应用反转录聚合酶链式反应检测鸡Th1样淋巴因子mRNA表？…

应用反转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和限制性酶切分析技术对鸡脾细胞体外受到有丝分裂原ＣonＡ刺激的情况下,其Ｔh1样淋巴因子mＲＮＡ的表达水平进行了研究。实验结 果表明,ＣonＡ诱导培养３个小时的鸡脾细胞表达α－干扰素（ＣhＩＦＮ－α）、γ－干扰素（ＣhＩＦＮ－γ）和白细胞介素－２（ＣhＩＬ－２）等鸡的Ｔh1样淋巴因子mＲＮＡ 。未诱导但培养了３小时的鸡脾细胞可表达ＣhＩＦＮ－α和ＣhＩＦＮ－γmＲＮＡ,而未     

重组牛白细胞介素-2增强小鼠对伊氏锥虫可溶性抗原免疫应答的研究

使用伊氏锥虫可溶性抗原免疫小鼠，研究了同时注射重组牛白细胞介素－２（ｒＢＩＬ－２）对ＮＫ细胞杀伤活性及特异性抗体水平的影响。试验鼠随机分为４组：Ａｇ组，ｒＢＩＬ－２组，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组和ＰＢＳ对照组。以ＬＤＨ释放法和间接ＥＬＩＳＡ法分别检测脾ＮＫ细胞杀伤活性及抗体水平。结果表明，首次免疫后２４ｄ，Ａｇ组ＮＫ细胞杀伤活性为３１．６％，ｒＢＩＬ－２组为９９．６６％，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为９８．９８％，对照组为１９．７３％；抗体效价Ａｇ组为２４，Ａｇ＋ｒＢＩＬ－２组为２６。说明ｒＢＩＬ－２可显著提高ＮＫ细胞杀伤活性及促进抗体生成，提高宿主免疫力。     

肉用鸡垂体—肾上腺轴与免疫功能关系的研究

以艾维茵肉鸡为试验动物，研究了垂体－肾上腺轴在传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）强毒株攻击时对免疫系统的调节作用。结果表明，用ＩＢＤＶ强毒株攻击后，试验鸡垂体－肾上腺轴活动加强，血清促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）和皮质酮（Ｆ）上升，抗ＩＢＤＶ抗体、白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素３（ＩＬ－３）上升，Ｔ淋巴细胞转化率下降。未经ＩＢＤ疫苗免疫的鸡由于免疫系统遭到ＩＢＤＶ破坏，在ＩＢＤＶ强毒株攻毒后，抗Ｉ     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理：Ⅰ.细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７，１４，２８免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活发性明显降低（Ｐ＜０．０１）。结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫     

雏鸡感染CIAV后细胞因子与免疫功能变化

本实验研究了１日龄雏鸡感染ＣＩＡＶ后免疫器官Ｔ细胞的ＩＬ－２、ＩＦＮ、ＣＳＦ诱生活性、Ｔ细胞与Ｂ细胞增殖反应的动态变化。结果表明，雏鸡感染ＣＩＡＶ后：（１）胸腺和脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性分别于７～２１ｄ不１７～１４ｄ明显降低；（２）脾脏淋巴细胞ＩＦＮ诱生活性于７～１４ｄ显著减弱；（３）胸腺淋巴细胞ＣＳＦ诱生活性于１４ｄ未见异常，２１ｄ明显升高；（４）胸腺和脾脏Ｔ细胞增殖反应分别于１４ｄ和７～２１ｄ明显减弱：（５）法氏囊和脾脏Ｂ细胞增殖反应分别于７～２１ｄ和２１ｄ显著减弱；（６）胸腺重量与体重比值、法氏囊重量与体重比值、体重均明显降低；（７）外周血液ＰＣＶ、ＲＢＣ、Ｈｂ、ＷＢＣ、血栓细胞（血小板）数值均明显降低。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理──Ⅰ．细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８和攻毒后１０天取材检测．给果，感染ＣＩＡＶ雏鸡经ＮＤ免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡明显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活性明显降低（Ｐ＜０．０１）．结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫的分子免疫调节作用明显减弱，ＨＩ抗体效价于免疫后７～２８日明显降低（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ强毒攻击后，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率为６０％％，明显低于免疫对照鸡（１００％）．     

中药复方防治禽霍乱的效果试验

应用中草药复方水煎液防治禽霍乱，体外抑菌试验表明该中药复方对Ｃ４８－１禽霍乱巴氏杆菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）为６４０倍，同时对Ｃ７９－６２鸡白痢沙门氏杆菌和大肠埃希氏菌４４６７６（Ｏ７８：Ｋ８０）有较好的抑菌作用，ＭＩＣＩ分别为６４０倍和３２０倍；对人工感染禽霍乱病鸡的治疗保护率达１００％，以人工感染禽霍乱病鸡的预防保护率达８３．３３％，比现行氢氧化铝菌苗的保护率高３３．３３％，与菌苗合用能显著提     

