基于网络药理学探讨黄芩素对猪丁型冠状病毒感染的潜在作用机制

本研究旨在探讨黄芩素抗猪丁型冠状病毒（porcine deltacoronavirus,PDCoV）感染的作用机制。通过Pharmmapper、Pubchem、STITCH、TCMSP和Swiss Targer Prediction数据库获得黄芩素的作用靶点。根据前期蛋白组学结果获得PDCoV感染的相关靶点,获取黄芩素与PDCoV感染的共同靶点,并利用STRING数据库和Cytoscape 3.8.2软件构建“药物-疾病-靶点”网络和靶蛋白相互作用网络,利用CytoNCA插件进行网络拓扑分析和核心网络构建,使用Metascape数据库对核心网络基因进行GO和KEGG分析。通过细胞试验对富集得到的信号通路下游基因表达水平进行检测。通过筛选,共获得黄芩素的潜在靶基因268个,黄芩素-PDCoV的共同靶点75个,GO富集结果表明黄芩素主要参与细胞周期、细胞膜筏形成、线粒体膜形成、纺锤体形成和MAPK信号级联传导过程;KEGG富集筛选得到277条信号通路（P<0.01）,主要涉及PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路和MAPK信号通路等。细胞试验结果表明,与正常细胞对照组相对,病毒感染后PI3K、AKT、NF-κB mRNA表达显著升高;与病毒感染组相比,黄芩素处理组PI3K、AKT、NF-κB mRNA的表达显著降低（P<0.05）。黄芩素对PDCoV感染的作用具有多靶点、多通路的特点,可能是通过作用于AKT1、HSP90AA1、SRC、EGFR、CASP3、MAPK、STAT3等核心基因调控PI3K-Akt、Ras和MAPK信号通路、细胞凋亡、病毒感染等通路发挥作用,可以作为抗PDCoV感染的潜在治疗药物进一步研究。     

RNA干扰及其植物抗病毒应用

【研究目的】RNA干扰(RNA interference,RNAi)是分子生物学研究领域的一项新兴技术,在动植物的遗传改良、功能基因组、基因治疗等研究中广泛应用;【方法】它是指一些小的双链RNA分子介导的、序列特异的转录后基因沉默现象;【结果】本文就RNA干扰的作用机制、RNA干扰与植物病毒间的互作以及RNA干扰表达载体构建的一些研究进展进行了综述;【结论】随着RNAi研究的进一步深入,RNAi必将成为遗传育种工作者培育抗病毒植物的有力手段,促进植物抗病育种的发展。     

VA系统诱导烟草对TMV抗性与细胞内防御酶系统的关系

枯斑三生烟(Nicotiana tabacum L.“Samsum”NN)经植物源抗病毒剂VA诱导处理后第7天(清水处理作对照)，在其长出的新叶上接种烟草花叶病毒(TMV)。结果表明，VA可以诱导枯斑三生烟对TMV产生系统抗性，其枯斑抑制率可达57．25％，枯斑出现时间推迟10h。超氧物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POX)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)3种酶的活性均比对照明显提高，其中48h时增加幅度最大；VA处理使枯斑三生烟叶片内的丙二醛(MDA)含量降低，其中接种48h时降低幅度最大。此外，在接种TMV后的12h内，清水对照的枯斑三生烟新叶中POX和SOD活性呈下降趋势，PAL活性几乎无变化，随后呈上升趋势，而经VA处理的枯斑三生烟新叶中的POX、SOD和PAL，活性自接种后，一直呈上升趋势，且上升幅度也高于对照；MDA含量的变化与3种酶活性的变化呈相反趋势。     

In vitro studies on feline panleucopaenia virus. Standardisation of haemagglutination-inhibition test for feline panleucopaenia virus antibody

Standardised procedure for obtaining reproducible haemagglutination-inhibition results for FPV antibody which correlate with serum-neutralization titres was described. Optimal conditions were found to be Alsevers anticoagulant, PBS/0.05% BSA (pH 6.8) as buffer, especially washed round bottom microplates, determination of maximally sensitive porcine erythrocytes, use of reproducible erythrocyte concentrations, inactivation of serum samples at 56 degrees C for 30 min and serum treatment with koalin pH 9.0. The concentration of erythrocyte used for estimation of haemagglutination units in H1 test should not differ from that used as indicator in the test. Predilution of serum beyond 1:4 associated with false results. Reproducible method for removing natural agglutinins in serum by adsorption with erythrocytes was described.     

