盐水漂浮和离心沉淀法进行卵囊分离,以质量分数为2.5%的重铬酸钾培养保存。显微镜下观察卵囊,进行虫种鉴定,并统计各调查点的鸡球虫种类、感染率和感染强度。检查雏鸡(15~42日龄)、中鸡(43~84日龄)和大鸡(85~130日龄)粪样各120份。结果显示,鸡球虫的感染率分别为75.8%、78.3%和26.7%。共检出7种球虫,均属艾美耳属,分别为毒害艾美耳球虫(Eimeria neca-trix)、堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)、巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)、柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)、和缓艾美耳球虫(Eimeria mitis)、哈氏艾美耳球虫(Eimeria hagani)和早熟艾美耳球虫(Eimeriapraecox)。结果表明,鸡球虫在海口市文昌鸡主要养殖地区普遍存在,有的调查点感染强度很高,养殖户的科学防治意识不强。     

杭州地区鸡球虫种类研究

对杭州地区的杭州市区、桐庐及建德等地的大型鸡场及个体养鸡场球虫感染情况进行了调查，通过对球虫卵囊的分离、培养，孢子生殖阶段虫体的形态观察，卵囊、孢子囊大小及卵囊孢子化时间的测定，初步将卵囊分为A型、B型、C型三种类型。分别用这三种卵囊接种雏鸡纯繁后，收集的卵囊人工感染15日龄的小鸡，观察并记录接种后的发病时间，症状及病理变化等，参照有关文献，鉴定球虫种类。经分析判定，杭州地区主要存在3个种，它们分别是柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella)，毒害艾美耳球虫（E.necatrix)和巨型艾美耳球虫（E.maxima)。     

鸡白细胞介素-18在鸡球虫病疫苗免疫中的作用

为了探索鸡白细胞介素-18(IL-18)在鸡球虫病疫苗免疫中的免疫佐剂作用,用鸡IL-18的重组真核表达质粒pIL-l8、柔嫩艾美耳球虫早熟株疫苗及两者联合分别接种3日龄鸡,首免后第1 d、4 d、6 d、9 d、14 d、21 d、26 d、28 d时随机抽取鸡外周血及无菌采取鸡脾脏,应用ELISA和甲基噻唑基四唑(MTT)法分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平.二免后第14 d用柔嫩艾美耳球虫进行攻击.结果表明,pIL-18与鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株疫苗联合免疫具有明显提高虫苗免疫保护的作用,pIL-18单独注射鸡体也具有明显增强鸡体抗球虫感染的作用.表明鸡IL-18能够明显增强鸡球虫病疫苗的免疫原性,显著提高免疫鸡的体液免疫和细胞免疫水平,并且能强有力地抵抗柔嫩艾美耳球虫的攻击.     

鸡堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的免疫学筛选

[目的]寻找鸡球虫保护性抗原基因,为研究基因功能和研制抗鸡球虫疫苗奠定基础.[方法]将纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊于兔皮内多点注射,制备堆型艾美耳球虫抗血清,用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其效价,进行免疫学筛选.利用PCR对获得的阳性克隆进行初步鉴定.[结果]间接酶联免疫吸附试验结果表明堆型艾美耳球虫抗血清检测结果呈阳性,初步筛选到的疑似阳性斑经3次复筛后获得6个阳性克隆,1～3号克隆约为1 000bp,4～6号克隆约为1 500 bp.[结论]对堆型艾美耳球虫孢子化卵囊cD-NA文库获得的阳性克隆成功进行了免疫学筛选.     

鸡球虫的分离与感染试验

[目的]为探讨长期有效的鸡球虫病防控方法奠定基础.[方法]分离并培养鸡球虫卵囊,通过感染雏鸡试验研究其卵囊发育和感染的过程.[结果]分离到的球虫卵囊大多形态饱满,为宽椭圆形,少数为卵圆形,壁光滑,中间明显可见1个圆形核,原生质呈淡褐色,卵囊大小约为18.5～25.5 μm× 16.7～22.5 μm.正常的孢子化卵囊多能见到分化明显的4个孢子,18 h可看到部分卵囊孢子化,36h孢子化达80％.接种后发病雏鸡的体重缓慢增加,血便明显,死亡率较高,同时解剖可见盲肠病变明显,肠壁增厚,严重者因充满大量血液而盲肠肿大.[结论]根据卵囊的形态、发病鸡的临床表现、卵囊寄生部位和盲肠病理变化等特征,初步判断分离的球虫主要为柔嫩艾美耳球虫.     

