猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法的建立及其初步应用

建立了检测CSFV的快速、敏感、特异的RT-PCR ELISA方法。在RT-PCR过程中以地高辛标记的dUTP(DIG-dUTP)标记PCR产物．用生物素标记的捕获探针在链亲和素包被微量板孔中杂交捕获PCR产物。该方法的敏感性较常规RT-PCR方法高100倍，可检测出350μL1：100(相当于3．5mg)的兔脾组织悬液中的C株CSFV，特异性强，避免了PCR过程中因污染导致的假阳性结果。通过对RT—PCR和微量杂交系统的条件优化，该方法用于检测C株兔脾组织毒、细胞适应毒和野毒感染的猪组织毒样品，效果良好。     

一例规模猪场猪伪狂犬病净化及效益评估

随着非洲猪瘟病毒进入我国，给生猪养殖带来极大危害，各生猪养殖企业为应对非洲猪瘟病毒的侵入，生物安全防护措施上了一个台阶。同时也给企业防控其他疫病提供了好的基础。2020年滨海县一规模猪场（公司）在成功创建了国家级无非洲猪瘟疫病小区后，2021年又对该场猪伪狂犬病进行了净化，取得明显成效。现将该猪场对猪伪狂犬病净化工作做法及效益评估介绍如下。     

口蹄疫OX株全基因组cDNA的分子克隆、序列测定及分析

采用RT-PCR法对FMDV OX株基因组全序列进行了分子克隆与测序。结果表明不含poly(C)序列和poly(A)尾巴的OX株基因组全序列长8104nt,开放读码框(ORF)长6969nt、编码2322aa,5’UTR长1040nt,3’UTR长95nt。应用分子生物学软件将OX株与FMDV其它参考毒株进行序列比较,并对其基因特征进行分析。结果显示,OX株与OTwyl／97的核苷酸同源性最高,在基因组功能未知区和3A编码区具有两处明显的缺失现象,其一是在3A编码区有30nt的连续缺失,这与OTwyl／97株相同,其二是在功能未知区域有44nt的缺失,这与OTwyl／97株相同,与OAkesu58相似(43nt缺失)。     

我国近期猪瘟分子流行病学动态

利用反转录聚合酶链式反应 (RT PCR)及测序技术 ,测定 2 0 0 2年分离于我国甘肃、湖南、海南、青海等省的 9株猪瘟野毒的E2基因序列 ,并与C 株疫苗毒进行同源性比较 ,绘制CSFV系统发生树。结果表明 ,近期分离于我国的 9株野毒与C 株核苷酸序列间的同源性在80 .7%～ 99.1 %,氨基酸同源性在 89.3%～98.9%。9株野毒分属于 2个不同的组群 ,其中 5株与我国经典的石门强毒和C 株疫苗毒同属于Subgroups1 .1 ,另 4株属于与C 株有较大差异的Subgroup2 .1。