鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅱ）：疫苗…

根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二各病毒混合毒种的最适稀释比例，将混合毒种接种９－１０龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养），使接种鸡胚９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，０．０１ｍｌ尿囊液含：ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０、ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。收获同胚培养的胚毒，制备同胚培养的胚毒，制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫１８日龄雏鸡，免疫后４周二联疫苗的有效抗体分别为：ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）≥１：１６、ＩＢ中和抗体     

中药对人工感染IBDV鸡产生免疫抑制的调节作用

２２０只非免疫鸡随机分为Ａ,Ｂ,Ｃ,Ｄ,Ｅ５组,每组４４只。Ａ组给中药２次,Ｂ组５次,Ｃ、Ｄ、Ｅ组不给中药。于１４日龄对Ａ,Ｂ,Ｃ组人工感染传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）,于２１日龄对Ａ,Ｂ,Ｃ,Ｄ组接种新城疫（ＮＤ）Ⅱ系疫苗,于４６日龄每组随机抽取１５只鸡均攻ＮＤ强毒。结果表明：攻ＩＢＤＶ后一周,Ｃ组的死亡率显著高于Ａ组和Ｂ组（Ｐ〈０．０５）,新城疫Ⅱ系苗免疫后,Ｂ组鸡新城疫血凝抑制（ＨＩ）抗体效     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅲ）

用同胚培养的含ＮＤＶ、ＩＢＶ胚液制备的二联油乳剂灭活苗，经免疫效力试验表明，用５０倍稀释的鸡二联灭活苗，０．５ｍｌ／只剂量免疫１８日龄鸡，４周后试验免疫鸡分别进行ＮＤＶ、ＩＢＶ强毒攻击，攻毒保护率在５０％以上，证明０．５ｍｌ剂量含有５０个半数保护量（５０个ＰＤ５０），ＮＤＨＩ抗体≥１：１６，ＩＢＶＮ抗体≥１：８便可保护。三批疫苗免疫１８日龄鸡，０．５ｍｌ／只组免疫鸡体现人有效抗体可维持１６周以上，     

新城疫与传染性法氏囊病疫苗对雏鸡联合免疫的研究

将１１４只１１日龄海赛克斯褐公鸡随机分成５组：Ⅰ组为空白对照，Ⅱ组用新城疫（ＮＤ）弱毒苗和ＮＤ油佐剂灭活苗同时免疫，Ⅲ组用传染性法氏囊病（ＩＢＤ）地方毒株油佐剂灭活苗免疫，Ⅳ组用ＮＤ弱毒苗、ＮＤ油佐剂灭活苗、ＩＢＤ地方毒株油佐剂灭活苗同时免疫，Ⅴ组在Ⅳ组的基础上增加ＩＢＤ弱毒苗免疫。５组鸡分别隔离饲养，定期测定血清ＮＤＨＩ效价与ＩＢＤ琼扩效价。选择时机用强毒攻击，观察各组鸡的保护情况。结果：（１）Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组鸡均能很好地抵抗ＮＤＶ强毒的攻击，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组鸡无论对ＩＢＤＶ人工感染，还是自然感染，均有坚强的保护力；（２）ＩＢＤ地方毒株油佐剂灭活疫苗不干扰ＮＤ疫苗的免疫应答；（３）ＩＢＤ弱毒苗对ＮＤ疫苗的免疫应答有一定影响，在免疫初期能促进机体尽快对ＮＤ疫苗产生应答，但后期ＮＤ疫苗的ＨＩ抗体降低较快；（４）ＮＤ疫苗对ＩＢＤ疫苗的免疫效果无显著影响。作者提出，对雏鸡首免（无论有、无母源抗体）可采用ＮＤ弱毒苗＋ＮＤ油佐剂灭活苗＋ＩＢＤ（地方毒株）油佐剂灭活苗同时进行免疫，至少可以保护到上笼后或开产前免受ＮＤＶ和ＩＢＤＶ的感染，既简化了免疫程序，又可减少对鸡群的应激，值得推广应用。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理──Ⅰ．细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８和攻毒后１０天取材检测．给果，感染ＣＩＡＶ雏鸡经ＮＤ免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡明显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活性明显降低（Ｐ＜０．０１）．结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫的分子免疫调节作用明显减弱，ＨＩ抗体效价于免疫后７～２８日明显降低（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ强毒攻击后，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率为６０％％，明显低于免疫对照鸡（１００％）．     

