甘蔗组培绿苗的分化及游离氨基酸库变化

甘蔗品种仙游79/83的心叶愈伤组织在 N_6培养基中能100%一次诱导成完全苗.诱导分化绿苗过程中,不同培养基从诱导分化的第1天开始,氨基酸总量不断增加,到第18天达最大值.一次诱导分化成的完全苗,不论游离氨基酸的组分或含量都比无根苗的少.组氨酸和色氨酸并不是绿苗分化所必需的氨基酸.此外,不同质量的愈伤组织其氨基酸组分和含量都有差异,说明绿苗的分化可能与氨基酸库有密切关系.     

水稻体细胞培养与无性系变异——Ⅰ,不同基因型不同外植体的培养

对水稻5个品种的种胚和11个品种的幼穗在含不同激素浓度的MS培养基上培养,诱导愈伤组织并再生绿苗。品种间在愈伤组织诱导率、绿苗分化率和对激素的诱导效应表现了基因型差异。幼穗愈伤组织诱导率和绿苗分化率高于种胚。种胚的盾片愈伤组织分化能力高于胚轴,胚芽鞘的未分化得绿苗。去分化培养基添加2,4—D2mg/1+KT0.5mg/1,诱导愈伤组织的效果甚佳,并促进绿苗分化。选择胚性愈伤组织继代培养,种胚的培养270天,幼穗的培养210天,仍有部分品种保持较高的绿苗分化率。     

不同激素浓度及培养基对烟草愈伤组织分化的影响

 以烟草愈伤组织为材料,研究不同激素浓度配比、不同培养基对愈伤组织绿苗分化的影响,试验结果表明,在MS+IAA0.5mg/L+KT2.0mg/L培养基上可获得较高的绿苗分化率,在分化培养基中,除必需的大量元素外,一些有机物质,维生素及微量元素也对烟草愈伤组织的分化起重要作用。     

甘蔗离体培养的变异机理及筛选技术——Ⅱ.甘蔗组培苗分化过程中一些生物大分子的变化

比较5个供体的心叶和幼茎愈伤组织在 MS 和 N_6培养基中诱导分化绿苗过程 RNA,DNA 和可溶性蛋白质的动态变化.结果发现,在绿苗诱导分化的第6—9 d,核酸总量和 RNA含量均达到最高值,第9 d 后两者逐渐下降.DNA 含量从诱导分化开始即呈下降趋势,第9d 时DNA 含量最少,然后义逐渐增加.蛋白质含量在诱导分化的前3 d 增加显著,第3 d 后呈下降趋势,第9 d 后渐趋减缓.不同的培养基对生物大分子的含量变化有一定影响.本试验揭示了在甘蔗愈伤组织诱导分化绿苗过程中,生物大分子变化的不同阶段与细胞分化和器官形成的关系.     

籼稻花药培养出愈率,分化率和绿苗率的配合力分析

通过对５个籼稻品种（系）配成的５×５双列杂交后代的花药培养出愈率、分化率和绿苗率的分析表明：（１）出愈率、分化率和绿苗率是可遗传的特性，它们的遗传存在基因的加性效应和非加性效应，出愈率和绿苗率还具有明显的胞质效应；（２）一个具有交高出愈率的亲本或组合，其分化率和绿苗率并不一定高，愈伤组织的诱导过程和分化过程可能是由不同基因控制的；（３）在花培育种中，建议建立花培育种亲本圃，结合常规育种技术指导亲本     

诱导培养基对水稻胚愈伤组织形成和分化的影响

将10个籼稻品种(系)的胚分别接种于附加2,4-D(2mg/l)的4种诱导培养基上,研究其对盾片愈伤组织形成和绿苗再生的影响。结果表明:(1)10个品种(系)的盾片愈伤组织的开始形成时间,形成高峰和频率差异显著,但同一品种对不同培养基的反应差异不明显。(2)在绿苗再生率方面,各品种对4种培养基的反应不同,培养基相同,不同品种间愈伤组织再生绿苗频率存在显著差异。总之,不同基因型的水稻,其盾片愈伤组织的诱导与绿苗再生需要采用不同的培养基,才能获得理想的结果。     

籼稻花药培养出愈率、分化率和绿苗率的配合力分析

通过对５个籼稻品种（系）配成的５×５双列杂交后代的花药培养出愈率、分化率和绿苗率的分析表明：（１）出愈率、分化率和绿苗率是可遗传的特性，它们的遗传存在基因的加性效应和非加性效应，出愈率和绿苗率还具有明显的胞质效应；（２）一个具有较高出愈率的亲本或组合，其分化率和绿苗率并不一定高，愈伤组织的诱导过程和分化过程可能是由不同基因控制的；（３）在花培育种中，建议建立花培育种亲本圃，结合常规育种技术指导亲本选配．     

不同培养基和激素对超级杂交稻花药培养力的影响

以超级杂交稻两优培九F1的花药为材料,探讨不同诱导培养基、分化培养基及植物激素等因素对其花药培养效果的影响.结果表明:(1)不同的培养基表现出不同的花培效果,培养基和基因型间存在着一定的互作效应,其中改良M 8培养基表现出对不同基因型材料有较广的适应性和较强的绿苗诱导作用.(2)诱导培养基中添加1.5mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)与1.5 mg/L萘乙酸(NAA)配比的组合比添加2.0 mg/L 2,4-D的组合绿苗分化率高1.17～2.80个百分点.(3)MS分化培养基中添加2.0 mg/L 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)配比的比添加2.0 mg/L激动素(KT)配比的绿苗分化率高2.52个百分点.     