噬菌体肽库技术筛选抗PRRSV肽及其应用

噬菌体展示肽库是一种被广泛用于抗原表位鉴定,结合蛋白筛选的技术。该试验利用噬菌体展示技术筛选与猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒（PRRSV）ORF1B复制酶蛋白相互作用的蛋白,并进一步验证筛选蛋白的抗病毒作用。以表达纯化的PRRSV ORF1B蛋白CTD包被高亲和性96孔板作为靶蛋白,应用T7噬菌体展示技术对随机12肽库cDNA文库进行筛选,并分析测序筛选的克隆。将筛选出的克隆序列合成后,在体外验证合成多肽的抗PRRSV效果。结果表明,在4轮的噬菌体筛选后,共得到87个阳性克隆,经测序鉴定出11个筛选的12肽,并通过体外抗病毒试验得到P10是一个具有高抗病毒活性的12肽。试验结果为PRRSV的抗病毒研究奠定了基础。     

现代分子生物学技术在植物抗病毒育种中的作用

概述了近年来利用分子生物学技术进行抗病毒育种的几种主要方法及其研究进展 ,主要内容有外壳蛋白介导的抗性、利用缺损的复制酶、干扰运动蛋白、RNA介导的抗性、卫星RNA介导的抗性、反义RNA介导的抗性、中和抗体基因等     

一类计算机病毒传播模型的数学分析

根据计算机病毒传播的生物学特征和用户行为特征,建立了一类基于SEIR传播模式的计算机病毒传播模型.对系统平衡点进行稳定性分析和数值模拟,结果表明病毒防护措施的实施是控制计算机病毒传播的关键.     

人参皂苷抗鸡新城疫病毒的试验研究

为探讨人参皂苷抗鸡新城疫病毒的作用机理,试验用鸡新城疫病毒人工感染雏鸡,采取人参皂苷口服,观察试验鸡只的临床症状及体重变化,测定血清抗体效价的变化情况。结果表明,人参皂苷组可以明显推迟人工感染鸡新城疫病毒(NDV)雏鸡的发病日龄,缩短病鸡的发病过程。试验鸡饲喂人参皂苷后可明显降低发病率和死亡率并促进抗体的产生。说明人参皂苷可以降低病毒对组织的损害程度,增强雏鸡对新城疫病毒的抵抗力。     

干扰素研究进展

干扰素是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等活性的细胞因子,能通过多种机制影响肿瘤细胞功能,促进免疫细胞的活性。干扰素是一个大的基因家族,可分为3型,主要包括IFN-α、IFN-β和IFN-γ等。基因工程干扰素已广泛地应用于病毒和肿瘤性疾病的临床治疗,取得了明显疗效。科研工作者在研究其作用机理及治疗效果外,也在不断探索基因工程干扰素在临床应用方面的新途径,改善和提高临床治疗效果。     

抗病毒合剂的抗炎作用研究

抗病毒合剂由具有抗病毒、清热、滋阴凉血等作用的中草药经水煎醇沉、浓缩制备而成 ,以小鼠为试验动物模型 ,选择不同剂量 (0 .3ml、0 .5 ml、0 .8m l)研究了该合剂的抗炎作用。结果 :0 .5 m l和 0 .8m l剂量对小鼠腹腔毛细血管通透性、小鼠皮肤毛细血管通透性、二甲苯所致小鼠耳壳肿胀及小鼠棉球肉芽肿均有极显著的抑制作用 (P<0 .0 1) ,0 .3m l剂量对前三个试验小鼠也有显著的抑制作用 (P<0 .0 5 )。结论 :该合剂有很强的抗炎作用 ,而且与剂量呈正相关性。