感染鸡贫血病毒雏鸡ND免疫后血清Igs和HI抗体的动态变化

本试验对１日龄感染鸡传染性贫血病毒（ＣＩＡＶ）雏鸡接种新城疫（ＮＤ）疫苗及其强毒攻击后外周血液免疫球蛋白ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ含量和ＨＩ抗体滴度的动态变化进行研究。结果发现，ＣＩＡＶ感染雏鸡ＮＤ疫苗免疫后，其外周血液ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ含量和ＨＩ抗体滴度，于接种ＮＤ疫苗后７￣２８ｄ较未感染ＣＩＡＶ的免疫对照雏鸡明显减少，表明ＣＩＡＶ感染雏鸡对ＮＤ疫苗免疫的体液免疫应答功能明显降低。ＮＤ强毒攻击后     

鸡新城疫—传染性法氏囊炎母源抗体的监测

应用血凝抑制试验（ＨＩ），琼脂扩散试验（ＡＧＰ）对１￣２５日龄肉用及蛋用雏鸡的血清和１￣２１日龄鸡胚中的卵黄提取液、胚体浸液、血清进行了鸡新城疫（ＮＤ）、传染性法氏囊炎（ＩＢＤ）母原性免疫抗体消长动态的监测。试验结果表明，雏鸡母源抗体的消长动态呈下山峰势；鸡胚中卵黄内ＮＤ抗体效价１￣１７日胚龄持续在６￣９（ｌｏｇ２）１８日胚龄其抗体水平开始下降，ＩＢＤ抗体效价１￣１７日胚龄持续在２￣３（ｌｏｇ２）     

接种IBDV雏鸡在接种ND疫苗后免疫器官组织抗体生成细胞的变化

无ＩＢＤＶ母源抗体的健康滨白１日龄公雏接种ＩＢＤＶ，同时设健康对照鸡。接种鸡及对照鸡均分成两组。接种鸡中的一组在１４日龄时经点眼，滴鼻免疫接种ＬａＳｏｔａ苗，对照鸡的一组也同样免疫，称为感染一次免疫鸡和对照一次免疫鸡；感染鸡的另一组在首次免疫（１４日龄）后２周（２８日龄）进行ＮＤ二次免疫，对照鸡的另一组也进行同样处理，称为感染二次免疫鸡和对照二次免疫鸡。在免疫后不同时期检测各组鸡氏囊，胸腺，脾脏，     

表达马立克氏病病毒CV1988／Rispens糖蛋白B重组鸡痘病毒的免？…

用表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ（Ｉ型疫苗株ＣＶ１９８８／Ｒｉｓｐｅｎｓ糖蛋白Ｂ（ｇＢ）基因的重组鸡痘病毒（ｒＦ－ＰＶ－ｇＢ／Ｒ）和鸡痘病毒（ＦＰＶ）疫苗株２８２Ｅ４免疫１日龄不同品种的鸡,来评价２种病毒株的安全性及免疫母源抗体的商品是我毒性,而对无毒源抗体的ＳＰＦ鸡的毒性则不同。斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交产,ｆＦＰＶ－ｇＢ／Ｒ中无氨苄青霉素的抗性基因。     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理：Ⅰ.细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７，１４，２８免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活发性明显降低（Ｐ＜０．０１）。结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫     

Newcastle disease vaccination: A comparison of vaccines and routes of administration in Pakistan

Twelve-day-old chickens were vaccinated once with different Newcastle disease (ND) vaccines ( F, La Sota and Mukteswar) by two different routes (intraocular and drinking water). Chickens from a seventh group were uninoculated controls. At weekly intervals for 7 weeks after vaccination, 20 chickens from each vaccinated group and 20 chickens from the control group were examined for the production of haemagglutination-inhibition (HI) antibodies and for protection as assessed after challenge with velogenic, viscerotropic ND virus.

La Sota ND vaccine used intraocularly ranked the best and Mukteswar vaccine by the drinking water route the worst for their HI antibody titres prior to challenge. Differences between the treatments in protection were examined. For all three vaccines intraocular vaccine produced higher protection than drinking water vaccine. An inverse relationship between prechallenge and postchallenge HI titres was also recorded.     

山羊痘病毒疫苗株与野毒株PCR-RFLP鉴别方法的建立及应用

为了建立区分疫苗株与广西分离株的检测方法,根据GenBank上的山羊痘病毒序列设计1对引物,用来扩增山羊痘病毒P32基因,通过对国内疫苗株及6株广西分离株的P32基因进行克隆、测序比较发现,所有广西分离株核苷酸651位的碱基全部由T变为C,647位~652位核苷酸构成由TGTATA变异为TGTACA,多了1个限制性内切酶Bsp1407Ⅰ位点,因此用特异性引物扩增出739 bp的目的片段后,再用限制性内切酶Bsp1407Ⅰ进行酶切分析,疫苗株可以切成135 bp和604 bp 3个片段,广西分离株可以切成135、226、378 bp 3个片段。结果表明,所建立的PCR-RFLP方法可以区分疫苗株和广西分离株。     

