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鸭MHC I 轻链 cDNA克隆及其蛋白的二级结构 总被引:2,自引:0,他引:2
为了阐明鸭主要组织相容性复合体 I 结构并推进其功能研究,本文采用Full RACE PCR法从其淋巴细胞cDNA文库中克隆了鸭MHC I 轻链 (b2m) cDNA. 随后,在pMAL-p2X/E.coli TB1原核表达系中可溶性表达了其成熟肽蛋白基因,并进行了纯化、蛋白酶切和Western Blot鉴定. 最后,测定了融合蛋白和MBP单体的圆二色谱(CD)值. 鸭b2m cDNA长792 bp,包含18 bp 5’端和414bp 3’端非翻译区. 其ORF为119个氨基酸 (aa),包含20个aa信号肽和99 aa成熟肽。成熟肽序列的第25位和80位为半胱氨酸(C),第80位半胱氨酸附近序列为“YTCRVDH”,与免疫球蛋白超基因家族的特征基序 “F/YCXV/AXH”相符.氨基酸序列与鸡、鱼、蛙、人和鼠β2m比较,同源性在30.3%-65.9%之间. CD测定结果表明鸭b2m α螺旋、β折叠、转角、随机卷曲分别为0 aa、50 aa、23 aa 和26 aa,呈典型的β折叠。同源模建也显示鸭b2m 三级结构(3D)由7个β片层折叠而成,不含α螺旋,这与CD测定结果相符合,并与人和小鼠b2m 3D结构相似. 相似文献
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河南小麦生产农业气象灾害风险分析及区划 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究通过对河南省小麦生产和农业气象灾害资料进行分析,研究河南小麦生产农业气象灾害风险因素,并对其进行区划,旨在为在农业气象灾害下该省的小麦生产提供指导,增强该省小麦生产过程中防灾减灾的能力,促进小麦的稳产和高产. 相似文献
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脂肪细胞膜免疫对动物体脂含量的调控 总被引:1,自引:0,他引:1
降低动物体内脂肪含量,改善畜产品质量一直是动物研究人员研究的重点。近年发展起来的脂肪细胞膜免疫为降低动物体脂含量提供了一种安全而有效的方法。本文简要介绍了脂肪细胞膜免疫的两种免疫方法,并对其发展前景进行了展望。 相似文献
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本研究拟初步了解中原地区近期猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况。对2011—2012年间从河南及周边省份发病猪场分离的8株PRRSV毒株Nsp2基因变异区进行RT-PCR扩增,同时对主要结构蛋白GP5基因进行克隆测序并与GenBank中登录的中国历年来流行的PRRSV代表毒株的GP5蛋白序列进行遗传进化分析,对主要氨基酸基序进行比对分析。结果表明,2011—2012年在中原地区分离的8株PRRSV分离株均为Nsp2缺失变异株,GP5基因与2006年中国高致病PRRSV代表毒株JXA1同源性较高。 相似文献
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为了应用免疫层析试纸评价猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果,对50头试验仔猪进行免疫注射,并在首次免疫后28 d及2次免疫后20 d采血,通过试纸定量测定结果来监测试验猪抗体水平变化,同时对比猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒的检测结果.结果表明,猪口蹄疫O型合成肽疫苗能快速诱导产生高水平的抗体,首次免疫抗体阳性率达88%,2次免疫抗体阳性率高达100%.试纸定量测定结果表明,2次免疫后猪群免疫抗体水平整体显著提升,并保持在较高水平.与ELISA试剂盒比较二者具有相同的敏感性和特异性,符合率为100%. 相似文献
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以巴马小型猪为研究材料,克隆SLA-2和β2m基因。然后采用剪接重叠延伸PCR(Splicing overlap exten-tion PCR,SOE PCR)法,将SLA-2的胞外区和β2m的成熟肽部分通过一富含甘氨酸/丝氨酸的Linker(G4S)3连接,形成SLA-2-Linker-β2m。将SLA-2-Linker-β2m在pMAL-p2X系统上表达,其融合表达蛋白分别经过West-ern-blot、纯化及Factor Xa切割,分离纯化单体蛋白。圆二色谱(Circular dichroism spectrum,CD)测定蛋白的二级结构。结果显示,重构表达的复合体融合蛋白MBP-SLA-2-(G4S)3-β2m大小为84.1 ku。切割后去除MBP的单体蛋白大小为41.6 ku。圆二色谱分析单体蛋白和融合蛋白二级结构元件α-螺旋、β-折叠、转角和随机卷曲的符合率分别达到了100%、97.3%、97.1%和97.9%,揭示重构的复合体具有正确的二级结构,可以用于体外多肽结合等研究。 相似文献
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