南京地区葡萄避雨栽培“H”形整形及根域限制栽培技术

2007年南京市首先在江宁区引进了"H"形整形及根域限制栽培技术,后在全市最大的葡萄生产基地——浦口区盘城街道落桥社区进行示范推广,进一步规范完善其配套的栽培技术.在避雨栽培条件下采用"H"型整形及根域限制栽培技术,控根池外种植草坪,具有省肥、节水、易改善土质、修剪简便、果实品质优、标准化程度高、干净美观,适宜观光采摘等优点,在城市郊区旅游观光基地效益十分显著[1],避雨控根栽培的示范园成为该地葡萄节期间旅游的亮点.现综合4年的生产实践情况,将主要技术总结如下.     

葡萄LEAFY基因启动子的克隆与序列分析

为探明葡萄LEAFY基因的表达调控规律,应用PCR技术从藤稔葡萄中克隆了1个长1 833 bp的DNA片段,该序列含有2个内含子区域,编码402个氨基酸,与葡萄LEAFY同源基因VFL有99%的同源性.应用基因组步移法克隆了LEAFY基因的5′侧翼序列925 bp,拼接后的LEAFY基因及启动子序列共2 692 bp(GenBank登录号EF222286).用PLACE、PlantCARE在线启动子预测工具分析表明:该序列含有启动子的特定结构,如TATA-box,CAAT-box等,另外含有一些顺式作用元件如MYB结合位点、ABA响应元件、光响应元件和一些其他的调控序列,说明葡萄LEAFY基因的表达可能受MYB、ABA和光等的调控.用FootPrinter在线工具对葡萄与拟南芥等其他4种植物的LEAFY同源基因启动子进行比较,发现不同植物的启动子既有保守性,又有多样性,转录因子结合位点的分布相似,但也有区别,暗示了LEAFY基因表达调控的精确性或多样性.     

葡萄砧木99R再生体系的建立

以99R葡萄无菌苗叶片、叶柄和茎段为外植体诱导不定芽再生,在MS培养基中附加不同浓度的6-BA与IBA、TDZ与IBA、6-BA与2,4-D组合。结果表明,叶片和叶柄较适宜的再生培养基为MS 5.0 mg/LBA 0.1 mg/L IBA,再生率分别为40.54%和50.00%,茎段适宜培养基为MS 2.0 mg/L BA 0.02 mg/L IBA,再生率达62.50%;一定时间的暗培养处理利于99R葡萄不定芽再生,3周为最适暗培养时间;不同节位外植体不定芽再生率随叶片节位下降而降低;卡那霉素浓度>3.0 mg/L时显著抑制叶片不定芽的发生,头孢霉素浓度<300 mg/L对叶片再生不定芽影响很小。     

设施栽培中限根对油桃幼树叶片叶绿素含量、叶干重变化的影响

研究了设施栽培中限根对沪油018幼树叶片叶绿素含量、叶片干重的变化特点。结果表明:(1)限根幼树在秋季枝条停长后,不同限根处理第1～8叶位叶片叶绿素含量均表现为“升—降—升”;相同叶位处理TR2各个叶位单位叶面积叶绿素含量均低于CK和TR1,CK仅在第1、8叶位较TR1高,而其它叶位均低于TR1。(2)测定盛花后19～262d树冠外围枝中部完全展开功能叶的叶绿素变化动态,结果不同限根处理Chla、总叶绿素含量与Chl(a/b)的变化均表现“降—升—降”的变化规律。限根对Chlb的季节变化进程的影响差异明显。(3)不同限根处理下比叶重的季节变化差异明显,但总的呈上升趋势。叶片干重含水量%的季节变化总的呈下降趋势,不同限根处理间的变化动态差异明显。     

组织培养条件下苹果Ty1-copia类逆转座子的转录活性(英文)