鸡新城疫流行毒株与标准毒株的交叉免疫保护试验

用新城疫(ND)分离强毒油佐剂灭活苗和NDV La Sota油佐剂灭活苗分别免疫母源抗体平均为2 log2的12日龄公雏。免疫后每隔1周采集血清，用微量血凝抑制试验检测HI抗体。免疫后21 d抗体水平达到峰值，抗体水平在6log2以上，维持30 d以上。免疫40 d后，用ND分离强毒株和NDVF48E9分别进行攻毒试验，2种疫苗的保护率均为100％，攻毒结果表明，ND分离强毒株和NDVF48E9株的免疫原性差异不显著。     

猪流行性腹泻病毒疫苗株与野毒株RT-PCR检测方法的建立与应用

根据GenBank中猪流行性腹泻(PED)疫苗株与野毒株ORF3的特点设计特异性引物,建立能够快速区分PEDV疫苗株与野毒株的RT-PCR检测方法。建立的RT-PCR检测方法能够对PEDV疫苗株与野毒株扩增出特异性片段,其大小分别为278 bp和327 bp。该方法具有快速、特异、通用等特点,可用于实验室快速诊断、野毒株的区分,为该病的诊断及免疫防控提供参考依据。     

新城疫CHR株与La Sota株2种疫苗近期免疫效力比较试验

鸡新城疫CHR 株冻干疫苗中试产品3 批以及La Sota 株冻干疫苗( 符合质量要求) , 以5 种免疫途径: 肌注、滴鼻、喷雾、饮水、拌料分别接种11 日龄雏鸡。每批疫苗每种途径接种1 组, 20 只/ 组, 共20 组。雏鸡群免疫前血凝抑制抗体(HI) 效价为1∶2-13 , 于14 d 、28 d 后再测HI抗体水平, 并分别用10 000 鸡胚半数致死量(ELD50) 新城疫标准强毒北京株攻击。从而检测2 种疫苗用5 种免疫途径免疫后在不同时间的近期免疫效力。结果表明, 近期内CHR 株疫苗HI抗体呈上升趋势, 而La Sota 株疫苗HI抗体先升高后下降; CHR 株疫苗以饮水和拌料途径效果较好, 其它3 种途径效果相似。接种后14 d 攻毒, 2 种疫苗均能较好保护强毒攻击; 28 d 后, CHR 株保护率高于La Sota 株。     

基于US区缺失位点猪伪狂犬病病毒疫苗株与野毒株鉴别诊断方法的建立

依据GenBank中公布的猪伪狂犬病病毒全基因组序列,针对gI、gE、28K、TK四个基因序列,设计、合成了5条引物,并对野毒株SA株、gI-/gE-/PRVSA双基因缺失株和Bartha K61疫苗株进行了扩增,得到2061bp、1323bp、801bp和963bp特异性目的条带,其中BarthaK61疫苗株基因组检测最小浓度为136pg/μL。建立了针对野毒株和两种疫苗株的鉴别诊断方法。     

桑树根际固氮细菌的分离鉴定及固氮酶活力测定

利用固氮细菌可降低桑园化肥使用量和提高桑叶产量与品质。采用选择性培养基,从桑树根际分离获得24个具有固氮能力的细菌分离株,以rep-PCR基因指纹分析聚类为18个聚类群。经固氮酶活性测定,PA19、PA2和PK1菌株具有较强的固氮酶活性。利用菌落形态特征观察及16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,对3株细菌进行鉴定的结果是:PA19菌株为中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium sp.),PA2菌株为假单胞菌属(Pseudomonas sp.),PK1菌株为土壤杆菌属(Agrobacterium sp.)。     

Blocking ELISA's for the distinction between antibodies against European and American strains of porcine reproductive and respiratory syndrome virus

A double blocking ELISA was developed in order to satisfy the need for large scale serological screening for PRRS and simultaneous distinction between infection with European and American strains of PRRSV in pig herds. The Immunoperoxidase monolayer assay (IPMA) and the double blocking ELISA enabled distinction on serological basis between infection with European and American strains of PRRSV. The distinction was possible from about day 7 after infection of pigs with PRRSV. The double blocking ELISA enabled the distinction at later stages of infection compared to the IPMA, irrespective of the strain involved.     

鸡传染性法氏囊病病毒SD株毒力测定

从一个免疫失败鸡场中分离到一株鸡传染性法氏囊病病毒野毒株,命名为SD株.经血清学试验、鸡胚接种、病毒形态观察等证实了分离物为鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV).测定病毒效价ELD50达到10-6.5/0.2 mL;动物回归试验表明,该SD株接种4周龄鸡后引起鸡群发病率为100%,病死率达85%,剖检可见法氏囊呈"紫葡萄样...