激动素对玉米植株体外再生的影响

培养基配方是玉米组织培养的重要影响因素,而激素又是培养基中的关键成分.为了明确激动素(Kt)在愈伤组织分化中的作用,采用含不同Kt浓度的培养基对2个玉米材料的愈伤组织先进行胚状体诱导,然后再作绿苗再生培养.结果表明,Kt对玉米愈伤组织分化形成植株起着积极作用,能显著提高绿苗分化率.在Kt浓度由0增加到2 mg/L的过程中,绿苗分化率随着Kt浓度的增加而升高,但丛生苗的比率也随之增加.因此,在培养基中添加适当浓度的Kt是必要的,具体浓度应该由基因型材料和试验目的确定.     

生根粉及植物激素在粳籼稻杂交花药培养中的应用研究

以典型粳籼交组合 (巴利拉×南京 1 1 ) F1 为试验材料 ,研究不同诱导培养基、分化培养基以及 ABT生根粉与其他植物激素配合使用对该组合进行花药培养的效应。结果表明 :源于含 2 ,4 -二氯苯氧乙酸 (2 ,4 -D)、α-萘乙酸 (NAA)、激动素 (KT)诱导培养基的愈伤组织 ,其绿苗分化率高于仅含 2 ,4 -D诱导培养基的愈伤组织 ;以 2 mg/L的 6-苄基氨基嘌呤 (6-BA)代替 KT组成的分化培养基可提高该组合的绿苗分化率 ;在 MS分化培养基中添加 5mg/L ABT生根粉可促进绿苗的分化。在 MS壮苗培养基中添加 5.0～ 7.5mg/L ABT生根粉可使再生植株生长矮壮繁茂 ,不定芽及次生根数目显著增加 ,并可提高再生植株移栽成活率。ABT生根粉、多效唑 (MET)、衣康酸衍生物 I(NCAI)以不同浓度配合使用 ,可用于调节试管苗根芽生长速度 ,以适应组织培养中不同时期对试管苗的不同要求     

不同培养基和激素对超级杂交稻花药培养力的影响

以超级杂交稻两优培九F1的花药为材料,探讨不同诱导培养基、分化培养基及植物激素等因素对其花药培养效果的影响。结果表明：（1）不同的培养基表现出不同的花培效果,培养基和基因型间存在着一定的互作效应,其中改良M8培养基表现出对不同基因型材料有较广的适应性和较强的绿苗诱导作用。（2）诱导培养基中添加1．5mg／L 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）与1．5mg／L萘乙酸（NAA）配比的组合比添加2．0mg／L 2,4-D的组合绿苗分化率高1．17—2．80个百分点。（3）MS分化培养基中添加2．0mg／L 6-苄基氨基嘌呤（6-BA）配比的比添加2．0mg／L激动素（KT）配比的绿苗分化率高2．52个百分点。     

粳稻花药脱分化培养基的改良研究

以7个粳稻杂合组合F_2为试材,通过对N_6培养基的微量元素、维生素含量及有机添加物的综合调整,提高了脱分化培养基对不同组合粳稻品种花药愈伤组织的诱导率,在脱分化培养基上增加肌醇1克/升有明显提高绿苗分化的作用。     

生长素IAA对春小麦花培苗生长的影响研究

选用遗传背景丰富的春小麦杂种基因型材料进行花药培养 ,通过愈伤组织脱分化培养获得的绿苗转接在 1/2 MS基本培养基中 ,并加入不同浓度 (0 .1～ 10 .0 mg/L ) IAA的壮苗培养基上培养的结果表明 ,高浓度的生长素对苗的顶端生长优势有明显抑制作用 ,使组培苗的茎、叶、根等器官的分生组织细胞不断产生 ,细胞壁逐渐硬化 ,细胞长度变短 ,分蘖以及须根系不断产生 ,生长稳健 ,培养基养分供需与绿苗的生长能协调进行 ,在减少了绿苗壮苗培养转管次数的同时 ,减少了愈组苗在壮苗过程中的损失 ,提高了愈伤组织分化苗壮苗培养的效率 ,获得了不经炼苗、直接移栽温室且成活率高的健壮绿苗。壮苗直接移栽温室成活率达到 98.6 %。     