应用间接免疫荧光法检测鸡传染性贫血病病毒抗体的研究

用鸡传染性贫血病病毒（ＣＩＡＶ）ＭＳＢＩ－ＴＫ５８０３毒株感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ；细胞涂片为抗原，建立了检测ＣＩＡＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＩＦＡ）。应用该ＩＩＦＡ方法对人工感染的ＳＰＦ鸡进行了检测１５只１日龄ＳＰＦ鸡在接种后第７、１４天时均呈阴性反应；２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，３５天时呈明显阳性反应；１４只４０日龄ＳＰ     

鸡贫血因子病全身免疫功能变化的研究

用鸡贫血病毒（ＣＡＶ）感染１日龄ＡＡ雏鸡,以未感染同龄ＡＡ雏鸡为对照,感染后不同时间检测其外周血液Ｔ、Ｂ细胞数量和ＩｇＧ,ＩｇＭ,ＩｇＡ含量,胸腺,法氏囊,脾脏ＩｇＧ,ＩｇＭ,ＩｇＡ抗体生成细胞和Ｔ细胞数量以及Ｔ、Ｂ细胞增殖功能;胸腺和脾脏白细胞介素２（ＩＬ－２）和干扰素（ＩＦＮ）诱生活性等的动态变化。     

CD2配体在IBD和ND疫苗免疫应答中的佐剂效应研究

分别以猪源ＣＤ２配体协同新城疫（ＮＤ）Ⅳ疫苗免疫１８日龄鸡和绵羊源ＣＤ２配体协同法氏囊（ＩＢＤ）中等毒力疫苗免疫２５日龄鸡，采用β－微量法和琼脂扩散法测ＮＤ抗体及ＩＢＤ抗体水平。结果表明，两种ＣＤ２配体均能促进鸡体内特异性抗体的提前产生，并且试验组鸡抗体效价显著高于对照。     

雏鸡在感梁IBDV后血浆cAMP,cGMP和IL—2水平变化

在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０－５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ＩＬ－２水平动态变化。结果表明：示免疫攻毒鸡（Ａ组）、免疫攻毒鸡（Ｂ组）和未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）在ＩＢＤＶ攻毒前１天血浆ＣＡＭＰ和ＣＧＭＰ水平Ｂ组明显高于Ａ和Ｃ组,ＣＡＭＰ／ＣＧＭＰ幽会同样是Ｂ组高于或明显高于Ａ和Ｃ组,ＩＬ－２水平三组之间无明显差异。在攻毒后的头５天内,Ｂ和Ｃ组ＣＡＭＰ明显升高,而Ａ组     

鸡痘病毒282E4株2.2kbTK基因序列分析

将鸡痘病毒２８２Ｅ４弱毒株基因组中的３．７ｋｂＨｉｎｄⅢ片段克隆到ＫＳ（－）质粒中，亚克隆后，获得含ＴＫ基因正反方向插入的２．２ｋｂＨｉｎｄⅢ－ＣｌａＩ片段的质粒ｐＫＦＡ和ｐＫＦＢ，进而构建出正反方向的系列嵌套缺失质粒。用Ｔ７、Ｔ３引物所做的核苷酸序列分析表明，２．２ｋｂＨｉｎｄⅢ－ＣｌａＩ ＴＫ基因序列长为２１５９ｂｐ，含有两个完整的读码框架（ＯＲＥ）Ｘ和ＴＫ，并确证了ＴＫ基因内存在单一酶切点Ｎ     

带母源抗体的青年鸡皮下接种传染性法氏囊病活疫苗的效果

在１日龄和３周龄鸡的脾粘着（ＣＳＡ）细胞中，检测到了被正常鸡血清（ＮＣＳ）中和过的传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）的感染性，有３周龄鸡的（ＣＳＡ）细胞中，检测到了被母源抗体（ＭＮ－Ａｂ）中和过的ＩＢＤＶ的感染性。此外，发现１日龄鸡制备的ＣＳＡ细胞含有补体受体（ＣＲ），１周龄鸡制备的ＣＳＡ细胞既含有ＣＲ又有Ｆｃ受体（ＦｃＲ）。然而，即使ＣＳＡ细胞上的ＦｃＲ被热凝集ＮＣＳ（５６℃，６０分钟）阻断的情况下，     

鸡IL-2基因的克隆及序列测定

应用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，参照Ｓｕｎｄｉｃｋ发表的鸡白细胞介素２（ＩＬ－２）ｃＤＮＡ基因序列，利用在行设计合成的１对引物，从ＣｏｎＡ活化的５周龄ＨＷＬ－ＳＰＦ鸡脾细胞中，扩增出长４４５ｂｐ的鸡ＩＬ－２ｃＤＮＡ基因，以ＰＵＣ１１９为载体，克隆了扩增片段，经酶切鉴定及ＤＮＡ序列测定，确认为鸡ＩＬ－２基因，该序列与Ｓｕｎｄｉｃｋ报道的结果一致。对氨基酸的比较发现，鸡ＩＬ－２与牛ＩＬ－２     

