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为确定MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测中华鳖脾淋巴细胞体外转化的条件,对脾淋巴细胞浓度和培养时间、丝裂原种类和浓度等影响因素进行优化.结果显示:2×106 cells.mL-1的脾淋巴细胞用10μg·mL-1Con A(伴刀豆蛋白A)诱导培养120 h或用5μg.mL-1 PHA(植物血凝素)诱导培养144 h,能获得良好的检测效果.研究表明,采用MTT法测定中华鳖脾淋巴细胞体外转化方便可行,可为中华鳖脾淋巴细胞体外转化方面的研究提供参考. 相似文献
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以临床疑似犬瘟热病犬外周血总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增犬瘟热病毒(CDV)血凝素(H)基因。序列测定和分析表明该病料犬瘟热病毒H基因序列与国内其他地区分离到的毒株同源性较高(94.6%~99.2%),而与Onderstepoort株、Convac株等疫苗毒株的同源性较低(90.4%~91.2%)。分子遗传进化分析显示所有毒株可分为7个大的分支,且各分支间具有一定的地域性,其中待检病料中CDV与大多数中国分离株一样处于Ⅰ型。进一步以H全基因为模板,截短表达其3′端816 bp、459 bp两个片段,并克隆入原核表达载体pET30 a进行表达。结果显示它们分别能表达大小约为36.4 ku和22.2 ku的融合蛋白。免疫转印表明该纯化蛋白均可与犬瘟热病毒抗血清发生阳性反应,说明重组蛋白具备抗原性,可用于进一步的血清学研究。 相似文献
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伊维菌素治疗犬疥螨,蠕形螨效果好皮肤病是犬的一种常见病,多发病,其中以感染犬疥螨,犬蠕形螨来我院求诊的占95%以上,主要特征:犬患处脱毛;全身搔痒,出现红斑或丘疹样小结,皮肤有结痂,皮屑有明显增多,经镜检能发现虫体,确诊为犬螨病后,用伊维菌素(美国M... 相似文献
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采用饲养试验、代谢试验、屠宰测定等方法,研究在基础日粮中添加不同剂量蛋氨酸硒对岭南黄肉鸡生长性能、胴体特性和硒存留率的影响.结果表明,在基础日粮中分别添加0.1、0.15、0.2、0.25mg/kg Se水平的蛋氨酸硒比对照组(添加0.15 mg/kg Se水平的亚硒酸钠)体增重分别增加了9.52%(P<0.05)、11.78%(P<0.05)、8.85%(P<0.05)和8.22%(P<0.05);饲料转化率分别提高7.25%(P<0.05)、9.78%(P<0.05)、8.70%(P<0.05)和7.97%(P<0.05);硒存留率分别提高26.47%(P<0.05)、22.95%(P<0.05)、16.95%(P<0.05)和16.77%(P<0.05);蛋氨酸硒对肉鸡的胴体特性无显著影响. 相似文献
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将猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,NP)的基因片段克隆至载体pET-30a,转化重组质粒至Escherichia coli BL21(DE3)表达融合蛋白6×His-N,并以其为抗原免疫蛋鸡,制备特异性抗PRRSV-N卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin,IgY).结果显示:6×His-N在BL21中的表达量为60.2mg·L-1;将纯化浓缩的6×His-N与弗氏佐剂乳化,连续3次免疫海兰蛋鸡后,经ELISA检测,首免后第36天抗6×His-NIgY抗体为阳性(P/N=2.44);第83天的P/N值达到最高,为5.63,抗体经1:640稀释后,P/N值为2.29;经SDS-PAGE和Western blot分析,提取的卵黄抗体的纯度高且具有良好的免疫反应性.研究表明,抗PRRSV-N蛋白的IgY制备具有简便、成本低廉等特点,可用于PRRSV检测试剂盒的开发. 相似文献
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中华鳖MyD88部分序列克隆及其在组织中的表达差异分析 总被引:1,自引:0,他引:1
MyD88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)是多数TLRs(Toll like receptor,TLRs)信号转导过程中的关键接头分子。研究根据MyD88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)TIR结构域(Toll-like/IL-1 receptor domain)保守区设计简并引物,通过PCR扩增,成功地从中华鳖脾脏cDNA中扩增出351bp的目标序列。测序后经结构域和序列比较分析,扩增片段为中华鳖的MyD88 TIR结构域。该序列与大黄鱼、鸡等脊椎动物的MyD88的TIR结构域序列同源性和相似性分别为72.9%~86%和77.6%~83.6%。以热灭活嗜水气单胞菌刺激中华鳖后,经荧光定量PCR检测,在48h内,肝、脾和肾组织中MyD88 mRNA相对表达量均出现不同程度的增加,尤以脾脏中的增幅最为明显,为对照组的6.89倍;中华鳖心脏成纤维样细胞经20ng LPS刺激后1~8h,MyD88表达量有所提高,24h的表达量最高。该研究结果将为开展中华鳖天然免疫奠定良好基础。 相似文献
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研究在基础日粮中添加不同剂量"十全大补"药渣对肥育猪生长性能、胴体特性和肉质的影响.与对照组比较,肥育猪日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%的中草药渣日增重分别增加7.40%(P<0.05)、12.88%(P<0.05)和9.75%(P<0.05),料重比分别降低5.20%(P<0.05)、7.23%(P<0.05)和6.07%(P<0.05);瘦肉率分别提高3.86%(P>0.05)、6.27%(P<0.05)和5.80%(P<0.05),脂肪率分别降低6.42%(P<0.05)、9.63%(P<0.05)和9.30%(P<0.05),背膘厚分别降低7.20%(P<0.05)、13.26%(P<0.05)和12.12%(P<0.05),眼肌面积分别提高4.46%(P>0.05)、9.24%(P<0.05)和6.30%(P<0.05);肌肉红色色度分别提高2.75%(P>0.05)、6.67%(P<0.05)和3.92%(P>0.05),滴水损失率分别降低9.32%(P<0.05)、12.42%(P<0.05)和8.07%(P<0.05);粗脂肪含量分别提高20.80%(P<0.05)、28.47%(P<0.01)和25.55%(P<0.01).结果表明"十全大补"药渣可作为肥育猪饲料添加剂,具有改善其生长、胴体特性和肉质的效果. 相似文献