研究了苹果基因组中Ty1-copia类逆转座子的转录活性、多样性及其甲基化水平。在培养基MS+2,4-D2mg/L+BA0.2mg/L+NAA0.5mg/L上诱导了1个月的愈伤组织中用RT-PCR方法检测到了270bp的目的条带,而对照、继代组培苗和不含2,4-D的愈伤中均没有目的条带的扩增,说明一定浓度的2,4-D可以诱导苹果中Ty1-copia类逆转座子的表达活性。将目的条带回收、克隆和测序后进行分析:所克隆的21条序列虽都为Ty1-copia类逆转座子逆转录酶保守序列,但存在很大的异质性,21个克隆的核甘酸序列变化范围为196-290bp;翻译成氨基酸后存在缺失、插入、移框和终止密码子突变,7个克隆在氨基酸保守序列‘SLYGLKQ’处有1-2氨基酸位点的突变,说明这些序列对应的逆转录酶多数可能已失去了其原有功能。将21条序列进行聚类分析,除ART20外,其它克隆可聚为3类,并分别与GenBank上某些物种的相应序列同源性很高,表明在不同物种间可能存在逆转座子的横向传递作用。甲基化试验表明苹果基因组内Ty1-copia类逆转座子甲基化水平高。这些都表明Ty1-copia类逆转座子对苹果基因型的多样性及基因组的进化具有重要意义。     

康拜尔早生葡萄未熟种子内源GAs的抽提及活性GAs组成的分析

用高效液相色谱（ODS－HPLC）对康拜尔早生葡萄未熟种子提取液分离成33段（No．1～33）每段用矮生稻测定内源GAs的活性含量。测定表明，具有活性的GAs主要在No．14～15段（A区）、No．18～19（B区）、No．23～25段（C区）和No．26～27段（D区），分别含有相当于GA_3活性量，0．46、0．33、1．00、10．39 μg／kg FW。对D区用GC－MS全扫描质谱鉴别出，D区内的GAS主要成分为GA4、3epi－GA4、GA4－15－ene、GA7、GA7－15－ene和GA_34，并没发现GA_3的存在。     

葡萄MADS-box家族基因保守片段的克隆与序列分析

MADS-box转录因子在多种植物的发育过程特别是花器官和果实发育过程中发挥重要的作用。为了从葡萄中克隆出新的MADS-box基因,研究在葡萄花及果实发育中的作用,根据多种植物MADS-box基因保守区序列,设计简并引物,应用RT-PCR技术从红富士葡萄花序中分离出34条MADS-box基因cDNA片段。序列分析表明,这些片段长度在138～152bp之间,包含基因起始密码子。推导的氨基酸序列与已登录的欧洲葡萄及其它物种的MADS-box基因同源性超过83%。用推导的氨基酸序列与已知的欧洲葡萄和拟南芥MADS-box家族基因进行系统发育分析,可将这些基因片段分别归入拟南芥MADS-box基因不同亚家族中,证明葡萄中存在多种MADS-box家族基因,克隆的片段包含ABCDE模型中的各类花发育基因。     

推荐几个优良葡萄品种

我省曾有几次葡萄大发展时期,但因高温多湿的气候条件,绝大部分品质优良的欧亚种葡萄都不适应,表现不抗病、产量低、品质差。由于品种选择不当和栽培措施未跟上,使葡萄生产出现了几起几落。 随着农村产业结构的调整,葡萄生产又出现了发展的趋势。近年来,苏南及南京地区葡萄栽培面积逐年扩大,仅南京市近二年新栽葡萄就达2000余亩。主要的品种为巨峰和白香蕉,巨峰栽培面积已占葡萄总面积的50％以上。巨峰为欧美杂种,果粒大而诱人,对高温多湿较能适应,缺点是果刷较短,运输途中易脱粒。但从生产角度来看,品种过于单一,     

GA3与GA4＋7及CPPU对巨峰葡萄果实发育的影响

GA3与GA4 7采用2种不同浓度，在花前10d、1d和盛花期对巨峰(Kyoho)葡萄进行无核处理，花后10d用GA，和CPPU以三种浓度组配进行膨大处理。各处理都使巨峰葡萄的无核率大幅度提高。GA3处理比GA4 7处理更有利于巨峰葡萄产生无核果。在GA3的处理中花前1d处理对其产生的无核效应明显大于花前10d和盛花期的处理，以花前1dGA，12．5mgL^-1 盛花后10dGA3 12．5mgL^-1效果最好，其无核率可达90．91％。GA4 7对提高巨峰葡萄的座果效果比较显著，以花前1dGA，25mgL^-1 盛花期GA325mgL^-1 CPPU20mgL^-1效果比较好，座果为对照的123．1％。在巨峰葡萄上，用GA3进行处理的果实有变长的趋势；而用GA4 7进行处理的则有果实变圆的趋势。膨大处理时，配施CPPU比单用GA3效果要好。