不同剂量猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导仔猪细胞免疫的研究

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5)分别以200 ug,100 ug和50 ug 3种剂量肌肉注射免疫21日龄仔猪,同时设空载体对照和生理盐水空白对照.于免疫后7 d、15d、30d、45d、60d和70d采用流式细胞仪(FACS)和淋巴细胞增殖试验(MTT法)分别对免疫猪外周血中CIM+、CD8+T淋巴细胞数和淋巴细胞的转化功能进行检测.结果表明3个不同剂量的pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5基因疫苗免疫仔猪后均能诱导产生良好的细胞免疫应答,实验组与对照组比较差异极显著(p<0.01)或显著(p<0.05).大剂量基因疫苗免疫仔猪的外周血T淋巴细胞的增殖能力及CD4+、CD8+百分含量高于中剂量和小剂量基因疫苗免疫的仔猪,表现出一定的量效关系.     

猪IL-2真核表达质粒构建及对PRRSV-ORF5基因疫苗免疫佐剂作用的研究

本研究应用真核表达载体pcDNA3.1（＋）和猪白细胞介素2（IL-2）基因成功构建了IL-2的真核表达质粒（pcDNA-IL-2）,探讨了pcDNA-IL-2作为分子免疫佐剂对猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）ORF5基因疫苗（pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5）免疫猪的增强作用。经间接ELISA法、MTT比色法及流式细胞仪分别对pcDNA-IL-2与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5共同免疫猪、pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5单独免疫猪、pcDNA3.1（＋）空载体和灭菌水免疫对照猪的血清抗PRRSV抗体IgG、外周血T淋巴细胞的增殖活性、CD4^＋和CD8^＋细胞比例进行检测,结果表明pcDNA-IL-2与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5共同免疫猪的IgG含量、外周血T淋巴细胞的增殖活性、CD4^＋和CD8^＋细胞比例与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5单独免疫猪相比有显著差异（P〈0.05）。说明pcDNA-IL-2能显著增强pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5基因疫苗免疫猪的体液和细胞免疫应答,可作为PRRSV基因疫苗的良好佐剂。     

绵阳市奶牛内寄生虫的调查与分析

据笔者调查,目前影响本市奶牛业健康持续发展的重要疾病主要有奶牛寄生虫病和乳房炎等。奶牛感染寄生虫不仅降低饲料报酬,还因虫体机械性损伤,分泌毒素干扰组织器官的功能使奶牛长期处于病理状态,导致产奶量下降,影响乳品质。此外,奶牛感染寄生虫常导致奶牛呈渐进性贫血和消瘦,     

绵阳地区猪繁殖与呼吸综合征流行毒株ORF5基因的克隆及遗传变异分析

采用RT-PCR方法对四川绵阳地区采集的疑似猪繁殖与呼吸综合征感染病料进行克隆,并对ORF5基因进行测序及遗传进化分析。Nsp2基因扩增结果表明,获得的15个猪繁殖与呼吸综合征阳性毒株均为Nsp2基因存在缺失的变异株。ORF5基因测序结果表明,15株ORF5基因均由603 bp编码、200个氨基酸组成,各毒株之间的氨基酸同源性为87.6%~100.0%,与GenBank中13株参考毒株的序列同源性在57.2%~99.0%之间,与HUN4、JXA1、TJM、GXHZ12等HP-PRRSV代表株ORF5的相似性高达90%~99%。推导氨基酸分析结果表明,各毒株的ORF5氨基酸序列因各场的不同而差异显著,存在一些突变位点,同时同一场内的不同毒株间的差异也较大,多数毒株在信号肽、跨膜功能区都存在突变位点,各毒株的潜在糖基化位点也存在差异;遗传进化树分析结果表明,15株ORF5序列均属于北美株,大部分毒株序列与2006年暴发的JXA1高度同源。总体上,各毒株之间没有呈现明显的地域性。     

复合酸化剂和玉屏风散提取物对白羽肉鸡生长性能、免疫功能及抗氧化能力的影响

试验旨在研究玉屏风散提取物、复合酸化剂对白羽肉鸡生长性能、免疫及抗氧化能力的影响。选用体重一致的1日龄白羽肉鸡300只，随机分为5组，每个组5个重复，每个重复12只。5个处理组分别饲喂基础日粮（对照组）、基础日粮+250 mg/kg金霉素+60 mg/kg恩拉霉素（抗生素组）、基础日粮+600 mg/kg玉屏风散提取物（玉屏风组）、基础日粮+2 000 mg/kg复合酸化剂（酸化剂组）、基础日粮+600 mg/kg玉屏风散提取物+2 000 mg/kg复合酸化剂（联合组）。试验期42 d。结果显示：1～21 d，各处理组的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、耗料增重比（F/G）及死淘率无显著差异；联合组22～42 d和1～42 d的ADFI均优于对照组（P<0.05）;22～42 d，联合组ADG高于对照组（P<0.05）;1～42 d，与对照组比，联合组ADG和死淘率有差异性趋势（P=0.10）；联合组脾脏指数和胸腺指数均高于对照组（P<0.05）；玉屏风组、酸化剂组和联合组天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）含量低于对照组（P&l...     

