蓝靛果组培苗生根以及炼苗移栽的研究

为了提高蓝靛果组培苗商品化生产效率,以蓝靛果组培苗为试材,研究了不同因素对蓝靛果组培苗瓶内、外生根的影响以及适合其移栽的基质组合。结果表明:适合蓝靛果瓶内生根的培养基为改良MS+IBA1.0 mg·L-1,生根率可达100%。在瓶外生根实验中,高浓度速蘸法IBA浓度为2 000 mg·L-1、处理时间10 s时,生根率可达83.33%,存活率可达93.33%,低浓度浸泡法IBA浓度为250 mg·L-1、处理时间5 min时,生根率可达86.67%,存活率可达93.33%。移栽基质最佳组合为腐殖土︰珍珠岩=1︰1,在此基质中移栽30 d后瓶内、外生根苗的成活率分别为90.22%和86.67%。瓶外生根可替代瓶内生根,能在商品化生产上节省时间和成本。     

钼蓝比色法测定笃斯越橘成熟果实中还原型抗坏血酸含量及体系优化

以笃斯越橘(Vaccinium uliginosum)成熟果实为试材,以钼蓝比色法测定笃斯越橘果实还原型抗坏血酸(Reduced ascorbic acid,As A)含量进行条件优化。结果表明,3%偏磷酸-乙酸用量为100μL、5%硫酸和5%钼酸铵用量均为200μL、以去离子水补充至1 500μL,30℃干热恒温浴显色40 min,取出室温下放置1 h后,在700 nm下测定,所得数据稳定,准确性适合用于笃斯越橘果实As A含量的测定;测得含量为(40.20±6.23)mg/100 g FW。     

山葡萄“左优红”离体器官再生不定芽的研究

以＂左优红＂山葡萄继代试管苗的叶片、叶柄、茎段为试材,进行了器官再生不定芽的研究,以期建立山葡萄‘左优红’离体再生体系,进一步为遗传转化操作奠定基础。结果表明：在MS培养基上附加6-BA2.0 mg/L＋IBA0.05 mg/L,暗培养21 d最适合山葡萄组培苗诱导及分化;不同离体器官中,叶片没有再生出不定芽,茎段、叶柄均再生出不定芽,再生频率分别为10.6%和1.5%。     

长白山牛皮杜鹃组培苗与野生苗药用成分含量分析

采用HPLC法与紫外分光光度法分别测定了长白山牛皮杜鹃组培苗与野生苗中主要药用成分芦丁与单宁酸的含量。结果表明,芦丁在野生苗两年生老叶中含量最高,为2.54mg/g,野生苗嫩叶含量为1.68mg/g,愈伤组织含量为0.16mg/g,组培苗含量为0.08mg/g,组培叶含量为0.03mg/g,根中未检测到芦丁成分。单宁酸在野生苗老叶中含量最高,为91.54mg/g,野生苗嫩叶含量为45.87mg/g,野生苗根中为24.58mg/g,愈伤组织中含量为13.51mg/g,组培苗中含量为10.32mg/g,组培叶中含量为17.46mg/g。野生苗中芦丁与单宁酸含量均高于组培苗。     

葡萄LEAFY基因启动子的克隆与序列分析

为探明葡萄LEAFY基因的表达调控规律,应用PCR技术从藤稔葡萄中克隆了1个长1 833 bp的DNA片段,该序列含有2个内含子区域,编码402个氨基酸,与葡萄LEAFY同源基因VFL有99%的同源性.应用基因组步移法克隆了LEAFY基因的5′侧翼序列925 bp,拼接后的LEAFY基因及启动子序列共2 692 bp(GenBank登录号EF222286).用PLACE、PlantCARE在线启动子预测工具分析表明:该序列含有启动子的特定结构,如TATA-box,CAAT-box等,另外含有一些顺式作用元件如MYB结合位点、ABA响应元件、光响应元件和一些其他的调控序列,说明葡萄LEAFY基因的表达可能受MYB、ABA和光等的调控.用FootPrinter在线工具对葡萄与拟南芥等其他4种植物的LEAFY同源基因启动子进行比较,发现不同植物的启动子既有保守性,又有多样性,转录因子结合位点的分布相似,但也有区别,暗示了LEAFY基因表达调控的精确性或多样性.     

