猪瘟病毒E2基因自杀性DNA疫苗的构建及动物免疫试验

从含有猪瘟病毒(CSFV)Shimen株E2全长基因的重组质粒pMD18-T-E2上扩增得到带有BamHⅠ酶切位点的E2基因片段,构建重组克隆质粒pMD19-T-E2.用BamH Ⅰ酶切pMD19-T-E2和"自杀性"DNA疫苗表达载体pSCA1,构建"自杀性"DNA疫苗重组质粒pSCA1-E2.对目的基因E2的大小、插入位置、方向和读码框经PCR、酶切和序列测定进行鉴定.用纯化的阳性质粒pSCA1-E2转染PK-15细胞,转染后48 h荧光抗体法检测E2蛋白的表达;纯化的pSCA1-E2质粒分别免疫小鼠(10 μg/只)和试验猪(600μg/头),二免后分别检测小鼠脾淋巴细胞刺激指数和猪血清抗猪瘟特异性抗体水平.结果表明,构建的重组质粒中E2基因的大小、插入位置、方向和读码框均正确,获得了重组表达质粒pSCA1-E2;转染后48 h可检测到转染的PK-15细胞中E2蛋白的表达.免疫小鼠产生较高水平的淋巴细胞刺激指数,免疫猪可检测到抗CSFV特异性血清抗体;表明构建的pSCA1-E2重组质粒能激发实验动物的免疫反应.     

危害杨树的杨枯叶蛾生物学特性观察

杨枯叶蛾是大型食叶蛾类,专以危害杨树的叶片为主,近年该虫对杨树的危害有所加重.特别是在大凌河流域朝阳段沿河边的杨树林内,也是笔者第一次详细进行室外观察.文章详细描述危害杨树的杨枯叶蛾生物学特性及其特征.     

朝阳地区文冠果栽培技术

文章详细介绍了适合朝阳地区的文冠果栽培技术,包括繁殖方法、苗期管理、栽植技术、幼林抚育。     

PCV2免疫调节及遗传变异研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)感染引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),严重消耗机体淋巴细胞并出现免疫抑制,极易引起继发感染,减缓猪群的生长速度并增加其死亡率。细胞因子IFN-α和IL-10在病毒感染后的免疫调节机制中起到重要作用;PCV2的高突变率,全球优势基因型的流动以及新的遗传变异的出现,使得该病毒在分子领域的研究更加必要。笔者就PCV2感染后的免疫调节和病毒遗传变异进展进行综述,旨在为该病毒致病机制、疫苗防控方面的研究提供参考。     

干旱地区暴马丁香的育苗技术

简要介绍了暴马丁香的生物学特性,并从9个方面详细说明了暴马丁香在干旱地区的育苗技术。     

干旱地区皂角育苗技术

介绍了皂角的生物学特性及其利用价值。根据其生物学特性、形态特征和种子的特点,详细说明了皂角在干旱地区的育苗技术。     

猪圆环病毒2型体外滚环复制方法的建立

通过建立猪圆环病毒2型(PCV-2)体外滚环复制(RCA)方法,为PCV-2体外检测探寻更为简便易行的路径。先将西北农林科技大学预防实验室保存分离纯化的PCV-2病料以传统PCR方法扩增出全基因组片段,然后在没有PCR扩增仪的情况下,只用简单的恒温装置,摸索RCA扩增条件,建立体外扩增PCV-2全基因组的方法。最后将2种方法扩增的全基因组片段进行测序,对其相似性进行比对。结果表明,以传统的PCR方法和RCA方法均扩增出1 767bp大小的片段,测序发现两者相似度达到99.9%。可见,成功建立了PCV-2体外滚环复制方法,扩增出病毒的全基因组片段。     

副猪嗜血杆菌对猪气管上皮细胞的黏附作用及其黏附模型的建立

为了探讨副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)与原代培养的猪气管黏膜上皮细胞的相互作用,应用气管支气管结扎灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞,于胶原覆盖的盖玻片上培养,使上皮细胞分化成假复层黏膜纤毛上皮细胞,然后以对数生长期不同Hps含量的菌液感染上皮细胞和猪脐静脉血管内皮细胞,分别作用1、2、34、h后,通过革兰氏染色法观察Hps对细胞的黏附情况。结果表明,Hps可黏附在上皮细胞和内皮细胞表面;Hps对气管上皮细胞有毒性作用,致细胞变性坏死和凋亡;Hps对细胞的黏附力与其在菌液中含量和作用时间有关,以菌落形成单位计,当含量为1.0×108mL-1且感染4 h后,黏附效果最好。高倍显微镜下可见大量Hps黏附于猪气管上皮细胞,只有个别Hps黏附于猪血管内皮细胞表面。说明Hps对猪气管黏膜上皮细胞的黏附能力远强于猪血管内皮细胞,可以利用猪气管黏膜上皮细胞建立副猪嗜血杆菌的黏附细胞模型。     

朝阳地区松毛虫持续控灾治理模式的研究

通过实施国家级松毛虫持续控灾治理工程,根据本地区松毛虫发生特点、地形特点、生态环境条件等因素,研究出5种松毛虫持续控灾治理模式。     

应用植苗袋法进行坡地山杏造林试验

植苗袋法栽植山杏试验,是半干旱地区造林新技术研究的主要内容。试验表明,植苗袋造林法平均提高造林成活率29.3个百分点;在造林后的14个月调查,平均地径生长量增加86%,平均高生长量增加69%,平均根径生长量增加31%,平均总根长生长量增加37%,平均根系数量增加55%。