重组牛α-干扰素的原核表达与纯化

为在大肠杆菌表达系统中高效表达牛α-干扰素(bovine interferon-α,Bo IFN-α),将经密码子优化后的牛α-干扰素成熟蛋白基因合成并克隆到表达载体p Cold II中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得可溶性的表达蛋白。对重组菌表达条件进行优化,结果显示在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9 h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高。重组蛋白经镍柱纯化后的纯度为99.2%,表达量为36 mg/L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg。     

使用灭活疫苗低致病性禽流感

在一个国家或地区广泛使用优质的H9N2灭活疫苗,可明显减少该地区禽流感的暴发次数,降低由禽流感给养禽业带来的经济损失。     

危害我国奶牛业的两大寄生虫病及其防治

改革开放以来，随着我国人民生活水平的不断提高，对牛奶及奶制品的需求量不断增加，有力地促进了我国的奶牛饲养业的发展。对奶牛疫病的有效防制是获得理想经济效益的保证。近年来，奶牛因感染各种寄生虫病而造成巨大损失的情况常见于报端。我们查阅了近10年内大量有关报道，并进行了初步统计，结果表明，当前危害我国奶牛的寄生虫主要为肝片吸虫和焦虫病，现综合报告如下。1奶牛肝片吸虫（Fasciolahepatica）它是奶牛最主要的寄生虫病之一，可引起急性或慢性的肝炎和胆管炎，并发全身性的中毒现象和营养障碍。临床上表现为乳牛产奶量减少…     

鸡球虫病的防制策略

鸡球虫病的防制策略■缪德年樊生超姚惠娟（上海市农科院畜牧所２０１１０６）鸡球虫病广泛分布于世界各地，是目前危害养鸡业的主要疫病之一。从经济观点看，因球虫病发病所致鸡群增重及饲料转化率下降造成的损失比因其所致鸡只死亡造成的损失要大得多。因此，如何控制球...     

成功控制禽球虫病的挑战

艾美尔球虫以宿主特异性的方式感染家畜,是引起球虫病的病原体。艾美尔球虫的控制是必要的。目前主要的控制方法是化学疗法,而用由活野毒株或弱毒虫株制成的疫苗进行免疫预防则呈流行趋势。新一代的亚单位疫苗、活载体疫苗和DNA疫苗正在研究之中,而合适抗原的鉴定是仍需要解决的难题。本文简述了过去和当前控制球虫病的方法,及一种鉴定作为候选疫苗免疫保护性抗原的新方法。     

柔嫩艾美耳球虫与鸡体的相互作用

鸡吞食柔嫩艾美耳球虫卵囊后感染，子孢子穿过绒毛上皮和固有层，进入隐窝上皮细胞，经数次无性生殖和有性生殖，形成裂殖子和配子体。大配子被小配子受精后发育成卵囊，并脱落到粪便中，鸡感染球虫后，鸡体免疫系统抑制球虫的发育有三个时期：子孢子寻找穿透位点时；子孢子在绒毛上皮时；子孢子穿过固有层时。据此，我们研究了抗球虫免疫中诱导和效应阶段的决定因素。结果表明，子孢子在固有层中的穿透诱导了免疫；子孢子是免疫有关的最重要的发育阶段；细胞毒性Ｔ细胞对抑制球虫发育是必需的。     

马立克氏病病毒VP22基因siRNA筛选体系的构建

将马立克氏病病毒（MDV）超强毒株VP22基因插入真核表达载体pEGFP-C1中EGFP基因的下游，构建EGFP-VP22融合基因真核表达载体pEGFP-VP22。将其转染至中国仓鼠卵巢细胞（CHO-k1）中，通过荧光显微镜观察EGFP的表达情况，并用RT-PCR检测VP22基因的表达。检测证实EGFP和VP22在CHO细胞中均得到了有效表达。     

日粮添加碳酸氢钠对蛋鸡肠道菌群多样性的影响

900羽21周龄海兰褐蛋鸡随机分成5组,每组6个重复,每个重复30羽。分别在基础日粮中添加0、0．1％、0．5％、2．5％、5％NaHCO3,持续10周。结果显示,与对照组相比,0．1％组蛋鸡盲肠乳酸菌数量增加,大肠杆菌数量降低,菌群多样性指数提高（P〉0．05）。0．5％组蛋鸡粪便pH值显著提高（P〈0．05）,乳酸菌数量增加,菌群多样性指数提高（P〉0．05）。2．5％、5％组蛋鸡粪便pH值、水分含量极显著高于其他组（P〈0．01）。同时,2．5％、5％组盲肠乳酸杆菌数量降低（P〉0．05或P〈0.05）,大肠杆菌数量增高（P〉0．05或P〈0．05）,5％组菌群多样性指数亦显著降低前3组（P〈0．05）。结果表明,日粮添加NaHCO3超过2．5％,蛋鸡腹泻严重,肠道菌群平衡严重破坏。而当NaHCO3的添加量低于0．5％时,肠道有益菌数量和菌群多样性指数呈增加趋势,蛋鸡生产性能维持正常。因此,本试验提示蛋鸡生产中饲料添加剂NaHCO3最高耐受量为0．5％。     

法氏囊活性肽对新城疫La Sota株弱毒疫苗的免疫增强效果

将7日龄黄羽肉鸡300只均分为对照、常规疫苗剂量配合法氏囊活性肽、常规疫苗剂量减半配合法氏囊活性肽、生理盐水和法氏囊活性肽5组,通过血凝抑制试验测定血清抗体水平和间接ELISA检测鼻腔冲洗液中IgA水平及计算法氏囊指数等试验方法,研究法氏囊活性肽和新城疫La Sota弱毒疫苗配合应用的免疫效果。结果显示,29日龄后,常规免疫剂量配合法氏囊活性肽组的法氏囊指数、血清抗体滴度和IgA水平显著高于对照组(P<0.05),而常规剂量减半配合法氏囊活性肽组与对照组在法氏囊指数、血清抗体滴度和IgA水平上差异不显著(P>0.05);说明法氏囊活性肽对疫苗有免疫增强作用,疫苗剂量减半配合法氏囊活性肽应用可达到常规疫苗免疫效果。     

单核细胞增生李斯特菌SigB蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

为制备单核细胞增生李斯特菌SigB蛋白及其多克隆抗体,采用PCR方法扩增参考菌株10403S的sigB基因片段,并克隆至原核表达载体pET-30a构建重组质粒,测序验证后转化至大肠杆菌Rosseta(DE3)感受态细胞进行原核表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化SigB蛋白,通过免疫兔体获得多克隆抗体.结果表明:成功构建...