内源激素对水稻不同外植体培养力的影响

利用HPLC法对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有差异的几个水稻品种的不同外植体(花药、幼穗、幼胚和成熟胚)及其愈伤组织的内源激素含量进行测定分析。结果表明,内源激素的含量和配比是影响愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素之一。不同外植体中的内源激素对愈伤组织诱导率的表现为:Z ZR呈负效应,IAA呈正效应,GA除成熟胚外呈负效应。愈伤组织中内源激素对绿苗分化率的影响表现为:IAA和GA呈负效应,ABA、Z ZR呈正效应。内源激素的配比对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有一定作用,表现为:IAA/Z ZR对愈伤组织诱导率有一定的正效应,Z ZR/IAA、ABA/IAA对绿苗分化率呈显著正相关。     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

采用磁场强度300，500，700mT预处理大部分花粉发育处于单核中期和单核靠边期的花蕾，以提高花椰菜花药培养的愈伤组织诱导率和绿苗分化率，结果表明，磁场预处理可以明显提高愈伤组织诱导率，以均匀磁场预处理30min、磁场强度为300mT的效果较好，提高诱导率28.87%；经过磁场预处理，两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比对照间差异明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低；在同一种诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13.2%-26.2%。     

提高大麦花粉植株再生频率的研究

本文就如何提高大麦花粉植株再生频率进行了研究.结果表明:不同基因型的绿苗再生率存在较大差异,F_1 代明显高于其它世代,平均绿苗率为6.2%.最高达18.3%;用改良 C_(17)培养基作为诱导培养基能有效地提高绿苗率:在诱导培养基中用6%麦芽糖作为碳源有利于愈伤组织的诱导及绿苗的分化;在分化培养基中补加0.5mg/LZT 对绿苗的产生有着明显的促进作用.     

云南水稻品种原生质体培养研究

采用KPR和R2培养基进行水稻原生质体培养，日本晴、楚粳8号、云粳9号、大白谷和元江普通野生稻先后获得了原生质体培养的成功，除日本晴外，其余品种均为首次报道，品种间绿苗再生率有显著差异。日本晴最高，大白谷最低，同一品种不同的俞伤组织间，分化率有很大差异。有的愈伤组织极易分化出绿苗，有的不能再生出绿苗，说明分化前的预培养非常重要。N6分化培养基的再生绿苗率极显著地高于MS。配方为N6 葡萄糖20g/L 蔗糖30g/L IAA0.2mg/L 6-BA0.5mg/L Agarose-110g?L的培养基。分化率最高，按初次接种的愈伤组织块计，每块平均再生绿苗1.4苗,酶解原生质体量的多少,与愈伤组织在N6 1mg/L2,4-D的液体培养基中悬浮培养时间的长短有关,悬浮时间较长则易于获得较多的原生质体.日本晴的再生植株中,有两株多移栽到抽穗仅45d,有可能是极早良的变异株,有些植株的粒型和稃毛也有明显变异对鉴定和利用变异的植株具有现实意义.     

彩色辣椒离体培养外植体及诱导培养基的筛选

以5种彩色甜椒分别于基本培养基添加不同浓度、不同种类氨基酸、椰乳等有机物的不同处理,筛选适宜不同外植体(子叶、下胚轴、去子叶和去根幼苗尖)的诱导、伸长成苗培养基和不同品种适宜的外植体,结果表明添加甘氨酸 丝氨酸或甘氨酸 丝氨酸 Km8p、GA3与L-苯丙氨酸、氨基丁酸配合有利于去子叶、去根幼苗尖分化和成苗。     

小麦幼胚离体培养的研究初报

[目的]筛选适宜小麦幼胚培养的培养基和转基因受体材料的优良基因型,为小麦转化、遗传等提供依据.[方法]以7个春小麦品种(系)的幼胚为材料,取开花后12～16 d的幼胚进行培养,20 d后统计幼胚一步成苗数和愈伤组织绿苗分化数.[结果]小麦幼胚在C17、MS和YP三种培养基上都能诱导一次成苗,其中YP培养基一次成苗率最高(75;),其次是MS(33.13;),最低的是C17(23.34;),YP培养基一次成苗的效果明显优于其它两种培养基,不同基因型间的愈伤组织绿苗分化率差异明显.[结论]筛选出适宜小麦幼胚培养一次成苗的YP培养基和一次成苗和愈伤组织分化绿苗率都较高的材料新春9号,此材料可作为幼胚培养和转基因受体材料的优良基因型.     

5个切花月季品种的叶片离体培养和再生能力的基因型效应

以5个切花月季品种的试管苗叶片为外植体, 研究了叶片直接和间接再生2种途径, 结果表明: 5个品种的叶片再生能力相差较大, 直接再生率由高到低排序为卡罗拉(56.1%)、沃蒂(55.6%)、坦尼克(51.6%)、维西利亚(45.0%)、巴比伦(35.2%); 愈伤组织诱导率、间接分化率的排列顺序与直接再生率基本相同. 上述研究可得出基因型对再生能力具有如下调控效应及特点: 不同基因型对培养基种类及植物生长调节剂的要求, 对脱分化与再分化能力的调控, 对不同组织、器官的再生能力的调控均具有同一性; 但不同基因型、甚至同一基因型的不同组织、器官还具有一定的特异性.