桃品种种质资源的RAPD分析

用筛选的20个随机引物对42个桃品种（种）进行RAPD扩增，用扩增产生的107条多态性带计算样品间的遗传距离，UPGMA法聚类分析，在遗传距离0．14处可将供试样品划分为四类，认为RAPD标记可用于分析桃种质资源间亲缘关系。在遗传距离0．11处可将水蜜桃、黄肉桃、油桃明显区分开，但存在一定交叉现象，若以肉质类型划分桃品种，还应考虑桃品种的遗传背景。供试样品中珲春桃是优先保存的种质，其次是Fireprince、上海水蜜桃等。根据聚类分析结果和遗传距离，认为珲春桃不是桃和山桃的杂交后代，应为桃的一个变种。     

葡萄MADS-box家族基因保守片段的克隆与序列分析

MADS-box转录因子在多种植物的发育过程特别是花器官和果实发育过程中发挥重要的作用。为了从葡萄中克隆出新的MADS-box基因,研究在葡萄花及果实发育中的作用,根据多种植物MADS-box基因保守区序列,设计简并引物,应用RT-PCR技术从红富士葡萄花序中分离出34条MADS-box基因cDNA片段。序列分析表明,这些片段长度在138～152bp之间,包含基因起始密码子。推导的氨基酸序列与已登录的欧洲葡萄及其它物种的MADS-box基因同源性超过83%。用推导的氨基酸序列与已知的欧洲葡萄和拟南芥MADS-box家族基因进行系统发育分析,可将这些基因片段分别归入拟南芥MADS-box基因不同亚家族中,证明葡萄中存在多种MADS-box家族基因,克隆的片段包含ABCDE模型中的各类花发育基因。     

生长调节物质对梨极矮化突变体生长的影响

以3年生极矮化突变体及嫁接当年幼苗为试材,分别用生长调节物质GA3、BR、IAA、PP333处理极矮化种质,比较其生长情况,分析极矮化突变体对生长调节物质的敏感性。结果表明,外源PP333处理显著抑制梨极矮化突变体的生长,即极矮化种质对外源PP333敏感,外源GA处理在总的生长量上与对照没有差异,但阶段性生长量上表现出显著差异,表明对外源GA敏感,可能属于GA缺陷型。     

大果黑果枸杞组培快繁技术体系研究

[目的]该研究旨在建立大果黑果枸杞组培快繁技术体系。[方法]以大果黑果枸杞嫩茎作为外植体,以 MS为基本培养基,研究了不同因素对大果黑果枸杞组培苗初代、继代以及生根培养的影响。[结果]适合大果黑果枸杞初代培养的培养基配方为 MS+ZT 0.2 mg/L+IBA 0.01 mg/L,在此培养基上,腋芽的生长状况良好,萌芽率高达88.73%,且玻璃化的情况很少;同样, ZT对组培苗增殖培养的效果要优于6-BA,适合组培苗增殖培养的培养基配方为MS+ZT 0.15 mg/L+ IBA 0.01 mg/L,在此培养基上,组培苗的生长速度快,其增殖倍数可达5.83倍,组培苗基本没有玻璃化现象,且苗生长健壮;适合组培苗生根的培养基为 MS+IBA1.0 mg/L,生根率可达100%。[结论]适合大果黑果枸杞组培苗炼苗移栽的基质配比为腐殖土∶珍珠岩=1∶1,在此基质中培养的苗木均长势良好,成活率高达92.37%。[结论]该研究为大果黑果枸杞的规模化生产及推广提供理论依据。     

百合试管苗快速繁殖技术的研究

对百合鳞片进行了试管快速繁殖研究．结果表明：外植体取样部位影响百合小鳞茎的增殖率,幼嫩的基部增殖率高,而外部、顶部细胞老化的鳞片增殖率低．百合小鳞茎的形成主要靠不定芽的形成．