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同时检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒和伪狂犬病毒连接酶检测反应-PCR基因芯片检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为快速、灵敏、准确地同时检测和鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)和伪狂犬病毒(PRV)的方法,本研究采用连接酶检测反应(LDR)-PCR和基因芯片技术建立一种新型检测方法.首先在3种病毒的保守区内分别设计一对LDR探针,两端各连接一段通用序列,依次进行LDR、通用引物荧光标记扩增和芯片杂交,同时比较引物标记和Cy5 -dCTP标记方法的灵敏度.结果表明该方法可以特异地检测PCV2、PPV和PRV3种病毒,而对牛病毒性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪瘟病毒、乙型脑炎病毒、猪圆环病毒1型检测结果均为阴性;对3种病毒的最低检测限少于10个拷贝;Cy5-dCTP标记检测的灵敏度显著高于引物标记.利用建立的方法对41例临床样品进行检测,与普通PCR检测结果符合率为97.6%~100%.该方法的建立为基础研究和临床应用提供了技术平台. 相似文献
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经除草剂处理的水稻对褐飞虱体内几种酶及水稻受褐飞虱为害程度的影响 总被引:5,自引:1,他引:5
褐飞虱5龄若虫在不同除草剂不同剂量处理的水稻上短期取食(取食1 h)和长期取食(3龄若虫取食至5龄,约7 d),然后测定其体内代谢酶、保护酶的变化。褐飞虱取食除草剂处理的水稻后其体内羧酸酯酶活性不论是短期取食还是长期取食均极显著高于对照(未施用除草剂);乙酰胆碱酯酶活性明显高于对照;稻乐思、苯达松低剂量、丁草胺高剂量处理短期取食后超氧化物歧化酶活性显著低于对照,所有处理长期取食明显高于对照;过氧化物酶活性除了稻乐思300 mL/hm2和苯达松1500 mL/hm2处理短期取食低于对照外(但没有达显著差异),也不同程度地高于对照。褐飞虱在除草剂处理的水稻上蜜露排泄量显著增加,水稻受害程度与对照相比极显著加重。除草剂处理后的水稻游离氨基酸的含量增加而蔗糖含量下降,由此表明除草剂施用后对水稻和褐飞虱具有双向效应 相似文献
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鸡新城疫病毒F基因和鸡IL—2重组DNA疫苗的构建 总被引:40,自引:0,他引:40
利用已克隆到的新城疫D26株F基因和鸡IL-2基因,经过载体改建,将他们共同克隆于真核表达质粒pCDNA3上,经酶切分析、PCR鉴定证实成功构建了共表达鸡新城疫病毒F基因和鸡IL-2的重组质粒,为探讨禽类重组基因疫苗的构建及鸡IL-2在基因疫苗中的作用奠定了基础。 相似文献
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本研究以新城疫病毒 F 基因的c D N A 与真核表达载体pc D N A3 重组,构建了新城疫病毒 F基因疫苗。采用不同剂量接种 S P F鸡后,通过抗体监测和强毒攻击试验,分析了其诱导的体液免疫应答及免疫保护作用。结果表明,接种剂量为100μg、200 μg 时,试验鸡在免疫后第 2 周出现较明显的抗体反应,接种剂量为 10 μg 时抗体变化不明显。以标准强毒 F48 E9 攻击后,空白对照组及接种剂量为10 μg 和100 μg 组的鸡只全部发病死亡,未获得免疫保护;而200 μg 组鸡只全部存活,获得完全免疫保护。表明基因免疫效果与接种的剂量有密切的关系。 相似文献
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成疫病毒F基因疫苗接种剂量的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以新城疫病毒F基因的cDNA与真核表达载体pcDNA3重组,构建了新城疫病毒F基因疫茵。采用不同剂量接种SPF鸡后,通过抗体监测和强毒攻击试验,分析了其诱导的体液免疫应答及免疫保护作用。结果表明,接种剂量为100,200ug时,试验鸡在免疫后第2周出现较明显的抗体反应,接种剂量为10ug时抗体变经不明显。以标准强毒F48E9攻击后,空白对照组及接种剂量为10,100ug组的鸡只全部发病死亡,未获得 相似文献
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应用ELISA双抗体夹心法检测\猪细小病毒抗原的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
研究建立了从胎猪脏器中检测猪细小病毒(PPV)抗原的ELISA双抗体夹心法。试验方法的最侍工作条件为,抗体浓度1:400,酶标抗体浓度1:50。54份胎猪样品阳性检出率为59.3%,不同脏器的阳性检 出率分别为,心36.4%、肝脏72.2%、肺脏66.7%、肾脏66.7%。 相似文献