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[目的]研究蛋白酶提取鱼油的工艺,为鱼油的提取研究提供参考。[方法]利用金枪鱼蒸煮油水混合液为原料,采用胰蛋白酶进行水解,以鱼油提取率为考察指标,采用响应面分析方法研究酶解提取金枪鱼鱼油的最佳工艺条件。[结果]试验得到酶解提取金枪鱼鱼油的最佳工艺条件为:加酶量1.71%、pH 7.94、时间4.22 h、温度44℃,在该条件下制备的鱼油提取率达90.23%。经脱胶、脱酸、脱色及脱臭制得的鱼油符合精制鱼油1级标准,其中DHA和EPA含量分别为27.71%和5.94%。[结论]采用胰蛋白酶对金枪鱼蒸煮油水混合液进行水解提取鱼油具有一定的可行性。 相似文献
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试验旨在构建pET28a-DCpep-GSE原核表达载体,并制备猪链球菌(Streptococcus suis)重组表位蛋白。应用生物信息学方法预测猪链球菌保护性抗原三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、烯醇化酶(Enolase)、DNA核酸酶(SsnA)的跨膜区结构、信号肽、B细胞表位、辅助T细胞(Th细胞)表位及蛋白的二级结构;设计重组蛋白(DCpep-GSE蛋白)的氨基酸序列并分析其理论等电点、亲疏水性等理化性质;构建重组原核表达载体pET28a-DCpep-GSE,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,优化诱导表达条件,His镍柱纯化并检测目的蛋白的细胞毒性和溶血性。结果显示,SsnA蛋白第1-50及1 036-1 059位氨基酸为胞内或跨膜片段,第1-56位氨基酸为信号肽片段,GAPDH和Enolase无跨膜区及信号肽;B细胞和Th细胞表位处于二级结构中的无规则卷曲与β-转角区域,表位抗原性良好;DCpep-GSE蛋白共373个氨基酸,分子质量为45.3 ku,理论等电点(pI)为4.57,平均亲水性(GRAVY)为-0.677,属于酸性亲水性蛋白;质粒双酶切得到5 369 bp的载体条带和1 131 bp的目的条带,PCR扩增产物测序结果与设计序列一致,载体构建正确;以1 mmol/L IPTG于37 ℃诱导6 h蛋白表达量最高,超声破碎后得到可溶性蛋白;试验组蛋白浓度为500 μg/mL时,RAW264.7、PK15和MARC145细胞的相对增殖率分别达到92.3%、99.5%和99.7%,细胞形态与对照组一致,生长旺盛;各样品组的溶血率均<5%。本研究设计了重组蛋白DCpep-GSE,成功地表达和纯化了DCpep-GSE蛋白,并验证了其安全性,为后续猪链球菌病亚单位疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
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为研究支链淀粉与直链淀粉比(支直比)对玉米干物质体外消化率和淀粉消化速率的影响,建立玉米干物质消化率与支直比之间的回归方程。试验通过双波长比色法对来自全国各地的75份玉米样品进行支链淀粉、直链淀粉含量的测定,并从中筛选8份代表性样品(淀粉支直比从小到大依次为2.57、2.78、2.94、3.15、3.32、3.51、3.68、3.93)。用GI20仿生消化仪进行玉米干物质体外消化率和淀粉消化速率的研究。结果表示:淀粉支直比为2.94的样品24 h干物质体外消化率显著高于2.57、2.78、3.15、3.32、3.51、3.68和3.93样品(P<0.05);淀粉支直比为3.15的样品36 h干物质体外消化率显著高于2.57、2.78、2.94、3.32、3.51、3.68和3.93样品(P<0.05)。淀粉支直比分别为3.93,3.51的样品1 h的淀粉消化速率显著高于2.57、2.78、2.94、3.15、3.32和3.68样品(P<0.05);淀粉支直比分别为2.57.3.93的样品2 h的淀粉消化速率显著高于2.78、2.94、3.15、3.32、3.68样品(P<0.05);2.57、3.93和2.78样品3 h的淀粉消化速率显著高于3.32,2.94样品(P<0.05);4 h后8组样品间淀粉消化速率差异均不显著(P>0.05)。研究证明干物质的消化率受支链淀粉/直链淀粉比例的影响,最大消化率的支链淀粉/直链淀粉比例为2.94和3.15,玉米的淀粉含量与淀粉组成影响玉米的消化能值,试验结果为精准利用玉米提供参考。 相似文献
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不同的社会制度、宗教信仰、地理环境和生活方式孕育了不同的传统文化,从而形成了中、西方不同特点、风格的传统体育。通过对中国传统体育和西方体育文化学背景的比较,对21世纪中国传统体育的发展趋向分析,提出了中国传统体育走向世界的若干思考。 相似文献