4种清热解毒复方中草药体外抑菌及抗PRRSV活性研究

【目的】 探索泻心汤、三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散4种清热解毒复方中草药体外抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的效果, 为临床应用提供参考。【方法】 采用传统水煎法对4种复方中草药进行提取, 通过二倍稀释法测定中药对大肠杆菌标准菌ATCC 259222和金黄色葡萄球菌标准菌ATCC 25923的体外抑菌活性; 在测定复方中草药对Marc-145细胞最大安全浓度的基础上, 通过实时荧光定量PCR鉴定复方中草药对PRRSV的抑制作用。【结果】 泻心汤对大肠杆菌的体外抑菌活性最好, 其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC)均为7.81 mg/mL; 三黄虎杖汤和黄连解毒汤次之, 其MIC和MBC为31.25~125 mg/mL; 清瘟败毒散抑制大肠杆菌效果较差: MIC和MBC均>250 mg/mL, 而金黄色葡萄球菌对泻心汤、黄连解毒汤和三黄虎杖汤非常敏感, 其MIC和MBC为0.24~0.98 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中, 泻心汤、三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散对Marc-145细胞最大安全浓度分别为0.49、0.49、3.90和1.95 mg/mL。4种复方中草药对PRRSV的抑制与直接灭活作用较好, 黄连解毒汤和清瘟败毒散均在0.98 mg/mL时对PRRSV有阻断作用, 泻心汤和三黄虎杖汤在0.24和0.12 mg/mL时对PRRSV有阻断效果。【结论】 4种复方中草药中泻心汤的体外抑菌及抗PRRSV的效果最好, 其次是三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散, 4种清热解毒复方均有一定的抑菌和抗病毒活性, 可以为临床应用提供参考依据。     

鸡柔嫩艾美耳球虫绵阳地方株的分离鉴定及致病性研究

运用单卵囊分离提取技术,从绵阳某鸡场艾美虫感染粪便中获得1株纯种艾美虫卵囊,该艾美虫主要寄生在鸡盲肠,卵囊绝大多数呈宽卵圆形,无卵膜孔,有1个圆形极粒位于窄端,无内外残体,孢子囊有斯氏体,最短孢子化时间为19 h .通过随机测定200个卵囊后发现,卵囊的大小为(18.4～25.5) μm×(14.6～20.2) μm,平均大小为(21.62±2.08) μm×(18.15±1.83) μm;随机测定200个孢子囊后发现,孢子囊大小为(10.5～12.6) μm×(5.1～6.8) μm,平均大小为(11.77±0.87) μm×(6.29±0.69) μm.雏鸡在感染后5 d开始拉血便,6 d后症状加剧,鸡出现死亡.对照国内外相关文献,初步确定分离出来的艾美虫为鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella).对分离虫株卵囊致病性的研究结果表明,鸡一旦感染,其体重会受到影响,严重感染则会造成大量死亡.随着卵囊感染量增多,雏鸡死亡率也随之增高,当雏鸡感染量为8.0万个卵囊时致死率高达100%,表明所分离的柔嫩艾美耳球虫绵阳株致病力很强.     

仔猪水肿病的诊断与综合防制

猪水肿病是由一种定植于小肠的致病性溶血性大肠杆菌产生的毒素引起猪的急性、高度致死性、传染性肠毒血症。其特征为胃壁和颈部、齿眼、眼睑、肠系膜等部位发生水肿,发病率不高,但病死率很高,主要发生于断奶前后体况健壮、生长快的仔猪,已成为养猪业危害较严重的疾病之一,必须采取综合防制措施来预防仔猪水肿病的发生。     

牦牛常见传染性腹泻病的诊断及防控

由于牦牛的经济价值较高,同时在政府的大力支持下,养殖牦牛逐渐变得热门,但在养殖过程中,由于部分养殖户缺乏科学的养殖理念,无法正确辨别牦牛疾病、不及时对病牦牛进行隔离治疗等因素,造成牦牛大规模感染、死亡,严重影响了牦牛产业的发展.因此必须秉持绿色养殖理念,养殖户应当对牦牛的一些常见腹泻病有一定的了解,特别是传染性相关的疾病,其临床症状比较类似、传染性强,同时还需要加强对疾病防控的学习,减少疾病的发生.     

猪戊型肝炎研究进展

我国为猪戊肝发病率比较高的地区之一,曾发生戊型肝炎的多次爆发或大面积的流行,并可传播给人类,与人的生活密切相关,回顾猪戊肝炎病毒结构特征研究,流行方式、临床症状及病理变化等,为猪戊型肝炎未来的诊断提供参照。文章收集国内外文献资料查询酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫电子显微镜(IEM)、免疫荧光实验(IFA)、荧光定量RT-PCR法对防治猪戊型肝炎进行研究,对其作了分析、比较和汇总。为猪戊型肝炎病毒提供了有效诊断方式以及防御措施。对猪戊型肝炎仍需养殖者认真护理,一旦确诊为动物戊型肝炎,应立即对其进行隔离治疗。