PCR结合分子杂交法检测鸡传染性支气管炎病毒

利用逆转录－ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）特异性扩增鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）基因组中Ｍ基因和Ｎ基因之间一段核酸片段。以ｐＵＣ１９质粒载体将此片段克隆，用ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切此重组质粒，回收克隆片段后，制成生物素标记的核酸探针。用ＲＴ－ＰＣＲ及生物素核酸探针法分别对ＩＢＶ，ＩＢＤＶ，ＩＬＴＶ，ＭＤＶ及ＮＤＶ进行检测，结果证明该方法为ＩＢＶ特异性检测方法。对人工感染ＩＢＶ的ＳＰＦ鸡口腔棉拭样品进行跟踪检测，证明本方法能在ＳＰＦ鸡接毒后１～１０ｄ内检出ＩＢＶ。     

禽流感RT—PCR诊断法的建立

根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物,并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ,建立了逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＩＶＲＮＡ的方法,应用此法对鸡胚培养ＡＩＶ尿囊液,ＳＰＦ感染鸡粪便进行了检测,并与琼脂扩莠试验和电镜技术作了对比,特异性试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）,传染性氏囊病病毒（ＩＢＤ     

鸡传染性贫血病毒感染对雏鸡免疫系统的影响Ⅱ．几种细胞因子体外诱生活性动态变化

１日龄雏鸡人工感染鸡传染性贫血病毒（ＣＩＡＶ）后７、１４ｄ，脾脏Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２活性明显降低（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５），２１ｄ明显回升，２８ｄ显著升高（Ｐ＜０．０５），３５ｄ后降至对照水平；感染后７、１４和２１ｄ，胸腺Ｔ淋巴细胞ＩＬ－２诱生活性明显降低（Ｐ＜０．０５），２８ｄ后恢复至对照水平。感染后７、１４ｄ，脾脏淋巴细胞ＩＦＮ诱生活性明显低于对照鸡（Ｐ＜０．０５），２１ｄ后恢复至对照水平。感染后１４ｄ，胸腺淋巴细胞集落刺激因子（ＣＳＦ）诱生活性未见明显变化，２１ｄ显著升高（Ｐ＜０．０５），２８ｄ降至正常水平。     

Ge-132诱导鸡体产生外源性IFN的研究

以Ｇｅ－１３２为诱生剂诱生鸡体产生外源性干扰素。将鸡胚成纤维细胞－水泡性口炎病毒作为鸡干扰素（ＩＦＮ）的检测系统,对不同种细胞、不同的细胞浓度、不同的ＩＦＮ诱生剂等诸因素对ＩＦＮ产生的影响进行了比较。试验结果表明：（１）在Ｇｅ－１３２、鸡新城疫病毒（ＮＤＶ－Ｆ）、植物血凝素（ＰＨＡ）、聚肌胞（ｐｌｙ Ｉ：Ｃ）四种诱生剂中,诱生能力差异极显著（Ｐ〈０．０１）,且以Ｇｅ－１３２诱生ＩＦＮ的能力为最强,     

淫羊藿——蜂胶佐剂对小白鼠NK细胞活性的影响

应用ＬＤＨ（乳酸脱氢酶）释放法检测了淫羊藿－蜂胶佐剂（以下简称Ｙ－Ｆ佐剂）对小白鼠ＮＫ细胞活性的影响。结果Ｙ－Ｆ佐剂组小鼠ＮＫ细胞活性极显著地高于阴性对照组（Ｙ组）和环磷酰胺组（ＣＹ组）（Ｐ＜０．０１）；Ｙ－Ｆ佐剂／环磷酰胺组极显著高于ＣＹ组（Ｐ＜０．０１），但与Ｙ组差异不显著（Ｐ＞０．０５）。结果表明：Ｙ－Ｆ佐剂不仅能极显著提高小鼠ＮＫ细胞杀伤活性，而且能抗ＣＹ的免疫抑制作用，使ＣＹ抑制小鼠ＮＫ细胞活性恢复到正常水平。     

以免疫荧光染色法快速诊断鸡传染性支气管炎病毒

以免疫荧光染色法快速诊断鸡传染性支气管炎病毒利用鸡胚气管环培养（ＴＯＣ）是分离临诊材料中传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）最有效的方法。利用免疫荧光（ＩＦ）染色确定ＴＯＣ中的ＩＢＶ，以１９－２０日龄ＳＰＦ鸡胚气管切成６００μｍ厚的环，ＩＢＶ在ＴＯＣ传代多次...