艾美耳球虫弱毒虫株的返祖性

将柔嫩艾美耳球虫鸡胚及药物适应株（Ｐ２５、Ｐ３０）和巨型艾美耳球虫早熟选育株（Ｐ２２、Ｐ２８），分别连续回鸡６代，测定试验鸡的肠道病变及肠道内容物的卵囊密度。结果显示，试验鸡的肠道平均病变程度（１．０以下）明显低于对照组，而肠道内容物的卵囊密度则基本相似，表明弱毒虫株无返祖现象。     

鸡球虫种类和感染状况探讨

采集凤台县 4个村 5个鸡场的 12 9个粪样 ,调查鸡球虫种类和感染情况 ,并对其中某一养殖户进行了追踪调查。采用饱和盐水漂浮 ,重铬酸钾培养 ,饱和蔗糖溶液漂浮等方法进行检查 ,共检出 8种艾美耳球虫 ,即 :毒害艾美耳球虫 (Eimeria .necatcix) ,早熟艾美耳球虫 (E .praecox) ,巨型艾美耳球虫 (E .maxima) ,和缓艾美耳球虫 (E .mitis) ,柔嫩艾美耳球虫 (E .tenella) ,堆型艾美耳球虫 (E .acewulina) ,布氏艾美耳球虫 (E .brunetti) ,变位艾美耳球虫 (E .acervulina) ,其优势虫种主要为毒害艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫。调查结果显示 ,每个鸡场的感染率均为 10 0 % ,且多为混合感染 ;土杂鸡的感染强度大于AA肉鸡。     

鸡柔嫩艾美耳球虫计划感染免疫的研究

作者以鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的己孢子化卵囊有计划地感染21日龄来克亨雏鸡:有三组分别以5×10~2、5×10~3、5×10~4个卵囊经口感染,另一组每只以5×10~2、5×10~3、5×10~4个卵囊每隔十天依次感染,观察其免疫效果。结果表现了初次投服的卵囊数量越多,耐过的雏鸡所获得的免疫力就越大些,但初次以较大剂量卵囊投服,对机体有不良影响,甚至可造成死亡。而通过依次增加卵囊的数量反复轻微感染的雏鸡,对机体的正常生理状态几乎无不良影响,并且获得的免疫力也较牢固。     

鸡柔嫩艾美耳球虫绵阳地方株的分离鉴定及致病性研究

运用单卵囊分离提取技术,从绵阳某鸡场艾美虫感染粪便中获得1株纯种艾美虫卵囊,该艾美虫主要寄生在鸡盲肠,卵囊绝大多数呈宽卵圆形,无卵膜孔,有1个圆形极粒位于窄端,无内外残体,孢子囊有斯氏体,最短孢子化时间为19 h .通过随机测定200个卵囊后发现,卵囊的大小为(18.4～25.5) μm×(14.6～20.2) μm,平均大小为(21.62±2.08) μm×(18.15±1.83) μm;随机测定200个孢子囊后发现,孢子囊大小为(10.5～12.6) μm×(5.1～6.8) μm,平均大小为(11.77±0.87) μm×(6.29±0.69) μm.雏鸡在感染后5 d开始拉血便,6 d后症状加剧,鸡出现死亡.对照国内外相关文献,初步确定分离出来的艾美虫为鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella).对分离虫株卵囊致病性的研究结果表明,鸡一旦感染,其体重会受到影响,严重感染则会造成大量死亡.随着卵囊感染量增多,雏鸡死亡率也随之增高,当雏鸡感染量为8.0万个卵囊时致死率高达100%,表明所分离的柔嫩艾美耳球虫绵阳株致病力很强.     

鸡柔嫩艾美耳球虫三价DNA疫苗的构建及鉴定

[目的]构建含鸡柔嫩艾美耳球虫3-1E和CDPK抗原基因及鸡IFN-γ基因的三价DNA疫苗。[方法]应用SOE-PCR将3-1E、CD-PK和鸡IFN-γ共3个基因通过2个（GGGGS）3连接子相连,扩增出IFN-γ/3-1E/CDPK三价融合基因,将其克隆入真核表达载体proVAX中构建三价融合真核表达质粒proIEC,后用双酶切和PCR进行鉴定。阳性重组质粒提取纯化后体外转染PK-15细胞,通过间接免疫荧光技术检测目的基因在转染细胞中的表达情况。[结果]经双酶切和PCR鉴定证实鸡柔嫩艾美耳球虫三价DNA疫苗构建成功,且在PK-15细胞中获得了成功表达。[结论]鸡柔嫩艾美耳球虫IFN-γ/3-1E/CDPK三价DNA疫苗构建成功,为进一步探讨其免疫保护性奠定了基础。